星豹蛛细胞色素CYP3001U15基因克隆与生物信息学分析

星豹蛛是农业害虫的重要捕食性天敌。通过转录组测序鉴定出66条星豹蛛细胞色素P450基因,进一步筛选分析出5条基因,预测其与外源物质代谢有关。为进一步研究星豹蛛细胞色素P450功能和代谢机制,选取其中一条基因进行生物信息学研究。试验通过RT-PCR扩增技术,将星豹蛛总RNA反转录cDNA,后以此为模板进行PCR扩增,回收纯化产物完成单克隆并测序,获取该基因序列信息,并对其进行生物信息学分析。结果发现,克隆到CYP3001U15基因ORF序列,该基因开放阅读框为1 074 bp,编码357个氨基酸,分子质量为42 ku,等电点为5.91,原子总数为5 808,分子式为C_(1877)H_(2896)N_(494)O_(531)S_(10);正电荷残基47个,占氨基酸总数的13.2%,负电荷残基52个,占氨基酸总数的14.6%;蛋白的二级结构预测结果显示,α螺旋占47.62%,β折叠占8.96%,β转角占4.76%,无规则卷曲占38.66%;亚细胞定位预测结果显示,其定位在细胞内质网上;蛋白信号肽预测结果显示,该蛋白不存在信号肽;跨膜结构预测分析结果显示,其不存在跨膜结构。研究结果可就星豹蛛细胞色素P450基因对杀虫剂等外源物代谢的研究提供理论基础。     

基于主成分分析的梨园节肢动物群落动态研究

采用定时定点的系统调查和大面积随机普查相结合的调查方法和主成分分析方法研究了梨园节肢动物群落动态,可为制定梨园优势种有害生物的生态防治策略提供理论依据。结果表明,2019年4—10月,共采集梨园节肢动物2纲14目120科281种,其中,害虫150种(43.71%)天敌81种(32.70%)中性昆虫50种(23.59%);优势害虫有蛀果类的黑腹果蝇、梨小食心虫、桃蛀果蛾以及潜叶类的金纹细蛾和卷叶类的黄斑卷叶蛾,优势天敌有捕食性的中华大草蛉、龟纹瓢虫、异色瓢虫及食蚜蝇和寄生性的丽蚜小蜂,优势中性昆虫有日本弓背蚁、家蝇、元厕蝇。主成分分析将梨园节肢动物群落时间动态划分为3个阶段:4—6月为梨园节肢动物群落发生的始盛期,7—9月为梨园节肢动物群落的盛发期,9月底至10月为群落的衰退期。     

星豹蛛PaCYP3001U16基因的克隆与表达分析

为探究细胞色素P450基因在星豹蛛Pardosa astrigera体内的表达特性及对溴氰菊酯胁迫的响应,采用反转录PCR技术克隆其细胞色素P450基因并进行序列分析,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)技术分析其在星豹蛛各发育阶段及雌雄成蛛不同部位的表达水平,同时分析其在溴氰菊酯不同浓度胁迫下和不同处理时间后的表达模式。结果显示,在星豹蛛雌成蛛中克隆得到1个细胞色素P450基因,其开放阅读框为1 473 bp,编码490个氨基酸,命名为PaCYP3001U16(GenBank登录号为MZ643213)。PaCYP3001U16基因在星豹蛛各发育阶段均有表达,其中在成蛛期的表达量最高,在6龄幼蛛期的表达量最低;该基因在雌雄成蛛腹部的表达量显著高于在头胸部及足部的表达量。星豹蛛雄成蛛经LC10(5.151 mg/L)、LC30(8.619 mg/L)和LC50(12.311 mg/L)溴氰菊酯处理12 h,PaCYP3001U16基因的表达量均被抑制,且在LC50处理下表达量最低。PaCYP3001U16基因经LC30溴氰菊酯处理...     

基于年龄-龄期两性生命表的星豹蛛种群生长发育和繁殖动态分析

为明确温度对星豹蛛Pardosa astrigera生长发育和繁殖的影响，在室内测定17、21、25、29和33℃温度下星豹蛛各发育阶段的发育历期和繁殖力，并构建其年龄-龄期两性生命表，利用构建的生命表分析不同温度下星豹蛛的存活率、繁殖力、寿命期望、繁殖值和种群参数。结果表明，当温度为17~33℃时，随着温度升高星豹蛛成蛛前发育历期呈先缩短后延长的趋势，当温度为25℃时，星豹蛛雌、雄成蛛前发育历期最短，分别为47.8 d和50.5 d；当温度为17、21、25、29和33℃时，星豹蛛雌成蛛第1次繁殖分别于第108天、第63天、第57天、第46天和第60天开始；在17~33℃范围内，随着温度升高，星豹蛛种群特定年龄净繁殖力先升高后降低，29℃时达到最高；在17~33℃范围内，星豹蛛的内禀增长率、周限增长率和净生殖率随温度升高呈先增加后降低的趋势，25℃时达到最大值，分别为0.04 d^-1、1.04 d^-1和9.95；在25~33℃范围内，随温度升高平均世代周期则呈先降低后增加的趋势，在25℃时出现最小值，为54.8 d。表明25℃和29℃分别是星豹蛛种群增长和繁殖的最适宜温度。