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为了建立传染性法氏囊病病毒RT-LAMP检测方法,用于快速检测传染性法氏囊病,从而评估禽类动物健康情况,试验针对传染性法氏囊病病毒VP3序列设计引物,优化反应时间、温度、体系等获取最佳反应参数,对建立的传染性法氏囊病病毒RT-LAMP检测方法的灵敏度、颜色变化、特异性进行研究并应用该方法检测临床疑似病料。结果表明:传染性法氏囊病病毒在60℃75 min和80℃10 min条件下目标核酸区段大量扩增,以此条件成功建立针对鸡传染性法氏囊病病毒的RTLAMP检测方法;在模板浓度为994.9 ng/μL并进行10倍稀释的情况下,所建立的RT-LAMP检测方法具有极高的灵敏性,可以检测到99.49 fg/μL的样品,比RT-PCR方法的灵敏度高100倍左右;在RT-LAMP的检测结果中加入Gene Finder可使阳性结果变为绿色;该方法只有鸡传染性法氏囊病病毒发生反应,表现出良好的特异性;在临床疑似病料检测中,RT-LAMP检测方法的检出率高达93.75%,比RT-PCR检测方法高25.00%。说明试验建立的传染性法氏囊病病毒RT-LAMP检测方法具有简便、灵敏、快速、强异性高等优点,可用于临床鸡传染性法氏囊病病毒的快速检测。 相似文献
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中草药添加剂提高不同品种猪肉质中相关基因表达量的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
为了研究中草药添加剂对与猪肉品质相关的几个蛋白基因表达量的影响,试验选择晋汾白猪、晋阳白猪、山西黑猪、杜长大三元杂交猪4个品种猪,每个品种猪分别设置中草药组、抗生素组和空白对照组,每组30头。中草药组在基础日粮中添加300目超微粉剂中草药,抗生素组添加金霉素30 g/t和硫酸黏杆菌素6 g/t,空白对照组不添加任何添加剂,经饲养试验和屠宰后从背最长肌取样,提取基因组进行PCR扩增,并自动生成扩增曲线和熔解曲线,检测猪心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因、钙蛋白酶抑制蛋白(CAST)基因、脂蛋白脂肪酶(LPL)基因、肌细胞生成素(MyoG)基因、己糖激酶同工酶(HK)基因、ATP合成酶(ATP5B)基因、磷酸果糖激酶(PFK)基因等7个与肉质相关的蛋白基因相对表达量。结果表明:猪肉中H-FABP、CAST、LPL、MyoG、HK、ATP5B、PFK等7个基因的相对表达量在不同品种猪、不同组内均有差异,不同品种猪中,中草药组不同基因相对表达量多数情况高于空白对照组和抗生素组。尤其是山西黑猪中草药组基因相对表达量明显高于空白对照组和抗生素组,其中中草药组与空白对照组相比H-FABP和HK基因差异显著(P0.05);与抗生素组相比H-FABP、CAST、LPL、MyoG、ATP5B、PFK基因差异显著(P0.05),HK基因差异极显著(P0.01)。晋阳白猪中草药组与空白对照组相比CAST、HK、ATP5B、PFK基因差异显著(P0.05),H-FABP基因差异极显著(P0.01);与抗生素组相比H-FABP、LPL、ATP5B基因差异显著(P0.05),CAST、HK、PFK基因差异极显著(P0.01)。杜长大三元杂交猪和晋汾白猪中草药组各基因相对表达量与空白对照组和抗生素组相比均差异不显著(P0.05)。说明中草药添加剂可以提高不同品种生长育肥猪肉质中7个蛋白相关基因的相对表达量。 相似文献
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