谷胱甘肽-S-转移酶-ASPP2融合蛋白的原核表达及纯化

为表达并初步纯化包含ASPP2活性区域和不包含其活性区域的谷胱甘肽-S-转移酶(GST)-ASPP2融合蛋白。采用PCR扩增两段ASPP2基因短片段,在引物5'端和3'端分别引入BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点,将其克隆进入原核表达载体pGEX-4T-1;异丙基硫代-半乳糖苷(IPTG)诱导重组质粒pGEX-4T-1-ASPP2在大肠杆菌BL21(DE3)中表达同时带有谷胱甘肽-S-转移酶(GST)标签的融合蛋白;超声法裂解大肠杆菌,应用谷胱苷肽琼脂糖树脂纯化可溶的GST-ASPP2融合蛋白;通过SDS-PAGE和Western blot验证GST-ASPP2融合蛋白的表达。结果表明,已成功的构建了GST-ASPP2小片段融合蛋白表达载体,在Western blot分析中,4个蛋白条带均能被鼠抗GST单克隆抗体特异性识别,条带所在位置和GST-ASPP2的分子质量相符。构建了GST-ASPP2重组质粒,在大肠杆菌BL21中高效表达GST-ASPP2融合蛋白,为进一步研究ASPP2全长,N-末端和C-末端生理意义奠定了基础。     

壳聚糖常温保鲜南果梨的研究

以壳聚糖为涂膜剂对南果梨进行常温保鲜实验,结果表明,以１．５％浓度壳聚糖涂膜的南果梨其硬度、Ｖｃ含量与新鲜南果梨接近。腐烂率和失重率也非常小。失重率,保鲜效果明显优于对照组,经１．５％浓度壳聚糖涂膜处理的南果梨在常温下可贮５０ｄ以上。     

食品辐照标志物DiHT的人工抗原合成及鉴定

以二氢脱氧胸腺嘧啶(DiHT)为初始反应物,应用琥珀酸酐法合成二氢脱氧胸腺嘧啶的衍生物,即半抗原DiHT-COOH,经薄层色谱(TLC)和核磁共振波谱(NMR)对其进行鉴定;采用混合酸酐法与活化酯法分别将半抗原与载体蛋白BSA、OVA进行偶联,制备二氢脱氧胸腺嘧啶的人工抗原和包被原,通过紫外扫描、SDS-PAGE凝胶电泳方法对其进行鉴定,偶联比分别为9.8∶1和12∶1。人工抗原偶联成功后免疫BALB/c小鼠制备多抗血清,间接非竞争ELISA方法检测效价达1∶2.56×104,表明人工抗原合成成功。     

大白菜BrAGL19的克隆及表达分析

利用同源克隆的方法在大白菜中获得一条与拟南芥AGL19基因高度同源的cDNA序列,命名为BrAGL19.序列分析结果表明,该基因cDNA序列全长660 bp,编码219个氨基酸,与拟南芥AGL19 cDNA编码氨基酸的一致性为85.07%,具有典型的MADS-box和K-box结构.实时荧光定量PCR检测结果表明,在春化过程中,BrAGL19的表达量不断增加;在抽薹开花过程中,18 h的长日照较12 h的短日照更能促进该基因的表达.由此推测,BrAGL19基因对大白菜抽薹开花的调控起着重要作用.     

榛子壳棕色素的提取及稳定性研究

为开发天然棕色素,以榛子壳为原料,研究榛子壳天然棕色素的提取工艺和稳定性.结果表明:棕色素的最佳提取条件是在80℃下,以60%乙醇浸提80min.榛子壳棕色素为水溶性色素,具有良好的耐热性;强光长时间照射会影响色素的稳定性;在pH值4～12范围内,色素稳定性良好;Na+,K+,Ca2+,Al3+,Mg2+对色素无影响,但Fe3+,Cu2+,Zn2+对其影响较大;色素对常见的食品添加剂稳定,但柠檬酸使其发生轻微褪色.以榛子壳为原料提取棕色素的提取工艺简单,具有一定的开发利用价值.     

基础化学课堂教学的基本做法

教书育人是教师的神圣职责，每位教师都可以通过日常教学工作为教书 做出自己的贡献。该作根据多年高校化学基础课教学的实践，介绍了在课堂教学中教书育的体会。     

CAI在高等农业院校化学课教学中的应用

计算机辅助教学的开展是目前高等农业院校教学改革的重要举措，也是今后教学垢一个发展趋势。化学课计算机辅助教学软件开发过程中知识的切入点的确定是ＣＡＩ开发成败的关键。本结合目前农业院校化学课教学内容，对适合ＣＡＩ教学的内容进行了探讨。     

高等农业院校化学课程教材建设的思考

本从化学与农学、生物学科的联系入手，综合考虑化学各学科在高等农业教育中的作用，阐述了如何在相对统一的前提下编写符合教学实际的具有个性的教材，以及如何使教材适用课程改革的新形势和处理好化学学科内部及为之服务的相关学科之间的关系。     

超声波法提取山楂中咖啡酸的工艺研究

超声波作为辅助提取条件,以咖啡酸提取量为依据,研究山楂中咖啡酸的提取工艺。通过正交试验,优选提取工艺,结果表明,用95％乙醇20倍量、600W超声提取30min,效果最佳。     

提高生物化学专业硕士研究生素质的思考

高等农业院校研究生教育对于建立现代化农业及国家经济建设具有重要战略意义。根据生物化学在高等农业院校研究生培养中的重要地位，本就如何培养具有高素质、创新能力的研究生，以适应21世纪现代生物科学，生物技术发展，从课程构建，教材建设，面向生产和社会实践，提高综合能力诸方面做了探索，以期对本专业的硕士生培养有所助益。