烯丙孕素内服溶液的临床药效和靶动物安全性研究

研究国产烯丙孕素内服溶液的临床药效和靶动物安全性，为其新兽药注册和临床合理应用提供依据。通过发情间隔、发情率、发情集中度、妊娠率等指标评价烯丙孕素内服溶液调控母猪同期发情的临床效果；通过比较给药前后的临床体征、血常规指标、血清生化指标及组织病理学变化，评价烯丙孕素内服溶液对靶动物母猪的安全性。实验性临床试验中，国产烯丙孕素内服溶液高（25 mg·d-1）、中（20 mg·d-1）、低（10 mg·d-1）剂量组以及空白对照组的母猪从停药到出现发情反应的间隔时间分别为（3.45±0.81）（3.35±0.66）（5.21±2.65）和（11.71±5.39）d，发情率分别为100%（20/20）、100%（20/20）、95%（19/20）、70%（7/10）。扩大临床试验中，国产烯丙孕素内服溶液组和进口药物对照组的母猪在药物调控下均表现出良好的同期发情效果，发情间隔分别为（3.59±1.07）d和（3.75±1.22）d，发情率分别为96.72%（59/61）和98.33%（59/60）。靶动物安全性试验中，国产烯丙孕素内服溶液在5倍推荐剂量（100 mg·d-1）范围内对母猪的血液生理生化功能和主要脏器未造成明显的不良影响。结果表明，国产烯丙孕素内服溶液调控母猪同期发情，一次量20 mg，连续给药18 d，临床应用安全、有效。     

苏格兰折耳猫骨软骨发育不良的诊疗体会

苏格兰折耳猫骨软骨发育不良也称为苏格兰折耳猫骨营养不良,是影响骨骼生长和关节软骨形成、导致四肢远端和尾部畸形的一种遗传性疾病。一例疑似病例中患畜主要表现为双侧后肢跗关节处肿胀,有疼痛感,爪部、尾部变短、厚,弯曲不灵活。经血常规和影像学检查确诊为苏格兰折耳猫骨软骨发育不良。通过一段时间药物治疗,病情好转,后肢可以着地走路。     

HPLC法测定猪体内双氯芬酸的血药浓度

建立猪血浆中双氯芬酸含量的HPLC测定法。猪血浆中双氯芬酸采用正己烷-异丙醇混合溶液(90∶10,V/V)提取,HPLC紫外检测器检测。色谱柱为C18柱,流动相为甲醇-15g/L乙酸水溶液(80∶20,V/V),测定波长为276nm。外标法定量。结果表明,血浆中杂质不干扰双氯芬酸的测定,双氯芬酸血药浓度在0.025μg/mL~20.0μg/mL范围内线性关系良好(R2=1),最低定量限为0.05μg/mL,高、中、低空白血浆添加样品浓度的日内变异系数和日间变异系数分别小于4%和6%,回收率为85%~97%。结果表明,该方法适用于猪血浆中双氯芬酸含量的测定,可用于含双氯芬酸钠的制剂在猪体内的药物代谢动力学和生物利用度研究。     

UPLC-MS/MS法测定猪体内烯丙孕素的血药浓度

建立猪血浆中烯丙孕素含量的UPLC-MS/MS测定法。血浆中烯丙孕素以液液萃取法提取,采用Inertsil C4(3.0×150mm,5μm)色谱柱和梯度洗脱对待测样品中各成分进行分离,三重四级杆质谱仪的多重反应监测(MRM)模式进行定量分析,内标法定量。流动相A为5mmol/L甲酸铵水溶液,B为乙腈,流速为0.4mL/min,进样量为10μL。建立的烯丙孕素检测方法在1ng/mL~100ng/mL浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数大于0.999 2。烯丙孕素3个空白血浆添加浓度样品(1、50、100ng/mL)的批间回收率分别为93.1%±3.98%、92.7%±5.75%、88.9%±3.69%,日内变异系数分别为3.50%~14.35%、3.43%~6.20%和2.88%%~4.15%,日间变异系数在5.11%~8.86%之间。方法的检测限(LOD)和定量限(LOQ)分别为0.5ng/mL和1ng/mL。基质效应对烯丙孕素的含量测定有增强作用,烯丙孕素在低浓度(1ng/mL)为114.65%,中浓度(50ng/mL)为109.23%,高浓度(100ng/mL)为113.59%。待测样品预处理后在样品室(4℃)放置8h的时间内,低、中、高3个添加浓度水平的变异系数均小于11%,表明药物在样品室测定期间有较高的稳定性。将样品反复冻融3次后,低、中、高3个浓度添加水平的变异系数均小于9%,表明血浆样品中烯丙孕素经3个循环冻融后仍可保持较高的稳定性。该方法可用于准确检测猪血浆中烯丙孕素的含量。     

江苏中部地区猪大肠杆菌病血清型鉴定及毒力基因的调查

为了调查江苏中部地区猪大肠杆菌病的流行情况,笔者从江苏中部地区的发病猪场采集413份疑似猪大肠杆菌病病料进行细菌分离和生化鉴定,采用PCR方法对毒力基因进行检测,以期对江苏地区研制猪大肠杆菌疫苗和筛选防治猪大肠杆菌病敏感药物提供参考。     

烯丙孕素内服溶液调控母猪同期发情的临床药效试验

为评价国产烯丙孕素内服溶液调控母猪同期发情的临床药效,选取性成熟后备母猪171头进行实验性临床试验和扩大临床试验,根据母猪发情及妊娠情况评价其临床药效。结果显示:实验性临床试验中,国产烯丙孕素内服溶液高(25 mg/d)、中(20 mg/d)、低(10 mg/d)剂量组以及空白对照组母猪从停药到发情的间隔时间分别为(3.45±0.81)d、(3.35±0.66)d、(5.21±2.65)d和(11.71±5.39)d,各用药组的发情间隔与空白对照组相比显著缩短(P0.05);扩大临床试验中,国产烯丙孕素内服溶液组和进口药物对照组的母猪在药物调控下均表现出良好的同期发情效果,发情间隔分别为(3.59±1.07)d和(3.75±1.22)d,发情率分别为96.72%(59/61)和98.33%(59/60)。研究结果表明,国产烯丙孕素内服溶液按推荐剂量(20 mg/d)连续给药18 d,可以使母猪达到良好的同期发情效果。     

犬肠套叠的诊疗体会

犬肠套叠病多见于幼犬,以2~4月龄幼犬较为多见,而且易伴随着套叠引起肠管局部血液循环障碍,病情发展迅速,发病后期死亡率高。笔者临床遇到了1例犬肠套叠病例,运用B超检查技术及时作出诊断,采用灌肠疗法、手术疗法,经治疗和后期护理,病犬痊愈出院。     

蒙农杂种冰草AcdMYB1基因克隆及表达分析

‘蒙农杂种’冰草(Agropyron cristatum×A.desertorum‘Hycrest-Mengnong’)具有干草产量高，适口性好，抗逆性强的特点，是中国北方干旱地区建立人工草地的适宜草种。本研究利用同源克隆方法从‘蒙农杂种’冰草中克隆得到的1个MYB类转录因子基因(命名为AcdMYB1),对其进行了生物信息学分析和表达分析。结果表明：该基因cDNA序列长度为1 161 bp,包含完整开放阅读框(ORF)为969 bp,编码322个氨基酸，具有MYB转录因子的保守结构域。AcdMYB1与小麦族的山羊草、普通小麦、野生二粒小麦的同类基因亲缘关系最近，序列一致性均在90%以上。组织表达中AcdMYB1基因在穗中的表达量最高，其次为叶、根，茎中表达量最低；在模拟自然干旱胁迫下，能够显著降低AcdMYB1的表达水平。烟草亚细胞定位显示，该蛋白定位于细胞核。本研究为进一步探索‘蒙农杂种’冰草AcdMYB1基因及MYB转录因子家族提供了科学依据。