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【目的】获得鸡α干扰素重组酵母菌诱导表达的最佳诱导时间和甲醇的体积分数,并测定诱导表达产物对鸡马立克氏病毒(MDV)和鸡新城疫病毒(NDV)的抑制能力。【方法】挑取2个鸡α干扰素重组酵母菌单菌落至BMGY培养基中培养,待菌液OD600为4左右时,分别转接至BMMY培养液诱导,1瓶每隔12 h补加1次体积分数0.5%甲醇,另1瓶每隔12 h补加1次体积分数1%甲醇,于24,48,72 h收集样品,备SDS-PAGE检测用。根据不同时间(24,48,72,96 h)诱导上清液表达量的差异,留用表达量最高时段的上清液,经初步纯化后,利用鸡胚成纤维细胞(CEF),分别测定重组酵母鸡α干扰素抑制MDV及NDV的能力。【结果】鸡α干扰素重组酵母菌在每隔12 h补加1次体积分数1%甲醇诱导48 h时,或每隔12 h补加1次体积分数0.5%甲醇诱导72 h时,重组酵母鸡α干扰素表达量均达到最高;且诱导上清液具有较好地抑制MDV、NDV的能力。【结论】获得了鸡α干扰素重组酵母菌小量发酵的最佳条件;获得的重组酵母鸡α干扰素对MDV和NDV有明显的抑制作用。 相似文献
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我部驻地某猪场于 2 0 0 0年 12月 9日发生一起妊娠猪体温升高 ,腹式或犬坐式呼吸 ,眼结膜潮红 ,粪便干燥 ,尿液呈桔黄色为主要特征的疾病。经过临床检查和实验室诊断 ,确诊为弓形虫病。现报告如下。1 症状和诊断发病猪均是妊娠母猪 ,体温 40~ 42℃ ,稽留热 5~ 7d。眼结膜潮红。腹式或犬坐式呼吸 ,吸气深长、呼气浅短。拒食。粪便干燥并附有少量粘液 ,尿液呈桔黄色。少数病猪耳尖、腹下出现紫斑。半数猪发生流产。主要病理变化 :肺呈暗红色、间质增宽并有少量出血点 ,肝有点硬且有白色的坏死灶 ,肾有出血点。送军需大学经血色素试验及动… 相似文献
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【目的】探索V形孔培养法(WOW)、改进V形孔培养法(mWOW)和常规微滴培养法对牛胚胎体外生产效果的影响。【方法】将牛卵母细胞和受精卵分别采用常规微滴培养法(对照组)、WOW和mWOW进行体外培养,对照组每个微滴中置入20~25枚卵母细胞或胚胎,WOW和mWOW组每个V形孔中置入1枚卵母细胞或胚胎,计算卵裂率、囊胚率及受精后第6,7,8天的囊胚总细胞数和囊胚孵化率。【结果】mWOW组的卵裂率、囊胚率及第6,7,8天囊胚的总细胞数、囊胚孵化率与常规微滴组差异不显著(P0.05),但显著高于WOW组(P0.05);3个组第6,7,8天获得的囊胚总细胞数均呈逐渐下降的趋势。【结论】以TCM-199为基础培养液,用mWOW可以完成牛胚胎体外生产的全过程,且比WOW培养胚胎具有更强的发育能力和更好的质量。体外培养时,发育越快的胚胎质量越高。 相似文献
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