木霉D5菌株的鉴定及其杀线活性测定

通过形态学和分子生物学方法鉴定了1株杀线木霉D5菌株的种类,并评价了其孢子悬浮液和发酵液对禾谷孢囊线虫Heterodera avenae 2龄幼虫的毒杀活性。结果表明,木霉D5菌株为绿色木霉Trichoderma viride(ITS序列登录号：OL661629;TEF序列登录号：ON241311)。浓度为1.0×10⁷ cfu/mL的D5菌株孢子悬浮液和发酵液原液处理2龄幼虫72 h后,线虫死亡率分别为85.20%和86.57%。在温度为20～80℃范围内以及pH为2～10时,发酵液均具有较高杀线活性。     

生防放线菌ZZ-9耐药菌株的微波诱变选育

为了获得耐甲基硫菌灵的菌株， 采用微波诱变法对放线菌ZZ-9菌株进行0～75 s的处理，筛选出在甲基硫菌灵致死浓度下仍能较好生长的突变菌株，并测定其对苹果树腐烂病菌拮抗性和传代稳定性的影响，选育出性能优良的耐药菌株，与甲基硫菌灵协同作用进行防治苹果树腐烂病试验。结果表明，在微波辐照15～60 s条件下，获得4株耐70 μg·mL^-1甲基硫菌灵的突变菌株ZZ-9A、ZZ-9B、ZZ-9C和ZZ-9D。通过对4株突变菌株进行抑菌率和传代稳定性测定，筛选出一株抑菌率较好且传代稳定的突变菌株ZZ-9B。菌株ZZ-9B与70 μg·mL^-1甲基硫菌灵协同作用测定表明，当菌株ZZ-9B与甲基硫菌灵配比为8∶2时，在离体枝条上对苹果树腐烂病的协同防效为89.42%，明显高于单独使用突变菌株和甲基硫菌灵的防效。因此，在使用菌株ZZ-9B来防治苹果树腐烂病时，添加少量的甲基硫菌灵，可显著提高防效。     

5种植物源药剂对苹果树腐烂病室内防效评价

采用菌落生长速率法、分生孢子玻片萌发法和离体枝条烫伤接种法测定了5种植物源药剂对苹果树腐烂病室内防治效果。结果表明, 5种植物源药剂对苹果树腐烂病菌菌落生长和分生孢子萌发均具有显著的抑制作用, 当0.3%丁子香酚SL、5%香芹酚AS、20%乙蒜素EC、0.5%小檗碱AS和1.3%苦参碱AS的有效成分浓度分别为3、50、100、50和14.44 μg/mL时, 其对苹果树腐烂病菌菌落生长的抑制率分别为98.63%、99.22%、99.22%、100%和79.29%, 其EC50分别为0.43、8.78、11.21、13.68和8.11 μg/mL; 对苹果树腐烂病菌分生孢子萌发的校正抑制率分别为97.92%、100%、95.83%、77.08%和96.88%, 其EC50分别为0.70、8.56、20.39、28.23和8.04 μg/mL。离体枝条保护试验表明, 20%乙蒜素EC有效成分浓度为100 μg/mL时对离体枝条保护作用最佳。本研究通过筛选明确了5种植物源药剂中0.3%丁子香酚SL可作为抑制苹果树腐烂病菌菌丝生长和分生孢子萌发的最佳药剂, 以及20%乙蒜素EC可作为离体枝条保护作用的最佳药剂。     

深绿木霉T2菌株对苹果霉心病的防治效果研究

为了明确深绿木霉(Trichoderma atroviride)T2菌株对苹果霉心病的防治效果,采用对峙培养的方法测定了T2菌株对苹果霉心病3种主要病原菌的抑制作用。结果表明,T2菌株及其发酵液对苹果霉心病的主要病原菌粉红单端孢(Trichothecium roseum)、砖红镰刀菌(Fusarium lateritium)和苹果链格孢(Alternaria mali)均具有较强的抑制作用。拮抗效果测定结果表明,T2菌株对砖红镰刀菌和苹果链格孢有很强的抑制作用,抑制率分别为81.44%、85.51%。T2菌株发酵原液对苹果链格孢和砖红镰刀菌的抑菌作用较强,抑制率均在80%以上,与生物源农药3%多抗霉素(6.67μg/m L)对3种苹果霉心病病原菌的抑菌作用相比,无显著差异。离体果实防效结果表明,T2菌株发酵液对苹果霉心病具有较好的防治效果,处理后第5d其防效平均为78.59%。综上,T2菌株对苹果霉心病具有较好的防治效果,研究结果可为苹果霉心病的防治及其生防制剂的研发提供理论基础。     

西藏油桃褐腐病菌生物学特性测定及室内药剂筛选

旨在明确西藏油桃上褐腐病菌（Monilia yunnanensis）的生物学特性及6种杀菌剂对其菌落生长的室内毒力。通过“菌落生长速率法”评价不同培养基成分温度、光照、pH及杀菌剂对M.yunnanensis菌落生长的影响。结果表明，在固体培养基上培养7 d后，M.yunnanensis最适生长碳源为淀粉，其生长速率为 0.696 cm/d，其次是乳糖和蔗糖，其生长速率分别为0.558和0.417 cm/d，在葡萄糖和山梨醇上的生长速率为0.343和0.328 cm/d，但在甘露醇培养基上具有显著的抑制作用；最适生长氮源为苯丙氨酸，生长速率为0.374 cm/d，蛋氨酸、硝酸铵及硝酸钠次之，其生长速率分别为0.290、0.248和0.246 cm/d，但是硫酸铵和尿素对其生长具有抑制作用；最适光照条件为全黑暗，其菌丝生长速率为0.721 cm/d，较其他光照条件具有显著性差异；最适温度20~25 ℃，但当温度高于40 ℃则不能正常生长；最适pH为6~8。室内毒力测定结果表明，6种杀菌剂对西藏油桃褐腐病菌生长均具有不同的抑制效果，其中丁子香酚和戊唑醇的抑菌效果最佳，其EC₅₀值分别为0.032和0.043 μg/mL。     

微波和紫外诱变对木霉T-YS菌株生长的影响

测定了微波诱变(700 W)和紫外诱变(10 W)处理对木霉T-YS菌株菌落直径,菌丝干重及产孢量的影响。结果表明:2种诱变方式和诱变时间对木霉T-YS菌株生长具有明显的影响,并且其影响作用随着诱变方式和时间的不同而不同,尤其当微波诱变和紫外诱变时间分别为60 s和1 min时,培养后第2和3 d诱变的木霉T-YS菌株菌落直径、菌丝干重及产孢量显著高于对照。因此,微波和紫外诱变对木霉T-YS菌株生长具有显著的影响,且其最佳诱变时间分别为60 s和1 min。     

绿色木霉B3菌株发酵液杀线活性分析及其稳定性测定

为了明确绿色木霉(Trichoderma viride)B3菌株对禾谷孢囊线虫毒杀活性及其稳定性。通过室内毒力测定,分析不同因素对绿色木霉B3菌株毒杀禾谷孢囊线虫2龄幼虫活性及其稳定性的影响。结果表明,绿色木霉B3菌株发酵液在自然光处理0～96 h后,对其杀线活性无显著影响,2龄幼虫死亡率为71.4%～86.2%;在不同氧化剂、还原剂和酸碱处理下,其抗氧化性、还原性和耐强酸强碱较强。同时,绿色木霉B3菌株发酵液耐贮藏性较好,储存60 d后杀线活性无显著差异。     

长枝木霉T6与阿维菌素复配对禾谷孢囊线虫的室内毒杀效果

旨在采用室内毒力测定法测定长枝木霉与阿维菌素复配对禾谷孢囊线虫2龄幼虫的毒杀效果。试验结果表明，单一长枝木霉T6菌株分生孢子悬浮液和阿维菌素对禾谷孢囊线虫2龄幼虫均表现出较好的毒杀效果，且不同浓度之间存在显著差异，随着处理浓度和时间的增加，毒杀作用增强。经2.0×10⁷ cfu·mL^-1的木霉分生孢子悬浮液和0.5 μg·mL^-1的阿维菌素溶液处理2龄幼虫48 h后，线虫死亡率分别达到71.43%和60.28%；当长枝木霉T6与0.5 μg·mL^-1的阿维菌素溶液按1∶1比例复配时，其对2龄幼虫的毒杀活性最佳，处理48 h后线虫死亡率高达96.30%，其毒杀作用显著优于单一长枝木霉T6和单一阿维菌素溶液。