基因枪法转化籼稻有关因素的评价

 利用基因枪轰击水稻未成熟胚及未成熟胚诱导来源的愈伤组织,对国内外16个籼稻品种进行了转化。设置不同的基因枪转化参数,并在培养基中添加各种植物激素、甘露醇以及2-N-吗啉-乙基磺酸(简称MES)来改善继代过程中籼稻愈伤组织的生长状态。基因枪转化的操作参数（包括金粉浓度和DNA含量、基因枪氦气压力、轰击受体的不同状态）对转化频率有重要影响;在继代培养基中添加MES（500 mg/L）作为缓冲剂,可以减少籼稻愈伤组织褐化现象的发生;在诱导和继代培养基中补加NAA(0.5 mg/L）,KT(0.2 mg/L)可改进愈伤组织质量,进而提高再生频率;在继代培养基中补加低浓度的 ABA(1 mg/L)和甘露醇（20 g/L）,能普遍改善愈伤组织生长状况,减少褐化现象的产生,得到较多结构致密的颗粒状抗性愈伤。获得了再生的转化植株,经检测表现出对Basta的抗性。     

农杆菌介导的抑制衰老的嵌合基因转化籼稻的研究

农杆菌介导的转化法是一种天然的遗传工程,具有诸多优越性.1993年Chan等首次利用农杆菌法成功地将外源基因转入水稻.随后又有一些实验室进行了农杆菌转化水稻的研究,并获得了较高的转化频率.但大部分的实验都是采用标记基因进行的,有用基因转化的报道则较少.同时,籼稻优良品种的转化也较困难.本实验采用抑制衰老的嵌合基因进行转化,以我国生产上的优良籼稻圭630为转化受体,力求获得有应用价值的转基因植株,为生产服务.     

水稻中抑制衰老的嵌合基因的基因枪转化和表达分析

利用基因枪法把抑制衰老的嵌合基因导入水稻恢复系HP121和偏籼型品系8706,经PCR、点杂交以及Southern杂交分析, 证明外源基因已整合到水稻基因组中.通过叶片细胞分裂素含量和叶绿素含量的测定以及形态观察,表明抑制衰老的嵌合基因在部分转基因水稻中表达,叶片衰老得到延迟.转基因植株后代符合3:1遗传规律.     

籼稻及粳稻对基因枪转化反应的差异及提高转化率的研究

本研究发现籼稻与粳稻在基因枪转化上的最适条件有所不同。在用成熟胚作受体材料时,籼稻的培养基要求加ＡＢＡ,有利转化细胞的生长,而粳稻则不需要。在打枪的金粉及ＤＮＡ用量上,籼稻宜减至粳稻用量的１／４其瞬时表达的效率最高。