旱柳体外培养与直接分化再生系统的建立

给出了旱柳体外培养的方法：9月份至12月份采集1～2a生枝条上带腋芽的茎段,经过筛选确定MS＋0．5mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA为最佳诱导培养基,平均每个芽点产生的不定芽数量为3．5个,20d后苗高为1．8cm;不定芽在MS＋0．1mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA培养基中继代增殖及生长较好,为适宜的增殖培养基;在形成的不定芽中有些不定芽起源于单株苗的切口基部,因此,初步建立了旱柳的直接分化再生系统,可为旱柳的遗传转化等研究奠定基础．经过壮苗处理的幼苗在MS＋0．2mg／LNAA培养基上的生根率达100％,且生根量多,幼苗生长健壮．生根苗移栽至V（草炭土）：V（河沙）为3：1的混合基质中,60d后成活率为90％左右．     

西伯利亚蓼Tau类谷胱甘肽转移酶基因的克隆与表达分析

用RACE技术从西伯利亚蓼（Polygonum sibiricum Laxm.）中克隆了谷胱甘肽转移酶（PsGSTU1）基因完整编码区 cDNA序列,长度669 bp,编码222个氨基酸。经与谷胱甘肽转移酶家族其它成员的氨基酸序列比对和系统进化分析,初步确定PsGSTU1属于谷胱甘肽转移酶Tau家族。利用荧光定量RT-PCR分析表明,PsGSTU1在西伯利亚蓼的叶、茎和地下茎中均有表达,茎中表达量最高,叶和地下茎次之; 3% NaHCO3胁迫后,此基因在叶和茎中的最大表达量出现在胁迫后48 h,而茎在72 h;去胁迫后,此基因在不同部位的表达量表现为：地下茎＞叶＞茎。将PsGSTU1完整的cDNA片段连接至pET28a质粒以构建原核表达载体,并导入大肠杆菌（Escherichia coli）,经IPTG诱导后表达了分子量为26 kD的目的蛋白,表达PsGSTU1的大肠杆菌显著提高了耐受NaHCO3胁迫的能力。