莲不同药用部位的体外抑菌作用初探

为比较莲(Nelumbo nucifera Gaertn.)不同药用部位(莲子心、莲房、荷叶)对金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、肺炎克雷伯菌的抑菌作用效果,通过试管二倍稀释法测定各成分金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、肺炎克雷伯菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);绘制光密度-时间曲线,检测药物对细菌生长期的影响,分析莲不同药用部位的抑菌作用效果。结果显示,莲子心提取物、莲房提取物、荷叶提取物对副溶血弧菌的最小抑菌浓度分别为15.625、62.5、500mg/mL;莲房提取物、荷叶提取物对金黄色葡萄球菌的MIC分别为15.625、62.5mg/mL;荷叶提取物对肺炎克雷伯菌的MIC为125mg/mL。莲子心提取物对副溶血弧菌的MBC为其MIC的4倍,莲房和荷叶提取物对3种供试菌的MBC基本上为其MIC的4～8倍。当浓度为1 MIC时,莲子心莲不同药用部位基本上能完全抑制金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、肺炎克雷伯菌的生长。结果表明,莲不同药用部位(莲子心、莲房、荷叶)对金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、肺炎克雷伯菌有一定的抑菌作用,但作用效果不同。     

HPLC结合响应面法优化柳叶蜡梅总黄酮提取工艺及其抑菌活性研究

采用高效液相色谱法测定柳叶蜡梅中黄酮类成分芦丁、槲皮素、山奈酚的含量,在单因素考察基础上,采用响应面法研究乙醇浓度、提取时间、提取温度对柳叶蜡梅黄酮类成分得率的影响,并采用滤纸片法对优化提取的柳叶蜡梅黄酮成分进行抑菌效果研究。结果表明,影响黄酮含量的因素为乙醇浓度>提取时间>提取温度;最佳提取工艺为提取温度90 ℃,料液比1:15,乙醇浓度79.0%,提取时间1.7 h;柳叶蜡梅中黄酮类成分为芦丁0.861 mg·g^-1,槲皮素0.504 mg·g^-1,山奈酚0.492 mg·g^-1,总提取量为1.857 mg·g^-1,与预测值的偏差为1.50%。优化提取的总黄酮对多种病原菌有抑制作用,对蜡样芽孢杆菌和大肠埃希菌有较强的抑制作用,抑菌圈直径分别为13.21、11.18 mm。可见,响应面优化柳叶蜡梅总黄酮提取工艺方法可行,提取的总黄酮具较好的抑菌效果,具有良好的开发前景。     

中草药对大菱鲆源哈维氏弧菌的体外抑菌效果

为了解中草药对大菱鲆源哈维氏弧菌的体外抑菌效果,采用琼脂扩散法和二倍稀释法测定了哈维氏弧菌菌株对18种中草药的敏感性。结果显示:五倍子、石榴皮、大黄、乌梅和苏木的抑菌作用最强,最小抑菌浓度(MIC)12.5 mg/m L;黄连、马齿苋、鱼腥草、穿心莲、公丁香和桉树叶的抑菌作用次之,MIC为12.5~25mg/m L;沙棘、黄柏、辣蓼、甘草和薄荷抑菌效果较好,最小抑菌浓度(MIC)为100~500 mg/m L;而陈皮、石菖蒲的抑菌作用不明显,MIC均大于500 mg/m L。结果表明,18种中草药中五倍子、石榴皮、大黄、乌梅和苏木对大菱鲆源哈维氏弧菌有较好的抑菌效果,可为防治大菱鲆哈维氏弧菌病中草药制剂的开发提供参考。     

羌活地上部位化学成分及其对农业病原真菌的作用

利用气相色谱-质谱联用及液相色谱仪,对羌活地上部位的乙醇浸提物进行分析,明确其挥发性及部位特征非挥发性成分和含量,考察提取物对3种重要农业病原真菌的抑制作用。结果表明,羌活地上部位挥发性成分复杂,与标准谱比对,得到匹配度90%以上化合物40种,主要包括长链脂肪酸类、化学结构带环或桥的烯、酮、醇类化合物以及甾醇类化合物。其中,石竹烯、异龙脑、柠檬烯等化合物具备芳香气味和杀菌活性;非挥发性成分包含东莨菪内酯、补骨酯素、羌活醇等香豆素类成分,其中羌活醇质量分数可达1.24mg/g。抑菌试验表明,提取物对尖孢镰刀菌、番茄早疫病病原菌和灰葡萄孢菌3种真菌均表现出明显抑制作用,并得到其毒力回归方程,对尖孢镰刀菌、番茄早疫病病原菌、灰葡萄孢菌的EC_(50)值分别为4.97、7.29、14.14mg/mL。     

苍耳子不同萃取相的抗菌及杀蚜活性

旨在研究苍耳子不同萃取相的体外抑菌活性和杀虫活性,并采用倍半稀释法测定苍耳子不同萃取相对9种常见菌的抑制作用,采用浸虫浸叶法测定不同萃取相对绣线菊蚜的毒杀作用。结果显示,乙酸乙酯萃取相的抑菌效果明显,最小抑菌浓度(MIC)均为3.91 mg/mL,对鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌的最小杀菌浓度(MBC)为31.25 mg/mL;石油醚、乙酸乙酯萃取相对绣线菊蚜有较好的毒杀作用,其24 h时的LC_(50)分别为2.368、2.524 mg/mL,48 h时的LC_(50)分别为1.743、1.774 mg/mL。由结果可知,苍耳子的有效抑菌杀虫活性集中在中低极性段。     

内生拮抗细菌X1-6-1的鉴定、发酵条件优化及抑菌作用研究

【目的】对拮抗内生细菌进行鉴定,研究抑菌作用,探讨发酵条件并进行优化,为植物病害的生物防治提供微生物资源.【方法】根据形态、生理生化特性、16S rDNA序列分析对从葡萄健康叶片中分离的内生细菌X1-6-1进行鉴定;采用平板对峙法测定其对8种植物病原真菌的抑菌能力;以菌体生物量为指标,通过单因素试验及正交设计优化该菌株的发酵条件.【结果】初步鉴定X1-6-1为Bacillus velezensis.抑菌试验表明B.velezensis X1-6-1具有较强的抑菌活性(抑菌率为(49.1±0.9)%～(67.3±0.7)%),较广的抗菌谱(对8种病原菌均有抑制作用).该菌株最适培养基为:可溶性淀粉10.0 g/L,牛肉膏10.0g/L,MgCl_(2 ) 5.0 g/L;最佳培养条件为:培养时间72 h,温度25℃,初始pH值7.0,转速210 r/min,最佳装液量110 mL.【结论】葡萄内生细菌鉴定为贝莱斯芽孢杆菌,对油菜菌核病菌、葡萄灰霉病菌和葡萄炭疽病菌都有显著拮抗作用,为开发生防制剂的候选菌株提供了依据.     

大黄素对嗜水气单胞菌的抑菌作用及其机制

为了探究大黄素对嗜水气单胞菌的体外抑菌作用及其机制,本试验采用二倍稀释法检测大黄素最低抑菌浓度(MIC)及其对试验菌生长曲线的影响;检测培养液中碱性磷酸酶(AKP)活性,以分析大黄素对试验菌细胞壁通透性的影响;检测β-D-半乳糖苷酶活性和DNA含量,以探究大黄素对试验菌细胞膜通透性的影响;采用结晶紫染色法检测大黄素对试验菌生物膜形成的影响;检测大黄素对外毒素溶血活性和内毒素分泌量的影响及其对感染鲫鱼的保护作用。结果显示,大黄素MIC为32μg/mL,可明显抑制嗜水气单胞菌生长。与二甲亚砜(DMSO)对照相比,大黄素浓度≥32μg/mL时,培养液中AKP活性、β-D-半乳糖苷酶活性和DNA含量均显著升高(P<0.05);大黄素浓度为4～16μg/mL时,生物膜形成量显著降低(P<0.05);大黄素浓度为32～128μg/mL时,培养液中外毒素的溶血百分比为(36.97±3.60)%～(75.15±7.29)%(P<0.05),内毒素的分泌量无显著变化(P>0.05)。鲫鱼注射大黄素[≥64 mg/(kg·bw)]后感染嗜水气单胞菌(2×10⁶...     

米尔伊丽莎白拮抗菌的分离及抑菌作用研究

试验旨在丰富米尔伊丽莎白菌（Elizabethkingia miricola,EMI）的防治方法,筛选对伊丽莎白菌具有拮抗作用的菌株。采用稀释涂布法对蚓粪中的EMI拮抗菌进行分离,通过形态学观察、生理生化特征分析、16S rRNA基因序列分析确定了分离菌株LM-7的分类地位;研究拮抗菌株LM-7对EMI的最佳抑菌条件及其抑菌活性物质。结果显示,LM-7为抗生链霉菌（Streptomyces antibioticus）,在PDA培养基上对EMI的抑菌效果最佳,圈径比为11.13。LM-7胞内含有聚酮合酶基因PKS-Ⅰ、PKS-Ⅱ和非核糖体多肽合成酶基因（NRPS）,抑菌活性成分与非核糖体多肽和聚酮类次级代谢产物有关,其抑菌活性物质主要存在于细胞的胞外分泌物中。研究表明,LM-7菌株可作为防治EMI的备选菌株,其发酵液具有开发为新颖结构活性化合物的潜力。     

毒蘑菇菌株及毒素粗提液对樟子松枯梢病菌生长的影响

厚环鹅膏、鹅膏菌、珊瑚菌、白霜杯伞、冠状柄环菇、细鳞环柄菇、鳞柄白鹅膏、绒白乳菇、毒蝇鹅膏9个毒蘑菇菌株及毒素粗提液对樟子松枯梢病原菌菌丝生长影响的研究结果表明:除厚环鹅膏和鹅膏菌外,其他7个菌株对病原菌生长均有一定的抑制作用;鳞柄白鹅膏和细鳞环柄菇相对抑制效果最好,分别为10.80和10.40。除毒蝇鹅膏外,其他8个菌株的毒素粗提液对病原菌菌丝生长均有一定的抑制作用,珊瑚菌和绒白乳菇毒素粗提液的抑菌效果最好,抑菌率分别达到63.89%和58.89%。     

枯草芽孢杆菌XF-1中脱乙酰几丁质酶在大肠杆菌中的表达及其抑茵活性

根据脱乙酰几丁质酶同源基因序列设计引物,扩增、克隆和测序了枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis菌株XF-1的脱乙酰几丁质酶基因（CSrlo该基因编码区为834bp,编码由277个氨基酸组成的约30kD的蛋白质,其基因序列与枯草芽孢杆菌菌株B168的脱乙酰几丁质酶基因的相似性达到99％,氨基酸序列相似性为98％,在第19、47、60、256和257位的氨基酸发生了变化,分别由异亮氨酸代替了菌株B168脱乙酰几丁质酶中的甲硫氨酸、缬氨酸代替了谷氨酸、苏氨酸代替了异亮氨酸、天冬氨酸代替了谷氨酸、赖氨酸代替了天冬酰胺。菌株xF一1对稻瘟病菌Magnaportheoryzae和芸薹根肿菌Plasmodiophorabrassicae有抑制作用,而菌株B168没有。菌株xF－1和B168的CSFI基因在大肠杆菌Escherichiacoli中的表达产物均具有脱乙酰几丁质酶活性,但前者的表达产物对稻瘟病菌及芸薹根肿菌具有抑制作用,而后者没有。表明脱乙酰几丁质酶是xF－1抑制根肿病作用机制之一,且上述5个氨基酸替代可能与抑菌机制有关。