抑制消减杂交技术及其在动物繁育研究中的应用

基因是染色体上具有一定座位的遗传单位.基因表型克隆法是以mRNA为起始材料,利用RT-PCR和接头技术,对差异显示的基因条带进行回收后作探针,在cDNA或基因组DNA文库中筛选新基因.这方面发展起来的新技术主要有：cDNA差式分析法（RDA）、标签接头竞争PCR技术（ATAC-PCR）、抑制消减杂交法（SSH）、基因表达连续分析法（SAGE）、cDNA3＇端限制酶切片段显示法（RFD）等,这些技术省去了分子标记定位分析的繁琐程序,并同时能分离多个未知产物的差异表达基因.其中,抑制性消减杂交技术是一种鉴定、分离组织细胞中选择性表达基因的技术,具有检测的特殊性,在动物和人类的生殖和发育领域广泛应用.     

液态甲醛对雄性小鼠生殖系统的毒性作用研究

为探讨液态甲醛对雄性小鼠生殖细胞的毒性和致突变作用,选用雄性昆明种小鼠为研究对象,进行液态甲醛腹腔染毒,7 d后测定睾丸脏器系数、精子数目、精子形态及精子畸形率及精子微核率。结果表明:中、高剂量组(2.0、20.0 mg/kg)甲醛具有明显的生殖毒性,小鼠睾丸指数、精子数量明显降低,小鼠精子存活率、活动率都受到显著影响;中、高剂量组的精子畸形率、微核率与阴性对照组比较,有显著性差异。由此说明,液态甲醛对雄性小鼠的生殖细胞具有明显的毒性和致突变作用。     

濒危动物遗传资源的保存

随着生物技术、分子生物学、基因工程理论和技术的日臻完善,使得濒危动物遗传资源的长期保存成为现实。动物遗传资源保存方法多种多样,如活体保种、干细胞库、突变体库、生殖细胞库、cDNA文库、基因组文库等。阐述了活体、生殖细胞、胚胎、体细胞、基因组文库的保存方法、影响因素、研究进展、以及发展前景等。各种保存方式各有利弊,要针对不同的物种采取不同的保存方法;多层面、立体化保存是动物遗传资源保存最理想的方式。     

基于微波提取法的茼蒿中黄酮类物质提取工艺优化

[目的]优化茼蒿中黄酮类物质的提取工艺。[方法]采用单因素试验考察乙醇体积分数、料液比、微波功率、提取时间等因素对茼蒿中黄酮类物质提取率的影响,并用正交试验对其提取工艺进行优化。[结果]微波提取茼蒿中黄酮类物质的最佳工艺条件为：乙醇体积分数60%,料液比1∶20（g∶ml）,微波功率为解冻档,提取时间为120 s。在此条件下提取茼蒿中黄酮类物质的提取率为0.319%。[结论]利用微波法提取茼蒿中总黄酮类物质,具有简单实用的特点,可大大缩短提取时间,达到省时、节能和高效的目的。     

响应面法优化茼蒿中黄酮类物质的提取工艺

利用超声波法提取茼蒿中的黄酮类化合物,采用响应面法优化黄酮类物质的提取工艺。在单因素试验的基础上,根据Box-Behnken试验设计原理,利用响应面法分析可得黄酮类物质的最佳提取工艺条件:料液比1:31.9、乙醇体积分数63.4%、提取时间59.7min和提取温度52.9℃。决定系数R2=94.45%,表明方程拟合度较好。因此,基于响应面法分析所得的优化提取工艺参数准确可靠,具有实用价值。