西瓜ClPDF2.1蛋白的原核表达及其对香蕉枯萎病菌的抑制活性测定

尖孢镰刀菌古巴专化型侵染香蕉引起的香蕉枯萎病严重危害中国香蕉产业。植物防卫素是一类小的富含半胱氨酸的抗真菌蛋白。本研究旨在了解西瓜（Citrullus lanatus）防卫素蛋白ClPDF2.1对香蕉枯萎病菌的抑制活性。提取西瓜RNA后反转录为cDNA,以西瓜cDNA为模板,克隆ClPDF2.1基因,将测序正确的ClPDF2.1连接到载体pGEX-6P-1,随后转化Trans BL21(DE3)pLysS,IPTG 诱导GST-ClPDF2.1融合蛋白表达16 h后,经SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定GST-ClPDF2.1融合蛋白的表达,进行GST-ClPDF2.1融合蛋白体外抑制香蕉枯萎病菌生长的功能初探。本研究为进一步培育转基因香蕉抗病品种奠定基础。     

海南垦区职工家庭农场经营现状及其发展对策

论述和分析现阶段海南垦区职工家庭农场经营中存在的主要问题及制约因素,提出家庭农场要适应产业化发展要求,必须深化国有农场土地和劳动力管理体制改革,制定优惠政策,强化服务体系,完善双层经营体制等策略。     

冬季有窗式鸡舍内不同位置环境指标的相关性分析

试验旨在研究冬季有窗式鸡舍内不同位置对光照、温度、相对湿度、氨气浓度和细菌密度等环境指标的影响以及环境因素之间的相关性。结果表明:东西方向上,细菌密度存在显著差异,东部显著高于西部(P0.05),其他环境因子差异不显著;南北方向上,湿度和氨气浓度差异显著,南部显著高于北部(P0.05),而光照、温度和细菌总数差异不显著。相关分析表明,鸡舍内不同位置的光照强度与氨气浓度间存在显著的正相关关系(Sig.(2-tailed)0.05),温度与湿度间也存在显著正相关关系(Sig.(2-tailed)0.05),其他各环境因素之间无显著相关关系。由此可见,有窗式鸡舍冬季室内光照强度与氨气浓度间、温度与湿度间有显著性的关系,而且这些环境指标受不同位置的影响,提示需要综合考虑不同位置、环境指标及其相关性进行养殖环境控制,以提高动物生产水平和动物福利。     

亚急性瘤胃酸中毒耐受性不同的奶牛瘤胃上皮形态及功能差异研究

本试验旨在探究SARA（亚急性瘤胃酸中毒）耐受性不同奶牛的瘤胃上皮形态及其功能差异。选取12头装有永久性瘤胃瘘管的泌乳中期荷斯坦奶牛,饲喂精粗比为4∶6的日粮,并根据瘤胃pH值的高低,分为SARA易感组（SUS,n=4）和SARA耐受组（TOL,n=4）。瘤胃上皮形态及功能分析结果显示,与TOL组比较,SUS组奶牛瘤胃上皮的棘突层和基底层厚度明显增厚（P<0.05）,SUS组奶牛瘤胃上皮组织中参与挥发性脂肪酸（VFA）吸收的PAT1、MCT4和DRA基因表达量较TOL组显著下调（P<0.05）,而H+转运载体NHE1、NHE2、NHE3和调节胞内pH的vH+ATPase和Na+/K+ATPase的表达量显著升高（P<0.05）;对参与调控瘤胃VFA代谢的基因定量结果表明,SUS组PDHA1和SREBP2的表达量显著高于TOL组（P<0.05）,而HMGCL-2的表达量显著降低（P<0.05）;此外,SUS组CDK2、CDK6和Cyclin D1、Bad及Caspase-9等参与瘤胃上皮细胞增殖与凋亡的基因表达量显著高于TOL组（P<0.05）。结果说...     

中国-东盟自由贸易区对中国的影响及对策

分析中国-东盟自由贸易区的主要内容和经济效应及其对中国的影响,并提出相应的政策措施。     

亚急性瘤胃酸中毒耐受性不同的奶牛血浆和乳中脂肪酸及代谢物组成分析

为比较研究对亚急性瘤胃酸中毒（SARA）耐受性不同的奶牛血浆和乳中代谢组的差异，试验选用12头装有永久性瘤胃瘘管的泌乳中期荷斯坦奶牛［泌乳天数=（114±22） d］，饲喂精粗比为4∶6的全混合日粮。在试验期第20和21天晨饲后0、2、4、6、8和12 h监测瘤胃pH值，在早晚饲喂前收集奶样，晨饲6 h后采集颈静脉血，用于测定脂肪酸及代谢物组成。基于奶牛瘤胃平均pH值高低，将奶牛分为SARA易感组（SUS，瘤胃pH=5.76，n=4）和SARA耐受组（TOL，瘤胃pH=6.10，n=4）。脂肪酸测定结果分析显示，与TOL组相比，SUS组奶牛血液及乳中的碳链长度≤C16的脂肪酸含量显著增高（P<0.05），而>C16的脂肪酸的含量显著降低（P<0.05），乳中饱和脂肪酸及单不饱和脂肪酸含量均显著降低（P<0.05）。血浆代谢组结果显示， SUS组奶牛血浆中L-苯丙酮酸水平显著降低（P<0.05），而MG（18：0/0：0/0：0）、9-HODE、12（13） Ep-9-KODE、烟酰胺、异戊基肉碱、磷酸肌酸和L-谷氨酸水平显著升高（P<0.05）。乳代谢组分析结果显示，与TOL组比较，SUS组奶牛乳中的1-硬脂酰磷酸甘油丝氨酸和鞘氨醇水平显著升高（P<0.05），而甘油磷酰基乙醇胺、3-磷酸甘油和乳清酸等其他14个差异代谢物水平显著降低（P<0.05），这些差异代谢物主要涉及甘油磷脂代谢、甘油脂代谢及泛酸与辅酶A代谢等代谢途径。综上所述，SARA耐受性不同的奶牛的血浆和乳中脂肪酸及代谢物组成存在较大差异，SUS组奶牛血浆中氨基酸代谢活动增加，乳腺的乳脂从头合成能力较强，而从血液中摄取长链脂肪酸能力减弱，与此同时，易感奶牛乳中磷脂、乳清酸等营养物质水平下降，乳品质下降。     

不同水平互花米草提取物对泌乳奶牛生产性能和血清生化指标的影响

文章旨在研究饲粮中添加互花米草提取物对奶牛产奶性能及血清生化指标的影响。试验选取体重(550±25) kg、胎次2～3胎、泌乳期(110±24) d及泌乳(24.2±4.2) kg/d的泌乳期荷斯坦奶牛90头,采用完全随机区组设计分为6组,每组15头,进行为期60 d的饲养试验,其中预试期10 d,正试期50 d。对照组饲喂基础饲粮,处理组分别在基础饲粮中每天添加5、10、25、50 g/d和100 g/d的互花米草提取物。结果表明:整个试验期间,处理组的采食量、产奶量、乳脂率、乳蛋白率、总固形物含量、乳尿素氮含量以及血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、谷氨酰胺基转移酶、α-羟丁酸脱氢酶、乳酸脱氢酶、总蛋白、球蛋白和肌酐含量与对照组相比均无显著差异(P>0.05);5～50 g/d组乳糖率和白蛋白含量显著高于100 g/d组(P<0.05)。互花米草提取物添加量5～50 g/d组体细胞数显著低于对照组和100 g/d组(P<0.05)。50 g/d组尿素氮浓度显著高于100 g/d组(P<0.05);而该组尿酸浓度显著低于5 g/d组(P<0.05)。50 g/d组葡萄糖浓度显著高于对照组、5 g/d和10 g/d组(P<0.05)。试验条件下,饲粮中添加100 g/d范围内的互花米草提取物对奶牛产奶性能没有明显影响,但50 g/d组可以提高乳糖率和血糖浓度,降低体细胞数,是适宜的添加剂量。     

亚急性瘤胃酸中毒对泌乳奶牛血浆生化指标及代谢组的影响研究

本试验旨在探究亚急性瘤胃酸中毒（subacute rumen acidosis, SARA）对泌乳奶牛血液生化指标和血浆代谢组的影响。试验选用8头装有永久性瘤胃瘘管的泌乳中期奶牛,随机分成对照组（CON）（n=4）和处理组（SARA）（n=4）,CON组与SARA组分别饲喂精粗比为4∶6和6∶4的全混合日粮,试验周期为3周。于试验期每周最后一天晨饲后0、2、4、6、8和12 h进行瘤胃pH的测定,同时在pH测定当天晨饲后6 h采集颈静脉血样,用于血液生化指标和代谢组的分析。结果表明,与CON组相比,SARA组的瘤胃pH显著降低（P=0.002）,两组干物质采食量没有显著差异（P=0.524）。血浆生化指标结果显示,与CON组比较,SARA组奶牛的β-羟丁酸浓度显著降低（P=0.007）,甘油三酯浓度显著升高（P=0.014）。采用液相-质谱（LC-MS）联用技术对血浆进行代谢组学分析,主成分分析（PCA）和偏最小二乘法分析（PLS-DA）结果显示,SARA组奶牛血浆代谢物组成较CON组发生明显变化,两组间共检测到26种差异代谢物（VIP>1 & FDR<0.05）,与CON组相比,SARA组奶牛血浆中的7-酮脱氧胆酸、脱氧胆酸、胆酸、12-酮脱氧胆酸、12（13）Ep-9-KODE、12,13-DHOME和L-天冬酰胺代谢物含量显著升高（FDR<0.05）,而十一烷二酸、十六烷二酸、9-HODE、血氧烷B3、PGE2、L-精氨酸、L-色氨酸、L-苏氨酸、异丁酰甘氨酸、异戊酰甘氨酸、马尿酸、4-羟基马尿酸和6-磷酸-2-脱氢-D-葡萄糖酸酯等代谢物含量显著降低（FDR<0.05）。综上,与CON组比较,SARA组奶牛的脂代谢、氨基酸代谢和糖代谢发生显著变化,这些物质可作为SARA潜在的生物标志物。     

国有企业改制后公司法人治理结构的建设途径探讨

从现代公司法人治理结构的基本特征出发,分析目前我国国有企业改制后公司法人治理结构存在的主要问题,并从转变政府职能、合理分散股权、加强董事会功能、建立内部监督机制、完善公司法人结构和企业党组织建设等六个方面探讨了国有企业改制后公司法人治理结构的建设途径。     

热研4号王草原生质体的制备

开展原生质体融合育种以及利用原生质体瞬时表达系统进行分子生物学实验的前提和基础是建立高效、有活力的原生质体制备体系。为建立热研4号王草原生质体制备体系,本研究以热研4号王草叶片为原生质体制备的外植体,将切成细丝的热研4号王草幼叶置于含2.0%纤维素酶+0.5%果胶酶Y-23+0.5%崩溃酶+0.6 mol/L甘露醇+40 mmol/L KCl+6 mmol/L MES,p H 5.7+20 mmol/L Ca Cl2+0.15%BSA的酶液中,在避光条件下置于50 r/min的摇床酶解6~8 h,获得了大量有活力且均匀一致的原生质体。经过荧光素双醋酸酯(fluoresceindiacetate,FDA)染色和Western blot检测目的蛋白表达,结果发现采用酶解法制备的热研4号王草原生质体活力可达75%,且可用于表达拟南芥外源蛋白。本研究可为下一步利用热研4号王草开展分子生物学研究奠定基础。