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本实验室以前已经克隆了278个Avr/Cf介导的过敏性反应产生与不产生时差异表达的番茄ACE cDNA片段.为了进一步分析这些ACE基因在植物抗病中的功能,本研究通过RACE等方法克隆了其中8个番茄ACE 片段的全长cDNA序列,即ACE13,ACE14,ACE19,ACE25,ACE29,ACE36,ACE39和ACE112.其中ACE14,ACE25,ACE29,ACE36和ACE39分别与信号传导,防卫反应,蛋白合成,代谢等相关,而另外3个则功能未知.与番茄EST数据库中相关序列的比对分析后发现,ACE13,ACE25,ACE29,ACE39和ACE112与数据库中对应序列高度相似,但ACE14,ACE19和ACE36则与数据库中对应序列有显著差异,ACE14 3'端有322 bp片段延伸,ACE19有不同的3'端200 bp序列,而ACE36则在5'端有132 bp的插入序列.这些结果表明运用EST库序列资源时应充分考虑到EST序列的不准确性或者可变剪接产生多种产物的可能性. 相似文献
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病毒诱导的基因沉默 总被引:1,自引:0,他引:1
"病毒诱导的基因沉默"(virus-induced gene silencing,VIGS)一词最早用于描述被病毒侵染的植物的"恢复"现象,是一种植物抗病毒侵染的自然机制,现在已被开发成通过插入目的基因片段的重组病毒抑制植物内源基因表达的遗传技术,用于基因功能分析VIGS由小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)驱动,siRNA单链与RNA诱导的沉默复合物(RNA induced silencing complex,RISC)结合后,特异性地和与siRNA同源的靶标RNA结合,并降解RNA模板已有源于15种不同类型病毒的VIGS载体得到开发和应用在VIGS栽体中插入的目的片段、重组VIGS病毒载体的植物导入方法、沉默处理时的寄主生育期、沉默处理后的植物培育条件等均显著影响VIGS的效率作为一种新型的基因鉴定和功能研究技术工具,VIGS具有无需事先知道目的基因全长序列、获取表型迅速、无需构建转基因植株等诸多优点,已越来越广泛地被应用于植物基因功能研究 相似文献
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