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【目的】γ-谷氨酰磷酸还原酶是真菌脯氨酸合成途径中的一个关键性酶,本研究旨在对核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)γ-谷氨酰磷酸还原酶编码基因SsGPR1进行沉默,并对沉默转化子菌丝生长、菌核形成和致病力等表型进行研究,为揭示核盘菌的生长发育与致病机理打下基础,并为作物菌核病的绿色防控提供线索。【方法】通过BLAST进行蛋白同源比对分析,并利用MEGA 5.0软件构建蛋白进化树。通过实时荧光RT-PCR检测SsGPR1在核盘菌菌丝生长、菌核发育和萌发的各个阶段以及致病不同时期的表达模式。根据RNA干扰原理构建SsGPR1的沉默载体,通过PEG介导原生质体转化的方法将沉默载体转入到野生型核盘菌菌株1980中。利用实时荧光RT-PCR鉴定基因沉默转化子,对沉默转化子的菌丝形态、生长速度和菌核形成等表型进行观察,并测定沉默转化子在氧化胁迫条件下的菌丝生长。将沉默转化子分别接种至活体油菜叶片和拟南芥植株,观察并测量病斑大小。通过酸性茚三酮法对沉默转化子中的游离脯氨酸进行测定。【结果】核盘菌SsGPR1全长1 454 bp,编码449个氨基酸,在氨基酸H~(10)-N~(426)处含有谷氨酰磷酸还原酶结构域。同源比对发现SsGPR1蛋白与灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的BC1G_13183蛋白和白霉病菌(Sclerotinia borealis)的SBOR_2215蛋白相似性最高,氨基酸序列一致性分别达95%和94%,系统进化树结果表明三者聚为一个小的分支。SsGPR1在核盘菌菌丝生长时期的表达量较高,在菌核不同发育阶段表达量相近,但均低于菌丝生长时期。SsGPR1在致病时期表达量不断升高,在接种后9 h表达量最高。将SsGPR1基因沉默载体pSIGPR1导入到核盘菌野生型菌株中,并通过实时荧光RT-PCR检测不同转化子中SsGPR1的表达水平,结果表明SiGPR1-104和SiGPR1-149为SsGPR1基因沉默转化子。沉默转化子在PDA培养基上形成的菌核数量及均重与野生型菌株无显著性差异,且菌核均能萌发形成子囊盘,但菌丝生长稠密,生长速度显著下降。在含有H_2O_2的培养基中,SsGPR1基因沉默转化子菌丝生长受到更强的抑制,表明沉默转化子对氧化胁迫更加敏感。SsGPR1基因沉默转化子在活体油菜叶片和拟南芥植株上能引起发病,但病斑面积减小,表明沉默转化子致病力减弱。SsGPR1基因沉默转化子菌丝中的游离脯氨酸含量与野生型菌株相比无显著差异。【结论】SsGPR1与核盘菌的生长和菌丝形态相关,且参与核盘菌对氧化胁迫的抵御及致病过程。 相似文献
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在自然条件下,通过比较水田和旱地地块的肥力差异,选择合适的评价模式,以制定合理的耕地利用依据。结合研究区丘陵山地水田和旱地交错的分布特点,依据最小控制斑块面积确定评价单元数,重点分析了水田和旱地在实际耕作中的差异性,并结合操作实践合理分配水田和旱地在评价体系中各指标的权重系数。结果表明,评价单元数的多少对评价结果的影响比较明显,综合研究区耕地地力实际情况和节约计算耗时的实际,建议最小控制斑块面积在临界值(推荐值)的10%为佳;另外通过水旱分开评价和水旱统一评价两种评价模式的比较,发现水旱分开能使评价结果更加贴近实际情形,反映实际耕地地力状况,能够更加有效地指导农业生产实践。 相似文献
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随着城市化步伐加快、规模不断扩大,城市向周边扩张过程中征用大量农田或集体用地,形成了庞大的失地农民群体,安置区也随之出现。鉴于此,笔者从合肥市滨湖新区安置区基本现状入手,通过问卷调查、行为记录,访谈记录等方式,分别对五个拆迁安置区的现状进行实地调研,了解回迁居民的人员构成、教育背景、职业属性、教育观念等方面,了解安置区家庭教育的现状。 相似文献
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如何科学协调地区经济发展与耕地资源保护二者之间关系一直以来都是考察地方行政决策能力和发展理念的现实难题。随着我国进入全面建成小康社会的决定性阶段,工业化与城镇化水平的提升对发展空间的需求势必对地区耕地资源的保护产生重大影响。以城镇化水平快速提升的典型区域合肥市为研究对象,基于该市1990~2010年耕地资源变化数据与社会经济发展统计数据,系统分析了合肥市城镇化水平与耕地面积变化情况;同时,结合合肥市耕地资源数量变化的实际情况,科学选取能够有效反映城镇化现状的8项社会经济发展因素作为指标,综合运用主成分分析法与回归分析法,有序开展耕地资源数量变化驱动力分析,最后,提出一些推进新型城镇化建设的对策建议,以期为合肥市社会经济的持续、健康发展提供参考。 相似文献
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全国农机安全监理“为民服务创先争优”示范窗口创建活动开展以来,陕西省榆阳区农机安全监理站以“建设一流队伍、创造一流业绩”为目标,求真务实,真抓实干。他们以树立农机监理行业形象为主题,从抓行风建设人手,不断创新工作方法,拓宽工作思路,加大工作力度,提高了全站职工的思想道德修养,培育出一支政治坚定、业务过硬、作风优良,清正廉洁的农机安全执法队伍,为全区农机化事业的发展和社会主义新农村建设做出了应有的贡献。 相似文献
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树木对重金属的抗性机理研究进展 总被引:4,自引:0,他引:4
土壤重金属污染问题是当今世界较为严重的环境问题之一。树木生物量高,根系发达,一般不进入食物链,一些树木对环境中重金属具有较强的吸收和积累作用,防止土壤金属污染的扩散。为了深入探索树木应对重金属污染的抗性机理,笔者主要从根系分泌物、内生细菌与菌根、螯合作用、抗氧化系统以及区室化作用等方面综述了近年来,尤其是近5年来树木应对重金属的抗性机制研究进展,发现由于重金属对于树木毒害作用的多方面性,树木重金属抗性机理具有复杂性,因此许多机理仍不清晰,今后还需要利用不断更新的技术手段,研究其不同抗性机理的协同作用,对其机制进行更深入系统的研究。最后,笔者展望了通过生物技术手段的改造,将树木应用于环境修复的前景。 相似文献
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以海兰蛋鸡为试验对象,进行了噁唑酰草胺原药在蛋鸡体内的代谢试验,寻找给药后其在蛋鸡排泄物中潜在的代谢产物。采用UFLC-QTRAP-MS中多反应监测扫描、母离子扫描、中性丢失扫描方法进行数据采集,结合Lightsight软件对数据进行处理。结合原型和代谢产物的质谱裂解规律,从给药后蛋鸡排泄物中共推测了10种代谢产物,包括8个Ⅰ相代谢产物,2个Ⅱ相代谢产物;通过与标准品比较,确证了2种代谢产物的结构;结果显示噁唑酰草胺在蛋鸡体内能够发生广泛的代谢,主要包括氧化、O-脱烷基、脱氯、水解及葡萄糖醛酸化结合反应。研究发现,噁唑酰草胺在蛋鸡排泄物中除了以原型的形式暴露,还以多种形式的代谢产物存在。 相似文献
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社会资本是影响区域社会经济可持续发展的重要因素.研究基于入户调查资料,设计了社会资本测量体系,利用因子分析方法,测算了三峡库区社会资本存量,分析了农户社会资本特征,并分析了影响区域农户社会资本的因素.结果显示:(1)三峡库区农户社会资本总值为4.27;(2)社会凝聚力维度得分最高,集体行为维度得分最低的;(3)影响社会资本的因素不同维度存在差异性,农户家庭平均受教育程度、户主年龄、家庭收入、家庭劳动力数量、农户财富差异等因素对社会资本有显著影响. 相似文献
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当前,受贿犯罪行为呈现出方式不断更新、手段更加隐蔽等新特征,给办理受贿案件带来诸多难题。结合一则新型受贿罪案例,着重分析受贿犯罪行为与委托理财、借款合同等民事投资行为的界限,在厘清腐败分子主观故意的基础上,最终认定国家工作人员为他人谋利后以委托理财名义提供资金给他人,获得保底高收益回报行为构成受贿。通过对该案的阐释分析,以期对今后解决此类受贿案件提供一点有益参考。 相似文献