砂生槐根瘤内抗小麦纹枯病生防菌株的筛选及其鉴定

为了筛选对小麦纹枯病菌具有生防作用的菌株,从西藏米林县采集的砂生槐根瘤中分离到45株内生细菌,采用平板对峙法、菌丝生长速率法进行拮抗菌株筛选,用显微观察法研究受抑制病原菌菌丝变化;通过摇瓶培养法测定所筛选拮抗菌株的溶磷、固氮及分泌IAA功能,并对其进行盆栽接种防效试验;依据形态观察、生理生化反应及16S rDNA序列同源性分析确定所筛选菌株系统发育地位。结果表明,经过初筛和复筛,45株内生菌中,菌株R4对小麦纹枯病菌的拮抗效果较明显,对其抑菌圈直径达20.5 mm,抑菌率达98.2%,显著推迟菌核的萌发。受R4作用的小麦纹枯病菌菌丝末端分枝增多、部分原生质浓缩、形成瘤状结。菌株R4抗菌谱广,具有溶磷、固氮和分泌IAA活性。盆栽防效试验中,经菌株R4发酵液处理后,小麦纹枯病发病率和病情指数均显著降低,防治效果最高达73.82%。通过形态、生理生化特性及16S rDNA基因序列同源性比对分析,该菌株被鉴定为土地类芽孢杆菌Paenibacillus terrae。     

砂生槐根瘤内生细菌多样性及其促生潜力研究

以珍稀植物砂生槐为材料,对该植物根瘤内生细菌种群组成及其促生潜力进行研究,为砂生槐在荒漠化地区生态恢复与重建中的应用提供理论依据。采用YMA培养基通过平板涂布分离法分离内生细菌,通过16S rDNA序列同源性分析其遗传多样性,采用溶磷圈和钼锑抗比色法测定溶磷能力,Salkowski比色法测定IAA分泌量,微量凯氏定氮法测定固氮量。结果表明,从砂生槐根瘤中分离到19株代表性内生细菌,分别属于芽孢杆菌属(Bacillus)、解糖假苍白杆菌(Pseudochrobactrum)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus)、沙雷氏菌属(Serratia)和普罗威登斯菌属(Providencia)等5个属,其中芽孢杆菌属为优势菌属。在19株供试细菌中,7株具有良好的溶解无机磷能力,溶磷量达到100 mg/L以上;6株菌株具有良好的溶解有机磷能力,溶磷量达到42 mg/L以上;5株菌株具有良好的固氮能力,固定氮量达44 mg/L以上;3株菌株具有良好的IAA分泌能力,IAA分泌量达45μg/mL以上。利用种子发芽指标测定高溶磷菌株的促生能力,其中菌株R24能明显提高砂生槐种子的萌发率。综上,西藏砂生槐根瘤内生细菌遗传多样性丰富,且具有良好促生能力,是重要的生物资源。     

青稞根际优良联合固氮菌的筛选及鉴定

为筛选获得对青稞具有促生性能的联合固氮菌，从西藏不同地区青稞根际采集土壤样品，以Ashby无氮培养基进行菌株分离，利用凯氏定氮法测定分离物的固氮量，通过培养皿纸上萌发法测定其对青稞种子萌发和幼苗生长的影响，根据菌株形态、理化特性和16SrDNA序列分析进行固氮菌株的鉴定。结果表明：从西藏高寒地区青稞根际分离获得的72株联合固氮菌，和CK相比，氮增量为0.30～26.07 mg·L^-1，其中有10个菌株的固氮量较高，氮增量为17.01～26.07 mg·L^-1。种子萌发和幼苗生长试验表明：10株菌中6株菌的综合促生效果较好，即菌株20-2、22-5、23-3、26-1、35-2和39-5。和CK相比，种子萌发率提高了-7.14%~25.00%，茎粗提高了1.53%~13.74%，株高提高了-9.52%~7.60%，根长提高了9.41%~38.09%，须根数提高了-11.26%~12.57%，鲜重提高了-4.97%~57.73%。经过多相分类鉴定，这6株菌分属于根瘤菌属、类芽孢杆菌属、无色杆菌属和假单胞菌属。