野桑蚕、家蚕海藻糖酶基因5''侧翼区的克隆与序列分析

海藻糖是一种双糖,广泛存在于包括细菌、酵母、植物和无脊椎动物在内的生物体内,主要功能是储备生物代谢所需的能源.在昆虫血液中,海藻糖是一种最重要的糖类,具有供给能量和提供合成生物大分子的底物等功能.其功能主要是通过海藻糖酶(Trehalase)的作用来实现的.家蚕海藻糖酶有可溶型和膜固定型两种类型,可溶型主要存在于蛹期中肠,而膜固定型存在于包括卵巢在内的多种组织.这两种类型酶是由同一个基因表达而形成不同的成熟海藻糖酶.海藻糖酶膜固定型存在于向血液面的卵巢膜内,该基因的表达是由滞育激素诱导调控.卵母细胞通过位于膜内的海藻糖酶,将血液中海藻糖降解成葡萄糖,然后吸收到胞内,最后合成糖原,从而导致蚕卵的滞育.从而海藻糖酶基因是从分子水平来解明家蚕滞育机理的一个重要途径.本实验从野桑蚕、家蚕苏@菊×明@虎基因组中分别克隆了野桑蚕和家蚕的海藻糖酶基因的5′侧翼区片段并进行了测序分析,以供进一步的启动子功能研究,现报道如下.     

绢丝昆虫茧丝蛋白酶抑制剂含量的比较分析

以 6种绢丝昆虫的茧壳为材料 ,对茧丝蛋白酶抑制剂的含量及热稳定性进行了研究。结果表明 :家蚕品种间茧丝蛋白酶抑制剂的含量差异极显著 ,外层丝中含量较多 ,F1代的含量呈双亲中间型 ,偏向于含量较多的亲本 ,雌雄间含量无显著差异 ;家蚕茧丝蛋白酶抑制剂对热稳定性较强 ;天蚕绿茧、野蚕的茧丝中有少量的蛋白酶抑制剂存在 ,蓖麻蚕的茧丝中有微量蛋白酶抑制剂存在 ,天蚕黄茧、柞蚕茧、樗蚕茧的茧丝中基本无蛋白酶抑制剂存在。     

用铬变素2R法对家蚕微孢子虫孢子染色的研究

采用铬变素 2R法 (Chromotrope 2R)染色家蚕微孢子虫 (Nosemabombycis,N .b)孢子和绿僵 (Nomuraearile yi)孢子、曲霉 (Aspergillusflavus)孢子、花粉粒 (Pollengranule)等与N .b孢子形状相似物 ,结果表明 :Chromotrope 2R法特异性地将N .b孢子染成粉红色 ,绿僵孢子、曲霉孢子、花粉粒未被染成红色 ,初步认为Chromotrope 2R法可应用于母蛾镜检的N .b鉴定 ,能明显提高N .b的检出率与准确性 ;染色N .b孢子的最佳时间与温度为 4 0min ,30℃。鉴于本染色法的条件、技术操作简便 ,染色特异性强 ,因而具有良好的应用前景     

宿主域扩大的苜蓿尺蠖核多角体杂交型病毒

将家蚕核型多角体病毒 (BombyxmoriNuclearPolyhedrosisVirus,BmNPV)的解链酶基因DNA和苜蓿尺蠖核型多角体病毒 (AutographacalifonicaMultipleNuclearPolyhedrosisVirus,AcMNPV)的基因组DNA共转染到秋粘虫细胞系Sf 2 1,经过累代的筛选获得既能感染家蚕细胞 ,又能感染秋粘虫细胞的宿主域扩大的杂交型病毒HyNPV。     

应用盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳技术观察家蚕与蓖麻蚕血液蛋白的电泳图谱

用聚丙烯酰胺凝胶电泳,观察了四个家蚕品种和一个蓖麻蚕品种的5龄中期的血液蛋白的电泳图谱,在家蚕中可出现17—18个带,蓖麻蚕中可观察到22个带。 材料与方法 一、材料: 家蚕:东肥、华合原种及其杂交种东肥×华合、华合×东肥。     

家蚕核型多角体病毒egt基因的融合表达

人工合成BmNPVZJ-8株的蜕皮甾醇尿苷二磷酸葡萄糖转移酶基因（egt）5’和3’端引物，利用PCR技术从BmN－PVZJ-8株基因组ＤＮＡ的HindⅢ-D片段中分离出egt基因，将该基因正确克隆到大肠杆菌表达载体pGEX-3X中，在大肠肝菌RB791和TG1中高效表达了egt基因，发现表达产物主要以包涵体形式存在。     

家蚕血液酯酶缺失型的遗传学研究

家蚕血液酯酶电泳图谱中A区酯酶缺失型东34,是共显性等位血液酯酶A区酶带不表达基因BesAo的纯合子,基因符号Bes Ao/Ao。东34是其亲本交配后代的分离,选择,固定后的产物。东34缺失的A区酶带属胆碱酯酶类。     

杆状病毒杀虫剂的研究进展

为了防治有害昆虫对农作物的危害,世界各地大量施用化学杀虫剂,不仅导致了昆虫的抗药性,而且严重地污染了环境,开发安全、有效的能替代化学农药的生物杀虫剂是防治害虫的主要趋向,杆状病毒杀虫剂是一种用于害虫防治的新兴农药。杆状病毒是闭合双链DNA病毒,具有很高的宿主选择性,它的全部宿主成员只限于无脊椎动物,对脊椎动物是安全的。许多野生型核型多角体病毒(NPV)已被广泛用于森林、果树等多年生植物的害虫防治,而重组杆状病毒杀虫剂是改进病毒杀虫剂性能的最佳途径。     

昆虫细胞与幼体生物反应器的应用—蛋白质产品规模化生产方法

蜡状芽孢杆菌是新发现的一种杀虫效率高，杀虫速度快的杀蝗微生物，用４．４×１０＾６和４．４×１０＾７孢子／ｍｌ接种棉蝗大龄跳蝻及成虫，棉蝗的死亡率分别达到８２．６％和８０．８％。毒力测定结果ＬＣ５０为２．７×１０＾８孢子／ｍｌ。林间大试验，杀虫效果达７７．９％。     

家蚕蛹体基因组DNA的快速制备方法

提取家蚕组织ＤＮＡ的方法已有不少报道 ,如夏庆友等[1] 参照文献 [2 ]改进的方法 ,其基本步骤是将家蚕组织在液氮中手工研磨或用玻璃匀浆器匀浆 ,加提取缓冲液和ＰｒｏｔｅｉｎａｓｅＫ ,在 50～ 6 5℃水浴恒温振荡 3～ 6ｈ ,然后用酚、氯仿抽提数次 ,无水乙醇沉淀 ,75%乙醇洗涤后溶于适当体积的 0 1×ＴＥ缓冲液 ,加ＲＮＡ酶消解ＲＮＡ ,保存备用。该方法适于提取丝腺、卵的基因组ＤＮＡ。然而 ,家蚕蛹体由于脂肪、色素较多 ,且整体组织中含有大量的ＤＮＡ酶 ,按上述方法提取ＤＮＡ纯度不高 ,并容易降解。我们分析认为可能是提取液中的…