华山松SSR-PCR反应体系优化

[目的]建立华山松SSR-PCR最佳反应体系,为华山松种质资源的分子标记辅助育种、遗传多样性分析及遗传图谱构建研究提供理论参考.[方法]以华山松幼嫩针叶为材料,分别采用试剂盒法、SDS法和改良CTAB法提取华山松基因组DNA,确定华山松DNA最佳的提取方法.通过L16(44)正交试验设计对华山松SSR-PCR反应体系中引物用量(A)、dNTP用量(B)、Taq DNA聚合酶用量(C)和DNA模板用量(D)进行优化,获得华山松SSR-PCR最佳反应体系.[结果]改良CTAB法提取的基因组DNA浓度为92.1~1786.3 ng/μL,OD260/OD280为1.80~2.07,OD260/OD230比值约2.0,条带明亮且清晰,无弥散现象,表明该方法提取效果最佳.正交试验极差分析结果显示,4个因素影响华山松SSR-PCR反应体系扩增效果的主次顺序为A>D>B>C,最优水平组合为A4B2C2D2.正交试验方差分析结果显示,4个因素影响华山松SSR-PCR反应体系扩增效果的主次顺序为A>D>C>B,最优水平组合为A4D2C2B2.结合正交试验16个组合的评分结果,最终确定华山松SSR-PCR最佳反应体系(20.00μL):10μmol/L引物0.35μL,50 ng/μL DNA模板1.00μL,10 mmol/L dNTP 2.00μL,5 U/μL Taq DNA聚合酶1.20μL,10×PCR Buffer(含Mg2+15 mmol/L)2.00μL,用ddH2O补足至20.00μL.[结论]优化获得的华山松SSR-PCR最佳反应体系可应用于华山松种质资源评价及分子标记辅助育种等研究.     

青光安Ⅱ号对慢性高眼压模型大鼠视网膜GSK-3β及β-catenin mRNA表达影响

目的 观察青光安Ⅱ号方对慢性高眼压模型大鼠视网膜GSK-3β及β-catenin mRNA表达影响。方法 将40只（80眼）雄性SD大鼠随机分成6组，分别为：空白组（A），模型组（B）、青光安Ⅱ号方低剂量组（C）、青光安Ⅱ号方中剂量组（D）、青光安Ⅱ号方高剂量组（E）、益脉康分散片组（F）。将B、C、D、E、F组大鼠采用烧灼巩膜表浅静脉法建立大鼠慢性高眼压模型。模型大鼠维持高眼压状态2月后开始干预，干预后2周、4周分别用qPCR检测大鼠视网膜GSK-3β及β-catenin mRNA的相对表达量。结果 2周后，与B组比较，各组GSK-3βmRNA表达降低而β-catenin mRNA表达升高，差异有统计学意义（P<0.05）。4周后，与F组比较，C、D、E组GSK-3βmRNA降低，β-catenin mRNA表达升高，差异有统计学意义（P<0.05）。与E组比较，C、D组GSK-3βmRNA降低而β-catenin mRNA表达升高，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 青光安Ⅱ号方及益脉康分散片均能抑制GSK-3βmRNA的表达，并增加β-catenin mRNA的相对表达量，对慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞有一定的保护作用；初步观察表明复方中药青光安Ⅱ号方在对慢性高眼压大鼠视神经的保护中，效果优于益脉康分散片，且以青光安Ⅱ号方高剂量最优。     

原发性开角型青光眼患者眼底荧光血管造影及血液流变学改变与中医证型关系的研究

目的 探讨原发性开角型青光眼的发病机理。方法 将85例原发性开角型青光眼患者分为高眼压型组、正常眼压型青光眼组，并与24例正常人进行对照，对其眼底荧光血管造影和血液流变学指标的改变及与中医辨证分型的关系进行研究。结果 原发性开角型青光眼高眼压型患者和正常眼压型青光眼患者与正常组相比，高（VH）、中（VM）、低（VI）切变率下全血表观粘度值、红细胞压积升高，差异均有显著统计学意义（P<0.01）。原发性开角型青光眼中医辨证分型各组与正常组比较，均表现为红细胞压积升高（P<0.01）。其中肝郁气滞证和肝肾亏虚证组分别与正常组相比，高（VH）、中（VM）、低（VI）切变率下全血表观粘度值、红细胞压积升高；痰湿泛目证组与正常组相比，红细胞压积比值差异有统计学意义（P<0.05）。原发性开角型青光眼高眼压型患者和正常眼压型青光眼患者与正常组相比，眼底荧光血管造影中臂-脉络膜充盈时间（A-CT）、臂-视网膜动脉充盈时间（A-AT）、视网膜动-静脉充盈时间（A-VT）延长差异均有统计学意义（P<0.01）。原发性开角型青光眼中医辨证分型各组与正常组比较，均表现为A-CT、A-AT、A-VT延长。其中肝郁气滞证、肝肾亏虚证组与痰湿泛目证组与正常组相比差异有统计学意义（P<0.05）。结论 原发性开角型青光眼高眼压型患者和正常眼压型青光眼患者均存在明显的血液呈现高凝状态的血瘀病理改变，而正常对照组的血瘀改变不明显。在中医证型中，这种血瘀病理以肝郁气滞证最明显，肝肾亏虚证次之，痰湿泛目证最轻，呈现肝郁气滞证 >肝肾亏虚证 >痰湿泛目证的趋势。     

两系杂交稻两优6206机插制种关键技术

两优6206是利用两系不育系丰6S与优质恢复系R206配组育成的籼型晚稻新品种,具有生长势强、生育期适中、抗性强、米质优、产量高等特点。2015年在江苏盐城黄海农场开展父母本同时机插制种技术研究,通过肥水管理,花期镜检和调整,父母本花期相遇和异交结实都较好,制种平均单产3.55 t/hm2。本文介绍了两优6206的亲本特征特性及机插制种关键技术。     

大宝山矿污染弃耕农田不同恢复植被下土壤动物群落结构及多样性

为了筛选重金属超富集植物提供土壤生态的科学依据，选取大宝山矿坝心区重金属污染弃耕农田上5种自然修复植物和1种人工栽培植物，采用干漏斗法（Tullgren法）进行6种植物根系下土壤动物群落结构及多样性调查与研究，共分离鉴定168只动物，分属2门7纲12目和4种幼体。结果表明，土壤强酸性和多金属（Cu、Cd、Zn）重度污染是导致弃耕农田动物群落结构简单，动物数量较少的主要原因，不同植被生长对根系下土壤动物的群落结构有一定影响，表现为乌毛蕨、类芦、小白菜、铺地黍4种植物根系下，土壤动物群落结构相对复杂，多样性指数较高，芦苇和斑茅的根系下土壤动物结构简单，多样性指数较低，无植物的裸露地下土壤动物结构最简单；不同植被的根系下土壤动物的群落结构有差别，表现为常见类群和稀有类群差别较大。     

抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备

为建立快速、简单、灵敏、有效的玉米赤霉烯酮的检测方法,将玉米赤霉烯酮与羧甲氧基胺半盐酸盐反应,合成半抗原ZEN-oxime,通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备玉米赤霉烯酮人工抗原,以人工抗原ZENBSA免疫BALB/C小鼠,取该鼠脾细胞与SP 2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和克隆,得到了1株能稳定分泌抗玉米赤霉烯酮抗体的单克隆细胞株3D10。3D10的抗体类型及亚类均为IgM,其轻链为Kappa链。制备的单克隆抗体腹水通过间接酶联免疫吸附测定,效价在1×10-6以上。该单克隆抗体对玉米赤霉烯酮的IC50为225 ng/ml,除与玉米赤霉烯酮结构类似物有一定的交叉反应外,与其他参试真菌毒素均无交叉反应。所制备的单克隆抗体可用于玉米赤霉烯酮毒素初筛和定性检测。     

原发性开角型青光眼患者眼血流动力学的改变及与中医证型关系的研究

目的 探讨原发性开角型青光眼患者眼血流动力学的改变及其与中医辨证分型之间的关系。方法 采用彩色超声多普勒成像（CDI）对102例原发性开角型青光眼患者眼血流动力学的改变进行了检测。结果 开角型青光眼及其中医证型（分为肝郁气滞证、痰湿犯目证、肝肾阴虚证）在眼动脉（OA）血流参数中，与正常组相比，PSV、EDV、AV差异均有统计学意义（P < 0.05或P < 0.01）；在视网膜中央动脉（CRA）血流参数中，与正常组相比，PSV、EDV和AV差异均有统计学意义（P < 0.05或P < 0.01），其变异程度依次为肝郁气滞证组 > 痰湿犯目证组 > 肝肾阴虚证组。结论 原发性开角型青光眼患者OA和CRA的血流速度下降明显，血流阻力增加，眼局部血液循环障碍，OA和CRA的血流参数可作为反映开角型青光眼及其中医证型间局部血瘀程度的一项重要指标。     

薏苡仁的化学成分及质量控制研究进展

为薏苡仁化学成分的深入研究及其资源开发利用提供参考,对薏苡仁的脂肪酸及酯类、薏苡素、多糖类、低聚糖类、黄酮类、糖蛋白类、甾醇类、内酰胺类等主要化学成分和薄层色谱法、分光光度法、液相色谱法、液相质谱联用法、红外光谱法、指纹图谱法、生物效价法、分子生物技术法等质量控制方法进行综述,并对存在的问题进行分析,提出了今后研究的方向。     

人造板喷蒸热压工艺研究进展

人造板喷蒸热压工艺是近年来研究开发的一种新型热压工艺,其热压性能显著优于普通热压工艺。介绍了人造板喷蒸热压技术原理、方法以及喷蒸热压工艺的研究进展,并对喷蒸热压工艺的研究方向提出了一些看法。     

超声波法提取豆渣中大豆异黄酮的工艺研究

以乙醇为溶剂,采用超声波提取法,对豆渣中大豆异黄酮的提取工艺进行研究.结果表明:乙醇浓度、提取温度、超声提取时间、料液比对豆渣中大豆异黄酮的提取均有影响；豆渣中大豆异黄酮的提取工艺为:乙醇浓度80％,提取温度50～60℃,超声提取时间30 ～40 min,料液比1∶8～1∶12.