心肌细胞特异性BRCC36转基因小鼠的构建

为构建心肌细胞过表达BRCC36转基因小鼠,利用Gateway技术原理构建BRCC36过表达载体,用显微注射技术将构建的载体注入小鼠受精卵中,转移到代孕母鼠内自然生产;通过PCR法鉴定筛选阳性子代转基因小鼠;提取阳性转基因小鼠心脏组织蛋白,通过Western blot方法检测BRCC36表达量;比较转基因阳性小鼠与野生型小鼠生长发育情况。结果表明:成功地将外源性BRCC36基因整合到子代转基因小鼠基因组中,并在SP级环境下饲养繁殖到10代以上;转基因阳性小鼠心脏组织中BRCC36表达均明显增高且稳定表达,阳性转基因小鼠与野生型小鼠生长发育没有明显差异。这一研究成功构建了心肌细胞特异性过表达BRCC36转基因小鼠,为进一步研究BRCC36在病理性心肌重构中的作用提供了理想的工具小鼠。