蚜虫共生细菌多重PCR检测体系的建立

蚜虫中具有多种共生菌,使用常规PCR对它们进行检测,耗时耗力,而多重PCR可以更加高效地进行多种细菌的检测。沃尔巴克氏菌Wolbachia pipientis、杀雄菌属共生菌Arsenophonus和蚜虫U型共生菌Regiella insecticola是蚜虫中常见的3种共生菌。本研究针对沃尔巴克氏菌、杀雄菌属共生菌和蚜虫U型共生菌,分别选择以wsp基因、yaeT基因和gltA基因作为靶标,进行了多重PCR引物的设计和扩增体系的优化。结果显示,本研究建立的多重PCR体系在检测3种蚜虫常见共生菌时,具有较高的扩增特异性、准确性和直观性及较高的检测灵敏度,共生菌的最低检测浓度为104拷贝/μL,远低于共生菌在蚜虫1龄若虫总DNA中的浓度(108拷贝/μL),可以完全满足蚜虫共生菌检测工作的需要。     

一种新的白蜡虫寄生蜂体内Wolbachia的wsp基因分子检测及序列分析

采用Wolbachia的通用引物、A大组和B大组的特异性引物对一种新的白蜡虫寄生蜂--长尾啮小蜂(Aprostocetus sp.)体内Wolbachia的wsp基因进行分子检测,所获得的基因片段分别命名为wApr、wAprB和wAprB,长度分别为620、566和463bp;基因序列分析表明:wApA、wAprB与w...     

向川安瘿蜂和寄生性长尾小蜂共生菌Wolbachia的检测

Wolbachia是一类胞质遗传共生菌，能调控被其感染宿主的生殖方式。以向川安瘿蜂虫瘿中获得的向川安瘿蜂和其寄生的长尾小蜂为材料，使用Wolbachia的wsp基因特异引物，通过PCR扩增向川安瘿蜂和长尾小蜂Wolbachia的wsp特异片段，以邻位相连法构建Wolbachia的wsp基因的分子系统树。结果表明：向川安瘿蜂和长尾小蜂均感染了Wolbachia；因二者感染Wolbacia的株系Wa和Wb的wsp序列差异大，不能认定在寄生的长尾小蜂和宿主向川安瘿蜂间存在Wolbachia的水平传播。     

人和动物丝虫共生菌——沃尔巴克氏体研究进展

沃尔巴克氏体(Wolbachia,Wb)是在丝虫体内发现的一类共生菌,它诱导的免疫病理引起的炎症反应是丝虫感染后致病的主要原因之一。论文论述了丝虫沃尔巴克氏体的分类、结构与分布、生殖及传播方式、基因组和沃尔巴克氏体与丝虫之间的相互作用关系,重点阐述了沃尔巴克氏体与丝虫致病性和清除沃尔巴克氏体药物在人和动物丝虫病治疗中的作用,为人和动物丝虫病的防治研究提供参考。     

灰飞虱体内沃尔巴克氏体生物学特性及其利用展望

灰飞虱既是传播水稻条纹叶枯病毒的媒介昆虫,也是我国水稻上的主要害虫。Wolbachia是存在于飞虱等多种昆虫体内的一类共生菌,它们能通过多种机制调节寄主的生殖,包括诱导细胞质不亲和、孤雌生殖和遗传上的雄性雌性化等。目前对这类微生物的研究已取得了重要进展。本文综述了Wolbachia在灰飞虱体内的分布、传播方式及其对灰飞虱种群的影响,并初步探讨了利用其生物防治的可能性。     

桑天牛卵啮小蜂孤雌生殖及体内沃尔巴克氏体(Wolbachia)的检测

桑天牛卵啮小蜂(Aprostocetus prolixus)有孤雌生殖现象,其后代几乎为雄性。沃尔巴克氏体(Wolbachia)是广泛分布于节肢动物体内的一类共生菌,参与多种调控寄主的生殖活动机制。通过对外膜蛋白基因(wsp)、细菌细胞分裂蛋白基因(ftsZ)和核糖体16S rDNA基因的特异性扩增,在米蛾(Corcyra cephalonica Stainton)的DNA中分别扩增出约600、1000和900 bp的片断,验证了米蛾体内已感染了Wolbachia;而在桑天牛卵啮小蜂的DNA中未扩增出任何片断,表明Wolbachia在桑天牛卵啮小蜂体内未被感染或感染率极低。     

Maternal age influence on diapause induction in sexual and asexual Trichogramma brassicae

In this study, the effect of maternal age on prepupae diapause of progeny in sexual (Wolbachia free) and asexual (Wolbachia infected) Trichogramma brassicae was studied at two temperatures. Maternal generation (G₁) of both populations was reared at 10L:14D photoperiod, 14 and 20 °C, separately. Mated females from G₁ were supplied with eggs of Ephestia kuehniella, each 48 h from one day after emergence to death. The tendency to diapause in progeny (G₂) was determined by rearing at 10 °C. According to the results, reproductive modes, maternal temperature and age have significant effect on the mean number of eggs laid by G₁ and the diapause percentage of G₂. Offspring whose maternal generation was reared at 20 °C had higher diapause percentage than those reared at 14 °C. Diapause percentage in sexual population was higher than the asexual, which demonstrates a negative effect of Wolbachia on this process. Wolbachia infection modifies the effect of maternal age on the diapause percentage in the offspring at 20 °C but not at 14 °C. The result can be due to lower Wolbachia density at 14 °C and greater Wolbachia density at 20 °C.     

昆虫共生菌沃尔巴克氏体(Wolbachia)的wsp基因密码子使用模式分析

沃尔巴克氏体(Wolbachia)主要感染昆虫等节肢动物,是一类革兰阴性共生细菌。为探讨昆虫纲共生菌Wolbachia的系统发育,研究Wolbachia基因组中进化速度较快的外膜蛋白基因wsp的密码子使用模式及影响因素,统计分析该基因的GC含量(GCall、GC1、GC2、GC3、GC3s)、有效密码子数(ENc)、相对同义密码子使用度(RSCU)等指标。结果显示:昆虫纲共生菌Wolbachia的wsp基因密码子偏好性均不强,昆虫纲不同目间共生菌Wolbachia的wsp基因碱基组成及ENc值差异较小;多数基因数据点沿标准曲线或在其附近分布,突变对碱基组成的影响较弱;18种由多个密码子编码的氨基酸中有11种氨基酸的偏好性密码子在昆虫纲7个目及对照蛛形纲1个目间均相同,有2种氨基酸的偏好性密码子在7个目间相同,这些密码子均以A/U结尾;供分析的140个wsp基因中仅编码6个半胱氨酸(Cys);对应分析中第1、第2向量轴贡献率均不高,分别为13.53%和12.49%,均与碱基组成(GC1、GC2、GC3)显著相关。综合各项分析认为,Wolbachia的wsp基因密码子偏好性不具有宿主分类特异性,密码子使用模式主要受碱基组成影响,而碱基组成主要受选择影响。     

Wolbachia对山楂叶螨实验种群生长发育和繁殖的影响

Wolbachia是一种共生菌,可在多种叶螨寄主中引起细胞质不亲和及适合度改变,影响寄主的生物学特性。为了明确感染Wolbachia对山楂叶螨种群生长发育和繁殖的影响,本试验采用生命表法系统观察了山楂叶螨感染种群和未感染种群的生物学,分析感染Wolbachia对其生殖参数的影响。结果显示:感染种群产卵前期比未感染种群延长了约0.69d,产卵量降低了16.84%,而对其性比没有显著影响。感染种群在25℃从卵发育到成螨平均需要(14.21±0.11)d,比未感染种群(13.25±0.08)d延长了将近1d。感染种群数量增长1倍,需要的时间为5.7346d,未感染种群仅需要5.1322d;感染种群平均每经过1d增长为原数量的1.1285倍,未感染种群则为原数量的1.1446倍。表明感染Wolbachia的山楂叶螨种群生殖力下降,各虫态的发育历期延长,种群发展速率下降。     

螺旋粉虱体内共生菌的研究

采用变性梯度凝胶电泳技术[denaturing gradient gel electrophoresis（DGGE）]、16S rDNA文库构建技术,以及使用Wolbachia菌特异引物研究在不同寄主上取食繁殖的螺旋粉虱自然种群体内共生菌。结果显示,在不同寄主植物取食的新入侵螺旋粉虱体内共生菌均稳定存在有初级共生菌（Candidatus Portiera aleyrodidarum）,属于变形菌门（Proteobacteria）,γ-变形菌纲,共生菌多样性较少;研究同时发现取食不同寄主植物的螺旋粉虱个体间共生菌群落多样性有一定差异,一些螺旋粉虱个体内还生存有葡萄球菌（Staphylococcus sp.）;此外,研究还发现新入侵的螺旋粉虱体内尚未检测到Wolbachia菌。表明取食不同寄主的螺旋粉虱体内均稳定存在有共生菌,同时取食不同的寄主其共生菌群落也会发生变化;Wolbachia菌尚未在新入侵海南的螺旋粉虱中建立共生关系。