两种桑树病毒的形态观察与检测

桑树病毒病一直是影响蚕桑产业发展的重要因素之一, 但其病原也尚未完全确认。本研究收集全国不同桑园、不同时间和不同品种的皱缩状和花叶状桑叶样品, 分离病毒后使用透射电子显微镜观察病毒形态特征。结果在桑病叶中分离获得两种病毒, 一种为双联体形态病毒, 长(27.84±1.71)nm, 宽(17.05±1.13)nm, 形态特征与双生病毒属的病毒形态特征一致; 另一种为球状体病毒(80~100 nm), 形态特征与番茄斑萎病毒属的病毒形态特征一致; 桑叶切片观察, 发现同一桑叶材料中存在这两种病毒。通过高通量测序发现其存在桑花叶型萎缩病相关病毒Mulberry mosaic dwarf associated virus (MMDaV)和桑脉带相关病毒Mulberry vein banding associated virus (MVBaV)。设计上述病毒的特异引物, 对158份桑病叶进行PCR检测, MMDaV的检出率为93.04%; 而MVBaV为60.13%, 同时检出率为57.59%。结果表明, MMDaV和MVBaV在桑病叶中普遍存在, 且同时存在。本研究首次在桑树病叶中同时观察并检测到MMDaV和MVBaV, 二者在桑皱缩状和花叶状的桑叶中存在混合感染的现象, 研究结果将为今后深入研究桑病毒病及防控奠定了基础。     

桑花叶型萎缩病相关病毒的 SYBR Green I实时荧光定量 PCR 检测方法

【目的】建立桑花叶型萎缩病相关病毒（Mulberry Mosaic Dwarf associated Virus,MMDaV）的实 时荧光定量 PCR 检测方法。【方法】以 MMDaV 保守的外壳蛋白基因为靶基因,设计特异引物,构建外壳蛋白 基因序列的阳性质粒,建立阳性质粒的标准曲线,并对 MMDaV 特异引物的灵敏性和特异性进行检测,并使用 建立的 MMDaV 实时荧光定量 PCR 检测方法检测广东、广西、海南、重庆、陕西和江西 6 个省区的桑病叶样品。 【结果】构建的标准曲线具有良好的扩增效率（97.88%）,设计的特异引物可特异的检测到 MMDaV,最低的 质粒检测浓度为 8 copies/μL,是普通 PCR 灵敏度的 24 倍,并且 MMDaV 实时荧光定量 PCR 检测方法对 6 个 省区的桑病叶样品均有良好的检测结果,检测的 Cq 值在 9.69~26.17 之间。【结论】建立的 MMDaV 实时荧光 定量 PCR 检测方法具有高效率、特异性好和灵敏度高等特性,可被应用于寄主体内 MMDaV 的定量检测。     

黑龙江省大豆机械化生产现状与发展策略

大豆作为黑龙江省重要的粮食作物之一,对于促进农业种植业结构调整和增加农民收入具有重要意义。通过分析黑龙江省大豆机械化生产的现状,在深入研究存在问题的基础上,提出了发展大豆机械化生产的对策与建议。