电磁场对鲫血清4种生化指标的影响研究

为研究电磁场对鱼类生理的影响,试验中将体质量为(103±2)g的40尾鲫Carassius auratus幼鱼分组放置在相同水温(10℃±1℃)、不同电磁场强度(0、0.5、1.0、1.5、2.0 mT的恒定磁场)下培养,并对每组鱼血清中的碱性磷酸酶(AKP)、乙酰胆碱酯酶(AChE)、溶菌酶(LZM)活性和蛋白含量进行测定,试验周期为10 d,电磁场环境由亥姆霍兹线圈产生。结果表明:从试验第2天开始,电磁场试验组AKP活性明显低于对照组(P0.05);电磁场试验组AChE活性在2~10 d内逐渐减弱,并最终下降至初始活性的85.98%~95.47%;试验结束时,电磁场试验组LZM活性显著低于对照组(P0.05),蛋白含量较初始水平降低了24.61%。研究表明,电磁场对鲫血清4种生化指标的影响基本为抑制作用,说明多数外界环境的变化对鱼体本身会造成不利影响。     

α6/α3β4乙酰胆碱受体在非洲爪蟾卵母细胞中的表达

α6/α3β4烟碱型乙酰胆碱受体（α6β4* nAChRs，*代表其他亚基）主要分布于大脑海马区、外周神经节和人源肾上腺嗜铬细胞等，与神经性疼痛和炎症反应、情绪等生理疾病密切相关。本研究拟对大鼠α6/α3β4 nAChR在非洲爪蟾（Xenopus laevis）卵母细胞膜上进行重组表达，并利用双电极电压钳电生理学技术检测该重组受体的功能。在不同浓度的激动剂乙酰胆碱的刺激下，比较了α6/α3和β4亚基的不同配比形成的受体通道开放而产生的电流大小，并用其拮抗剂α?芋螺毒素TxID验证了该受体的敏感性。结果表明，亚基不同配比的α6/α3β4 nAChR均可在非洲爪蟾卵母细胞膜上成功表达，并具有较好的配体门控敏感性。     

薰衣草提取物对乙酰胆碱酯酶的抑制作用

为从薰衣草提取物中寻找潜在的治疗阿尔茨海默病的乙酰胆碱酯酶抑制剂。采用经乙醇提取,聚酰胺柱、HP20树脂柱及制备液相分离纯化后,得到30个薰衣草提取物,测定其多酚含量,并以石杉碱甲为阳性对照,采用酶标仪测定405nm处吸光度值以筛选其乙酰胆碱酯酶抑制活性并计算抑制率,分析二者相关性。结果表明:薰衣草提取物对乙酰胆碱酯酶表现出了不同的抑制作用(抑制率3.00%～82.78%),其中7个提取物作用较为显著,抑制率均大于50%;有4个提取物表现出了微弱的抑制作用(抑制率小于10%);另外,近一半的薰衣草提取物多酚含量大于20μg·mL-1。薰衣草提取物具有乙酰胆碱酯酶抑制活性,表明其含有抑制乙酰胆碱酯酶的成分,经过相关性分析,多酚可能不是起主要作用的活性物质,为进一步跟踪分离活性成分奠定基础。     

嗜热子囊菌JCM12803来源的阿魏酸酯酶FAE-2515酶学性质研究

阿魏酸酯酶广泛应用于食品、药品、饲料及造纸等行业,挖掘适用于工业化的阿魏酸酯酶至关重要。从嗜热真菌Thermoascus crustaceus JCM12803中克隆得到一个阿魏酸酯酶基因FAE-2515,经基因序列分析,FAE-2515 c DNA全长为1 581 bp,编码526个氨基酸和1个终止子,理论分子量大小为57 k Da,等电点为5.08。将FAE-2515成功地在毕赤酵母中实现高效异源表达,通过对重组蛋白进行酶活测定,比活为(53.653±3.451)U/mg,Kcat/Km值为1.423,最适pH为6.0,最适温度为55℃,60℃处理1 h之后还能保持60%的酶活,热稳定性较已报道的同类酶更为稳定。以阿魏酸甲酯为底物时酶活表现为最高,以硝基苯棕榈酸酯为底物时几乎没有酶活。金属离子K~+、Ca~(2+)、Na~+对该酶有显著的促进作用,Fe~(3+)、Zn~(2+)对该酶有轻微抑制作用,Mn~(2+)、Cu~(2+)对该酶有显著的抑制作用。综上,该酶在造纸工业和动物饲料制备工业中具有一定优势。     

块茎类植物酯酶对有机磷农药残留的检测

采用酶抑制法,选用五种块茎土豆、红薯、茨菇、芋头、莲藕提取植物酯酶,测定了总酯酶活力和比活力大小,结果显示土豆、茨菇、莲藕的酯酶活力分别高达8.462 3、8.743 7、7.491 0,显著高于其他几种。探索其检测有机磷农药的最佳条件,对5种有机磷农药进行了敏感性试验,并测定3种植物酯酶对这5种有机磷农药的最低检测限(LOD)。3种植物酯酶对受试的5种有机磷农药均有良好的敏感性,且最低检测限远低于国家规定的最大残留限量(MRL)。因此,这几种酶可作为有机磷农药残留检测用酶。     

增效剂对马尾松毛虫羧酸酯酶的抑制作用

对江西省十余个县（市）马尾松毛虫（ＤｅｎｄｒｏｌｉｍｕｓｐｕｎｃｔａｔｕｓＷａｌｋｅｒ）的测定表明，马尾松毛虫各种群对拟除虫菊酯的耐药力与羧酸酯酶活性有关；对溴氰菊酯、氰戊菊酯和氯氰菊酯耐药力强的种群，其羧酸酯酶活性亦强；应用五种增效剂对马尾松毛虫羧酸酯酶进行处理，ＳＶ＿１和ＴＰＰ表现出明显的抑制作用，且随ＳＶ＿１和ＴＰＰ剂量的增加，羧酸酯酶活性逐步降低；用相同剂量的ＳＶ＿１和ＴＰＰ处理马尾松毛虫后，羧酸酯酶均随时间表现出相似的变化规律。     

白灵菇品种选育研究

以"白灵0号"、"白灵1号"、"白灵2号"3种白灵菇孢子为试材,采用杂交育种及紫外诱变育种技术,在致死率75%条件下进行紫外线诱变处理;以其为亲本,采用单孢杂交(两点法)进行单核菌丝体交配后,观测菌丝的"锁状联合"、拮抗试验(三点法)和酯酶同工酶谱鉴定杂交子。通过杂交子与亲本的菌丝体生长速度、色泽及菌丝体密度对比,筛选出优势菌株26株,选育白灵菇新品种。结果表明:经过诱变处理的白灵菇孢子具有较高杂交亲和性,且杂交子呈现正向变异率高的特点。     

白灵菇杂交子的筛选及鉴定

以白灵菇2个品种"中农1号"和"中农翅鲍"为亲本,采用镜检、拮抗、酯酶同工酶及原基诱导等方法,研究了150对杂交组合菌株特性。结果表明:150对杂交组合菌株中,99个菌株生长较快,有锁状联合,75个与2个亲本有明显拮抗线,且具与2个亲本菌株的典型酯酶同工酶条带,确定是杂交菌株,其中50个杂交子具有出菇能力。     

酯酶在根结线虫分类上应用的研究

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对采自我国14个省市的5种根结线虫(Meloid-ogyne spp.),共47个样本作了正向极酯酶的分析;并研究了一些可能影响测定的因素。结果表明,根结线虫种间的酯酶谱存在明显而稳定的特异性,在种内也是稳定的。对接种寄主、样本来源、生理小种、室内培养与田间自然寄生、营养等不同条件下的对比分析表明,它们均不影响种的特征性酶谱。因此将酯酶作为根结线虫分类的辅助手段是有意义的。但线虫的发育阶段不同,酯酶谱有差异。采用产卵期的雌成虫进行分析则简便、可靠。     

桑天牛羧酸酯酶和谷胱甘肽S—转移酶与杨树次生代谢物质相关性研究

对取食8种杨树的桑天牛幼虫羧酯酯酶和谷胱甘肽S－转移酶活力进行了测定，证实取食不同杨树的桑天牛幼虫羧酸酯酶和谷胱甘肽S－转移酶活力存在显著差异。采用高效液相色谱法对8种杨树的14种次生代谢物质含量进行了测定，经聚类分析将8种杨树分为2类：加拿大杨、I－214杨、北京杨、J－2杨、J－1杨、山海关杨为一类，毛白杨、新疆杨为另一类。对羧酸酯酶和谷胱甘肽S－转移酶活力与杨树次生代谢物质进行了逐步回归分析，逐步回归方程表明，杨树丁香酸、绿原酸含量高，苯酚、对羟基苯甲酸含量降低，则羧酸酯酶活力会较高；杨树苯酚含量增高，阿魏酸含量降低，则谷胱甘肽S－转移酶活力会较高。