GRP1.8-反义pt4CL1基因对巨尾桉 木质素含量的影响

桉树是桃金娘科桉树属(Eucalyptus）植物的统称,是制浆造纸的主要原料之一,但是桉树中含有大量木 质素,木质素的存在会严重影响纸浆的质量。4-香豆酸颐辅酶A 连接酶(4CL）是木质素单体生物合成的关键酶之一, 抑制4CL 基因的表达,可以有效降低植物中木质素的含量。通过根癌农杆菌介导的叶盘转化法,将形成层定位启动 子GRP1.8 融合的杨树反义4-香豆酸:辅酶A 连接酶基因导入巨尾桉,经卡那霉素筛选和PCR 鉴定,获得9 株转基 因阳性植株。通过4CL 酶活性测定和木质素、纤维素含量的分析,发现转基因组培苗的4CL 酶活性比对照植株下降 了44%,温室转基因幼苗中硫酸木质素含量下降了16%。     

巨尾桉组培快繁与转基因再生体系的优化

以巨尾桉带腋芽的半木质化茎段为最初外植体,通过正交试验优化法,对巨尾桉组培快繁体系建立过程中各项培养基进行了研究,建立起良好的巨尾桉组织培养再生体系,为桉树遗传转化和良种保存提供材料和技术支持,同时对根癌农杆菌介导的叶盘法转化体系进行优化。结果表明:叶片分化芽率提高到26.7%,理论上最佳的转基因巨尾桉叶片直接分化培养基为WPM+6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.15 mg/L,生根培养基中筛选转基因芽段的卡那霉素选择压为20 mg/L。