甘薯TD-SSR-PCR反应体系的优化

为探索甘薯最佳TD-SSR-PCR体系,利用L16(43)正交设计研究2×PCR Mix、引物、模板DNA等主要影响因素的适宜浓度,并在此基础上对扩增程序和聚丙烯酰胺凝胶电泳上样量进行优化。结果表明,优化后的TD-SSR-PCR反应体系包括:10μL 2×PCR Mix、100 ng模板DNA、0.4μmol/L引物,1μL甘油,总体积20μL;优化后的扩增程序为:94℃预变性4 min,94℃变性45 s、Tm+5℃~Tm-5℃(每循环退火温度下降0.5℃,Tm选用一对引物中的较小Tm值)退火30 s(退火时间因扩增片段大小而异)、72℃延伸1 min共20个循环,94℃变性45 s、Tm-5℃退火30 s、72℃延伸1 min共15个循环,最后72℃延伸7 min,4℃保存;聚丙烯酰胺电泳上样量以1.5~2μL为宜。在此条件下,利用引物Z37对10份甘薯材料进行PCR扩增,得到的条带清晰、多态性高,表明此条件适用于甘薯的TD-SSR-PCR反应体系。     

设施西瓜连作障碍发生机理及防治措施

西瓜是重要园艺作物,连作障碍严重制约西瓜产业健康发展,本文从连作西瓜的土壤理化性质变化、土壤微生物环境及群落失去平衡和自毒作用等方面阐述目前西瓜连作障碍产生机理,提出了缓解西瓜连作障碍措施,并对西瓜连作障碍研究进行了展望,以期为西瓜可持续发展提供理论依据.     

2,4-表油菜素内酯(EBR)对菜用甘薯抗寒生理生化的影响

菜用甘薯抗寒性能是其在早春及秋冬季作为蔬菜供应的重要制约因素。以徐菜薯1号菜用甘薯为实验材料,通过对甘薯叶进行外源2,4-表油菜素内酯(EBR)喷施处理,探究其对菜用甘薯抗寒生理生化的影响;并对其诱导抗寒的机理进行研究。结果表明,0.1 mg·L~(-1)的EBR处理下甘薯的抗寒性能最佳。与对照相比在8℃低温胁迫下的48 h内,甘薯叶中3种抗氧化酶(CAT、POD和SOD)活性明显高于对照,3种渗透调节物质(可溶性蛋白质、可溶性糖和脯氨酸)中可溶性蛋白的含量有大幅提高,而细胞的损伤指标(电导率和MDA)的数值均低于对照。外源EBR处理提高了甘薯叶中抗氧化酶的活性及渗透调节物质的含量,减少了细胞膜的损伤,增强了菜用甘薯抵抗低温胁迫的能力。     

隶属函数法对5种菜用甘薯耐寒性的评价

为探讨菜用甘薯低温伤害机理并评价菜用甘薯品种耐寒性,以5种菜用甘薯苗为材料,通过人工气候箱模拟低温实验,以25℃为对照,研究在15℃,5℃低温胁迫下其叶片中生理生化的变化,然后利用隶属函数法对其品种间耐寒性进行评价。结果表明:低温胁迫下5种菜用甘薯叶片中相对电导率和丙二醛(MDA)细胞伤害指标升高;过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性、脯氨酸(Pro)、蛋白质、可溶性糖含量均随着胁迫温度的降低而升高。不同品种间各指标大小及变化差异较大。由隶属函数综合评价得出5种菜用甘薯耐寒性强弱顺序为:15℃低温胁迫下,莆薯53海南本地品种徐菜薯1号徐紫菜薯8号广薯菜2号;5℃低温胁迫下,莆薯53海南本地品种徐紫菜薯8号徐菜薯1号广薯菜2号。     

30份海南地区引种甘薯种质资源的SSR分析

为热带地区甘薯引种和新品种培育提供重要的理论依据,通过农艺性状比较筛选出在海南地区适应性较好的30份甘薯引种种质资源,利用SSR分子标记技术对30份甘薯种质资源进行遗传多样性分析,明确其在DNA分子水平上的遗传差异。结果表明:11对SSR引物可扩增出57条清晰的条带,其中多态性条带53条,多态性百分率93.0%,平均每对引物5.18条。经遗传相似性和聚类分析,30个甘薯品种遗传相似性系数在0.42~0.96,平均为0.62,甘薯品种间遗传多样性较丰富。以0.61的相似系数为阈值,30份材料聚成3大类。     

利用3,5-二硝基水杨酸法测定菜用甘薯叶中的多糖含量

采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法对菜用甘薯叶片还原糖和总糖的吸收光谱、测定和提取条件进行研究,以间接测定多糖含量。结果表明,菜用甘薯叶片中还原糖的最适检测波长为493 nm,DNS显色剂用量为2.0 mL,显色反应时间为10 min,显色反应后静置时间10 min。还原糖及总糖样品液提取水浴温度为100℃,水浴时间为30 min;总糖样液酸解时盐酸用量为2.0 mL,沸水浴时间为20 min。此方法精密度、重现性和回收率符合实验要求,可准确测定菜用甘薯叶片中的多糖含量,实现了对菜用甘薯叶片中还原糖、总糖和多糖含量的同时测定。