4种思茅松总DNA提取方法的比较

以思茅松(Pinuskesiyavarlangbianensis)针叶为材料,分别采取了简易提取法、高盐沉淀法、CTAB沉淀法和高盐低pH法提取基因组DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳、限制性内切酶处理和RAPD3种方法对所提取的DNA样品进行检测,将它们在DNA产量、质量等方面的优缺点进行总结,并根据群体分子遗传学研究工作的实际特点确定了高盐沉淀法为最佳方法     

蓝桉组织培养的研究

用蓝桉（Ｅｕｃａｌｙｐｔｕｓｇｌｏｂｕｌｕｓ）离体芽器官诱导培养，分化形成丛生芽，年繁殖系数３￣（１２）。０．１～０．５ｍｇ／Ｌ的６－ＢＡ或０．５～０．８ｍｇ／Ｌ的ＫＴ诱导外植体（带节茎段）腋芽萌动的效果最佳，诱导率分别达８０．３％和８１．５％。１．５～２０ｍｇ／Ｌ的６～ＢＡ或２０～２．５ｍｇ／Ｌ的ＫＴ分别与０．５～１．０ｍｇ／Ｌ的ＮＡＡ组合，对于促进腋芽分化形成丛生芽及继代培养中芽的增殖具有最佳效果。培养基中的无机盐浓度、蔗糖含量对蓝桉试管苗的生根具有显著影响；ＩＢＡ促进蓝桉试管苗的生根。至目前为止，在１／２ＭＳ无机盐培养基＋ＩＢＡ１．２～１．４ｍｇ／Ｌ＋Ｓ５ｇ／Ｌ中诱导生根，生根率最高可达２６．４％。     

云南红豆杉天然群体的遗传多样性和群体分化

利用云南红豆杉Taxusyunnanensis种子的单倍体胚乳,采用水平淀粉凝胶电泳技术,对分布于金沙江流域的云南红豆杉天然群体的遗传多样性和群体分化进行了研究.对8个酶系统15个酶位点的分析结果表明该地区的云南红豆杉天然群体遗传变异水平较高,多态位点比率P=0.933,等位基因平均数A=2.90.平均期望杂合度He=0.290;4个小群体间遗传分化很小.基因分化系数GST=0.071.云南红豆杉天然群体具有明显丰富的遗传变异和较小的群体间分化,其原因是云南红豆杉寿命长、风媒异花授粉、种子传播、基因交流频繁.     

思茅松不同组织DNA的提取

以思茅松(Pinus kesiya var.langbianensis)嫩针叶、半木质化韧皮部、木质化韧皮部及成熟针叶为实验材料,采用高盐沉淀法提取思茅松的总DNA.结果表明:除成熟针叶外,其它3种组织中次生物质含量少,均为提取DNA的极好材料,DNA的得率达到21.32～29.85 μg·g-1,A260/A280值在1.6左右.清晰明亮的RAPD产物也表明所提取的DNA无论在质量还是数量上均可满足DNA分子标记的要求.因此,根据不同季节,可选择不同的植物组织来提取高质量的DNA.     

云南红豆杉天然群体的遗传多样性和群体分化

利用云南红豆杉Taxus yunnanensis种子的单倍体胚乳，采用水平淀粉凝胶电泳技术，对分布于金沙江流域的云南红豆杉天然群体的遗传多样性和群体分化进行了研究。对8个酶系统15个酶位点的分析结果表明：该地区的云南红豆杉天然群体遗传变异水平较高，多态位点比率P＝0．933，等位基因平均数A＝2．90，平均期望杂合度He=0.290；4个小群是遗传分化很小，基因分化系数GST＝0．071。云南红豆杉天然群体具有明显丰富的遗传变异和较小的群体间分化，其原因是云南红豆杉寿命长、风媒异花授粉、种子传播、基因交流频繁。     

昆明树木园云南红豆杉人工林等位酶遗传变异的研究

以昆明树木园云南红豆杉(Taxus yunnanensis)人工林为研究对象，采用垂直板式聚丙烯酰胺凝胶电泳，检查了此人工林雌配子体的苹果酸脱氢酶(MDH)、酯酶(EST)、莽草酸脱氢酶(SKD)、谷氨酸草酰乙酸转氨酶(GOT)及过氧化物酶(PER)的同工酶，分析了此群体等位酶的遗传变异。根据多态位点的标准，发现检测的基因位点的70％是多态的。每个基因位点发现的等位基因平均数是2．10。所检测的10个位点平均期望杂合度是0．291；平均实际杂合度为0．293；平均等位基因有效数是1．598。     

思茅松不同居群的染色体核型研究

对思茅松［Ｐｉｎｕｓｋｅｓｉｙａｖａｒ．ｌａｎｇｂｉａｎｅｎｓｉｓ（Ａ．Ｃｈｅｖ．）Ｇａｕｓｅｎ］４个不同居群的染色体核型进行了研究。结果表明：４个不同居群的染色体核型相似，核型公式均为Ｋ（２ｎ）＝２４＝２４ｍ，核型不对称性都属于１Ａ型，染色体次缢痕的数目和位置一致（Ｎｏ．３长臂上）；４个不同居群仅在染色体长度比、着丝点端化值等指标上存在差异。与其他非裸子植物相比，思茅松在染色体上较为保守。     

水分胁迫对黄连木、清香木幼苗的影响

人为模拟干旱条件下 ,研究了黄连木、清香木幼苗的叶片相对含水量 (RWC)、荧光和光合色素的变化情况 ,同时对胁迫后期两树种幼苗的生存率也进行了调查分析 .结果表明 :①水分胁迫前期 ,两树种幼苗叶片的相对含水量(RWC)、Fv Fm 相对值和F0 相对值变化缓慢 ,水分胁迫后期 ,两树种幼苗叶片的相对含水量、Fv Fm 相对值迅速下降 ,F0 相对值迅速上升 ,但清香木幼苗叶片相对含水量和Fv Fm、F0 相对值指标变化的速率明显慢于黄连木幼苗 .②轻中度水分胁迫对光合色素影响不明显 .严重水分胁迫时 ,黄连木的Chla ,Chl含量显著下降 ,Chla Chlb比值发生明显减小 (P =0 0 5 ) .③水分胁迫后期 ,黄连木幼苗叶片出现萎蔫和枯黄症状要早于清香木 ,萎蔫枯黄总数占实验材料总数的比例也最高 .以上结果揭示清香木幼苗比黄连木幼苗更耐水分胁迫 .     

干旱胁迫下3树种苗木叶片相对含水量、质膜相对透性和脯氨酸含量的变化

以金沙江干热河谷主要造林树种坡柳、银合欢和山毛豆的苗木为实验材料,通过盆栽苗自然干旱胁迫,同时以浇水处理为对照,探讨了干旱胁迫下3树种苗木叶片的相对含水量、质膜透性以及脯氨酸含量的变化情况。结果表明,干旱胁迫后,3树种苗木叶片的相对含水量、质膜相对透性以及脯氨酸含量都发生了变化,只是变化的幅度和进程不同。经三项生理指标的综合分析并结合3树种的自然表现,得出坡柳具有较强的抗旱能力,其次为银合欢,最后是山毛豆。     

思茅松景洪大渡岗居群的核型变异研究

以思茅松主产区的思茅居群为参照,对景洪大渡岗居群的校形态结构进行了系统研究。结果为;(1)二者的间期核构形都为复杂染色中心型,前期染色体属于中间型,核型公式均为K(2n)=24=24m,核型不对称性都属于1A型;(2)二者在次缢痕数目及其分布上有明显差异。思茅居群仅有1对染色体具有次缢痕,位于第3对染色体长臂上,景洪大渡岗居群有4对染色体具有次缢痕,分别位于第1、3、6对染色体短臂和第2对染色体长臂上。综合前期对思茅松4个不同居群染色体核型的研究,建议研究思茅松各居群的花粉母细胞减数分裂行为及从等位酶位点和DNA水平上深入研究思茅松居群的遗传结构与分化。