金钗石斛类原球茎原生质体的分离

以具有较多生长点的金钗石斛PLBs为材料,研究通过酶解法获得原生质体的适宜条件。结果表明,酶液配比为φ=1%纤维素酶（Cellulase Onozuka R10）＋φ=0.4%果胶酶（Macerozyme Onozuka R10）＋0.65mol·L-1甘露醇,pH5.7;黑暗条件下,（25±2）℃,60r.min-1振荡酶解6h,800r.min-1离心分离4min,获得的原生质体质量较好。经计数和伊凡蓝染色法检测,用此法获得的金钗石斛PLBs原生质体鲜质量产量为（8.25±0.17）×105个.g-1,活性为（90.24±1.84）。（蓝光（470～75nm）激发活力检测发现较小的分生细胞具有较强的活力。