规模舍饲羊场羊消化道及环境寄生虫情况调查

【目的】调查规模化舍饲羊场及散养羊消化道感染及环境污染寄生虫情况,为中国规模舍饲羊场羊消化道寄生虫综合防控提供参考。【方法】采用离心沉淀法、卢戈氏碘液染色法和饱和蔗糖溶液漂浮法等技术,对采自河南和宁夏的4个规模舍饲羊场及12个散养户的1 025份羊粪便样品寄生虫感染和712份环境样品寄生虫污染情况进行检查,采用麦克马斯特法计数球虫阳性样品每克粪便中的球虫卵囊数(OPG)。选择汝州规模舍饲羊场进行季节动态调查,了解不同季节规模舍饲羊场羊消化道感染及环境污染寄生虫情况。【结果】羊消化道寄生虫总感染率为82.83%(849/1 025),共检出8种(类)寄生虫,分别为球虫、阿米巴、贾第虫、隐孢子虫、绦虫、鞭虫、细颈线虫和其他线虫。优势虫种为球虫(71.90%),其次为阿米巴(49.07%),球虫与阿米巴较易发生混合感染。环境样品寄生虫总阳性率为38.48%(274/712),共检出6种(类)寄生虫,包括球虫、阿米巴、贾第虫、鞭虫、细颈线虫和其他线虫,优势虫种是线虫(22.75%)。河南规模舍饲羊场羊消化道寄生虫感染率以及环境样品寄生虫检出率均显著低于宁夏规模舍饲羊场(P<0.05)。舍...     

杉木紫色酸性磷酸酶基因ClPAP18b的克隆及表达分析

  【目的】  以速生丰产型杉木无性系洋023、洋036、洋6421和拟南芥为材料,研究杉木中紫色酸性磷酸酶 (PAPs) 的功能作用,以筛选具有磷素高效利用特性的杉木无性系。  【方法】  采用PCR技术克隆PAP18b基因,分析其序列特征和同源性,并对杉木无性系洋023、洋036、洋6421进行正常供磷 (1.0 mmol/L KH₂PO₄) 和低磷胁迫 (0.1 mmol/L KH₂PO₄,0.9 mmol/L KCl) 砂培盆栽处理0、10、15、30和60天,测定酸性磷酸酶活性及全磷含量,定量分析根和叶中ClPAP18b基因表达量、磷含量及酸性磷酸酶活性的关系,并将ClPAP18b基因过表达至拟南芥,进行该基因的功能验证。  【结果】  成功克隆获得杉木PAP18b基因CDS序列 (1 212 bp),命名为ClPAP18b,该基因编码404个氨基酸,亚细胞定位于胞间区,这表明ClPAP18b基因可能发挥调控酸性磷酸酶分泌至胞外的功能。酸性磷酸酶活性测定结果表明,30天磷处理后,正常供磷和低磷处理下,杉木洋036和洋6421无性系根中的酸性磷酸酶活性均高于叶,而根中酸性磷酸酶活性低磷处理下高于正常供磷处理;洋023的根和叶中酸性磷酸酶活性在低磷胁迫诱导下多高于正常供磷条件下根和叶中酸性磷酸酶活性。磷含量分析结果表明,杉木洋023、洋036和洋6421无性系的地上部磷含量高于地下部,不同水平供磷处理后,不同杉木无性系或同一杉木不同组织磷含量存在差异。RT-qPCR 结果显示,低磷胁迫诱导杉木ClPAP18b基因表达。低磷条件下,ClPAP18b过表达拟南芥植株长势优于对照组,且过表达植株中的酸性磷酸酶活性叶高于对照组,但花青素积累量低于对照组。此外,相比于正常供磷处理植株,过表达ClPAP18b拟南芥中PHT1; 2、PHT1; 8和AtPAP26等与磷胁迫相关的基因表达量显著高于对照组,而AtPAP12和AtPAP17基因表达量明显降低。  【结论】  低磷胁迫诱导杉木ClPAP18b基因表达和酸性磷酸酶活性增强,但不同杉木无性系对磷缺乏的适应性存在明显差异,过表达ClPAP18b基因可促进拟南芥植株耐低磷胁迫,ClPAP18b基因可能在杉木低磷胁迫调节机制中发挥调控作用,可作为改良杉木耐低磷的重要候选基因。