过表达硒代半胱氨酸甲基转移酶烟草的硒耐受特性分析

以经鉴定的硒代半胱氨酸甲基转移酶（Selenocysteine methyltransferase,SMT）转基因烟草（Nicotiana tada-cum L）和野生型烟草(NC89)为材料,置于添加不同质量浓度（０、２０、４０和６０ｍｇ／Ｌ）硒酸钠的MS培养基上进行 培养,35d后分别测定两种处理材料的过氧化物酶活性、叶绿素、鲜质量和株高等生理生化指标．结果表明：在不同质量浓度硒酸钠处理后,SMT转基因烟草和野生型烟草的叶绿素质量分数、鲜质量及株高均较各自对照明显下降,比较而言,野生型烟草的下降幅度明显大于转基因烟草;另一方面,野生型烟草过氧化物酶（Peroxi-dase,POD）活性表现强烈的应激反应,其活性明显高于转基因烟草．生长生理与表型特性表明ＳＭＴ转基因烟草具有一定的硒耐受性．     

鄂马铃薯3号遗传转化体系的构建与表达

以鄂马铃薯（Solanum tuberosum L.）3号为试验材料，将含有来源于黄芪的硒代半胱氨酸甲基转移酶基因（AbSMT）的质粒pBinAr进行PCR扩增以及酶切连接构建重组转化子pBI121-AbSMT，运用农杆菌转化法，设置农杆菌菌液浓度梯度、侵染时间以及共培养时间组合进行遗传转化，并且通过PCR鉴定以及GUS组织化学染色进行基因表达验证。结果表明，筛选抗生素是50.00 mg/L的Kan，农杆菌菌液浓度为0.50(OD600 nm)，侵染时间为8 min，共培养时间为3 d，能够实现鄂马铃薯3号高效遗传转化，同时成功构建了AbSMT基因转化的鄂马铃薯3号。