水貂生长激素的原核表达及特异性抗血清制备

本研究旨在建立水貂生长激素(mink growth hormone,mGH)的原核高效表达体系,探索mGH蛋白规模化生产方法,利用获得的目的蛋白制备特异抗血清。将已构建的原核表达载体pET28b-mGH转化大肠杆菌Rosetta(DE3)TMpLysS感受态细胞,经IPTG诱导表达,超声破碎菌体后离心获得包涵体蛋白,利用8mol/L尿素对其进行溶解和复性,经Ni-NTA树脂亲和层析纯化获得重组蛋白。通过Western blotting检测及MALDI-TOFMS质谱分析对获得的蛋白进行鉴定。用SDS-PAGE电泳法检测蛋白纯度,用BCA法测定其浓度。复性mGH蛋白与完全弗氏佐剂或不完全弗氏佐剂乳化制备免疫抗原,采用皮下多点注射法免疫3只新西兰大白兔,首次免疫剂量为600μg/只,二免剂量为600μg/只,三免剂量为400μg/只。三免10d后分离制备血清,Western blotting法检测其特异性,间接ELISA法检测其效价。结果表明,原核表达的包涵体经Ni-NTA柱纯化后所得蛋白鉴定为mGH融合蛋白;SDS-PAGE电泳鉴定复性mGH蛋白条带单一,纯度达90%以上,BCA法计算蛋白浓度为669μg/mL,均达到了免疫动物的要求;制备的抗血清经Western blotting检测具有良好的结合特异性,间接ELISA法测定其抗体效价达1∶256 000以上。上述结果表明,原核表达载体pET28b-mGH可在大肠杆菌Rosetta(DE3)TMpLysS细胞中高效表达mGH融合蛋白,表达蛋白经变性、复性和纯化后免疫新西兰大白兔,可制备高效价特异性抗血清。     

如何打好一场与国际接轨的攻坚战“疫”

新型冠状病毒感染的肺炎疫情持续蔓延,这场不可预见的"硝烟"给中国带来了一些负面的国际影响,许多国外的金融机构和媒体认为新型冠状病毒对中国经济的影响将会是对中国经济的巨大冲击,并且将产生多米诺骨牌效应,冲击全球供应链,拉低今年世界经济增速。然而,外交部发言人耿爽表示,在国新举办的国务院应对新冠肺炎疫情联防联控机制新闻发布会上,国家发展改革部门就疫情对中国的影响作了介绍,疫情对中国影响的大小取决于疫情防控的进展和成效,我们有信心有能力把疫情对中国经济的影响降到最低,那么在宏观的大背景下,疫情给具体到的各行各业带来的影响又该如何应对呢?为深入贯彻习近平总书记重要指示精神和党中央关于坚决打赢防疫攻坚战的工作部署,因此依据WTO、WHO以及相关国内法,本文编辑整理了与疫情防控工作密切相关的法律问题提示,并给出建议。     

饲粮中添加不同益生菌对肉兔生长性能、屠宰性能、回肠黏膜免疫指标和盲肠发酵指标的影响北大核心CSCD

本试验旨在研究饲粮中添加不同益生菌对肉兔生长性能、屠宰性能、回肠黏膜免疫指标和盲肠发酵指标的影响,为益生菌在肉兔生产中应用提供理论参考。选用28日龄断奶、体重相近、健康状况良好的商品伊拉肉兔400只,随机分为4组,每组10个重复,每个重复10只。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加108CFU/kg植物乳杆菌(Lactiplantbacillus plantarum)、戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)和丁酸梭菌(Clostridium butyricum)。预试期7 d,正试期40 d。结果表明:1)饲粮中添加不同益生菌对肉兔生长性能、屠宰性能和内脏器官发育指标均无显著影响(P>0.05)。饲粮中添加不同益生菌有降低肉兔腹泻率的趋势(P=0.0595),有提高肉兔成活率的趋势(P=0.0603)。2)各试验组的空肠绒毛高度显著高于对照组(P<0.05),丁酸梭菌组的空肠隐窝深度显著高于其他各组(P<0.05)。3)试验组的回肠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量显著高于对照组(P<0.05),试验组的回肠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)含量显著低于对照组(P<0.05)。4)试验组的盲肠内容物pH显著低于对照组(P<0.05),试验组的盲肠内容物乙酸和总挥发性脂肪酸含量显著高于对照组(P<0.05),丁酸梭菌组的盲肠内容物氨态氮含量显著低于对照组(P<0.05)。由此可见,饲粮中添加不同益生菌均能够改善肠道形态结构,改变盲肠内容物挥发性脂肪酸组成,提高机体肠道黏膜免疫性能,对维持肉兔肠道健康具有一定促进作用。综合本试验结果,丁酸梭菌对维持肉兔肠道形态结构效果较好。     

荞麦抗旱性研究进展

荞麦是一种珍贵的药食同源作物,随着人们对健康饮食的逐渐重视,荞麦及其加工产品在人们生活中的地位越发重要。中国拥有丰富的荞麦资源,多种植在干旱或半干旱的冷凉高原山区及边远山区。干旱严重影响荞麦的产量和品质,提高荞麦抗旱性在荞麦生产中起着重要的作用。为此,从干旱对荞麦形态特征、抗旱性的生理生化基础、干旱对荞麦产量及品质的影响等方面阐述了荞麦抗旱性的研究进展,并对荞麦抗旱分子机理方面的研究进行了展望。     

浅谈绿色建筑的现状与发展

随着社会的不断进步,科学技术的高速发展,人类的生活水平逐渐提高,与此同时,人类社会面临的考验也越来越严峻。为了防止情况的恶化,人类提出了"绿色建筑"这一名词,最大限度的节约资源、保护环境、减少污染,为人类提供安全健康的生活环境,以达到人与自然地和谐共生。     

利福平对黑腹果蝇种群的影响

黑腹果蝇是危害蓝莓果实最严重的害虫之一,成虫将卵产在蓝莓果皮下,卵孵化后以幼虫为害,严重影响蓝莓的鲜销、贮藏及加工。为了探索抗生素利福平对黑腹果蝇种群的影响,以黑腹果蝇为试材,饲喂不同浓度(0.04、0.08、0.16、0.32、0.64、1.28、2.56mg·mL~(-1))的利福平,筛选出适宜浓度(0.64mg·mL~(-1))利福平并对黑腹果蝇F0代和F1代进行深入研究,以期为黑腹果蝇的种群繁殖提供参考依据。结果表明:使用利福平的浓度高于0.64mg·mL~(-1)时,黑腹果蝇产卵量显著(P0.05)下降,而低浓度的利福平则对黑腹果蝇没有显著影响。在F0代中,利福平处理雌性黑腹果蝇(C0)后,子代雌虫发育历期比对照显著增加(P0.05),处理雄性黑腹果蝇(B0)后化蛹量较处理雌性(C0)和处理雌雄性黑腹果蝇(D0)均显著增加(P0.05)。F1代中,处理B1和C1后,化蛹量、羽化量、发育历期和雌性比均显著(P0.01)变化,在D1处理中,黑腹果蝇产卵量极显著下(P0.01),从14.47降至1.93,化蛹量和羽化量均急剧降低,不能发育成完整的成虫。结果表明,高于0.64mg·mL~(-1)的利福平能降低黑腹果蝇F1子代的产卵量,使其种群下降。     

贵州不同气候油菜秆腐烂后微生物群落组成及其多样性

为给贵州山区秸秆饲料发酵生产实践提供技术依据,采集贵州4个不同气候区长期堆放自然腐烂的油菜秸秆,用微生物培养法研究了不同气候类型对降解微生物数量、种类及群落多样性的影响.结果表明:微生物三大类群细菌、放线菌、真菌的数量差异较大,细菌总数＞放线菌总数＞真菌总数.ShannonWiener和Simpson指数在赤水、贵阳两...     

鸡白痢沙门氏茵外膜蛋白C基因（OmpC）的克隆与表达

以鸡白痢沙门氏菌基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增得到1 026 bp的OmpC基因片段.将扩增的OmpC基因克隆至大肠杆茵-乳酸茵穿梭表达载体pW425et中,构建原核表达重组质粒pW425et-OmpC.将pW425et-OmpC转化至 thyA基因缺陷型大肠杆茵感受态E.coli X13中.SDS-PAGE分析可见1条约36 ku的融合蛋白.Western blot分析表明,该重组蛋白具有反应原性,本研究结果为pW425et-OmpC在乳酸茵中的表达提供了实验依据.     

苇状羊茅EST-SSR标记在草甸羊茅和多年生黑麦草的通用分析

草甸羊茅（Festuca pratensis Huds）和多年生黑麦草（Lolium perenne Lam）均是禾本科、多年生草本植物,是优良的牧草和草坪草。本研究采用40对苇状羊茅（Festuca arundinacea Schred）的表达序列标签-简单序列重复（Expressed sequence tags-simple sequence repeats,EST-SSR）分子标记分别评比了18份草甸羊茅和18份多年生黑麦草的遗传的多样性,并发现上述标记在草甸羊茅和多年生黑麦草中的通用性比例分别为55%和50%。在草甸羊茅中22对引物共扩增出212个条带,每对引物扩增条带数在4～13之间,多态性条带总数为190条,百分率为89.62%;多年生黑麦草中20对引物共扩增出203个条带,条带数在4～16之间,多态性条带总数为182条,百分率为89.67％;另外,分子标记NFA103和NFA140可以直接用于区别多年生黑麦草和草甸羊茅。综上,本研究发掘的通用性引物对于两种草的遗传多样性分析及种质资源合理利用具有重要的意义。     

撑绿竹赤霉病的病原菌鉴定及杀菌剂毒力测定

根据病原菌形态特征和致病性等特点,鉴定撑绿竹赤霉病的病原菌为子囊菌门肉座菌目肉座菌科的虱状赤霉(竹赤霉菌)Gibberella pulicaris(Fr.)Sacc..对10种杀菌剂抑菌效果筛选,10%世高、50%多菌灵、60%茄苯得、80%炭疽福美对菌丝的抑制效果均80%以上,其EC<,50>依次为0.033,310.88,528.98,770.68μg/mL.