蜂毒溶血肽（melittin）基因的克隆及序列分析

本项研究已克隆在λｇｔ１１载体上的编码蜂毒溶血肽２６个氨基酸的基因经酶切后，亚克隆到大肠杆菌Ｅ．ｃｏｌｉ的质粒ｐＵＣ １８的ＥｃｏＲＩ和ＰｓＩ位点上，构建成重组质粒ｐＵＭ１８，然后转化感受态的大肠杆菌ＪＭ１０１之中。经对转化子中重组ｐＵＭ１８上蜂窝溶血肽基因的ＰＣＲ扩增检测和序列分析，表明克隆成功。     

蜂毒溶血肽（melittin）的cDNA克隆

本项研究从处于活跃表达蜂毒溶血肽时期的蜜蜂蜂王毒腺中提取了总ＲＮＡ，经生物素标记的多层纤维素亲和层析，分离出蜂毒溶血肽的ｍＲＮＡ，再经ｍＲＮＡ－ｃＤＮＡ反转录，合成了蜂毒溶血肽的ｃＤＮＡ，并将其克隆到了表达载体λｇｔ１１上，建立了ｃＤＮＡ文库；经对重组噬菌斑显以筛选和对蜂毒溶血太基因的ＰＣＲ检测及对产物的免疫检测，证明蜂毒溶血肽的ｃＤＮＡ克隆成功，得到十二个了性反应的克隆。