番茄黄化曲叶病毒双抗体夹心ELISA检测方法的初步建立

以纯化的番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)外壳蛋白为抗原,免疫家兔制备并纯化出TYLCV的多克隆抗体IgG,以此抗体做包被抗体,并用碱性磷酸酶(AP)对其进行标记作为酶标抗体,从而建立了番茄黄化曲叶病毒的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法。通过ELISA方阵试验确定该法的最佳工作浓度为酶标抗体(IgG-AP)作1∶400倍稀释,包被抗体浓度为6.25μg.mL-1;并且确定了抗原最低检出浓度为9.75ng.mL-1。采用该法对山东寿光的田间病样进行了定性和定量检测,结果表明建立的DAS-ELISA方法灵敏度高、特异性强,可用于番茄黄化曲叶病毒的常规检测。     

我国番茄抗病选育技术国际领先

由西北农林科技大学主持完成的"番茄抗病抗逆育种技术及新品种选育"项目已通过了专家鉴定。鉴定委员会认为,该成果创新性明显,经济效益显著,应用前景广阔,整体达到国际先进水平,抗TY粉果番茄品种选育技术达到国际领先水平。我国番茄高端品种市场被国外种子公司长期占领,国内番茄产业的健康、可持续发展受到严重制约。2001年到2011年间,西北农林科技大学梁燕教授领导的团队一直致力于番     

不同番茄品种对番茄黄化曲叶病毒的抗病性分析

【目的】番茄黄化曲叶病毒病(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)是一种影响全世界番茄生产的病害,培育抗病品种是最有效、经济和持久的防控手段。目前生产上应用的抗病品种繁多,但存在对TYLVC不同抗性基因的抗性水平研究甚少、了解不够全面的问题。为了解带有不同抗性基因的番茄品种对番茄黄化曲叶病毒病的抗性,对北京市农林科学院蔬菜中心培育的番茄品种抗病性进行检测,并利用半定量RT-PCR方法分析抗病基因和抗病蛋白的表达水平。【方法】选取携带有Ty3a/Ty3a的番茄材料秋光285(Ty3a纯合)、棚137×246(Ty3a杂合),携带Ty1+Ty3a纯合的秋光120、携带Ty1+Ty3a杂合的秋光81和感病对照M82为试验材料,观察番茄植株自然条件下发病情况。通过调查发病率和病情指数,考查这些番茄品种的抗病性,并利用RT-PCR方法分析抗病基因Ty1和Ty3a以及病程相关蛋白葡聚糖酶和几丁质酶基因的表达水平。【结果】携带抗性基因的杂合体、纯合体抗病性差异不明显,含有两个抗性基因和含有单一抗病基因品种的抗病性稍有差异,但差异不显著。半定量RT-PCR结果显示不同番茄品种在感染TYLCV后,体内抗性基因表达量随着发病时间的增加,Ty-3a和Ty-1的表达量逐渐增强。Ty-3a在4个番茄品种中表达水平由弱到强依次为秋光285(Ty-3a纯合)、棚137×246(Ty-3a杂合)、秋光120(Ty-1+Ty-3a纯合)和秋光81(Ty-1+Ty-3a杂合),Ty-1在秋光81中的表达显著高于在秋光120中的表达。同时,植株体内葡聚糖酶和几丁质酶基因表达量均比对照显著增加,并随着发病时间的增加逐渐增强。在发病20 d和30 d后,携带Ty-1+Ty-3a杂合的秋光81的葡聚糖酶基因表达显著强于其他几个品种。【结论】几个番茄材料对TYLCV的抗性由弱到强依次为秋光285(Ty3a纯合)、棚137×246(Ty3a杂合)、秋光120(Ty1+Ty3a纯合)和秋光81(Ty1+Ty3a杂合)。不同番茄抗病品种感染TYLCV后,体内抗性基因表达量随发病时间增加而增强,葡聚糖酶和几丁质酶基因表达量均比感病对照显著增加,表明番茄抗病品种在感染TYLCV后的抗病性除了与抗性基因的表达有关外,同时也与抗病相关蛋白表达增强有关。     

TaqMan探针实时荧光定量PCR检测番茄黄化曲叶病毒

根据番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)外壳蛋白(CP)基因序列上的保守序列,设计特异性的引物和Taqman探针,建立荧光定量PCR方法。结果表明,试验建立的标准曲线循环阈值(Ct值)与模板浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.9941;能检测到1 000个病毒拷贝,灵敏度比普通PCR高100倍;与番茄花叶病毒和黄瓜花叶病毒无交叉反应,特异性强、重复性佳,为TYLCV检测提供了一种特异、灵敏、快速的定量检测方法。     

番茄黄化曲叶病毒病的发生规律与防控措施

番茄黄化曲叶病毒病(以下简称番茄TY病毒病),它起源于中东地区和地中海盆地,主要分布在地中海西部、日本、美国东南部和加勒比海地区,是热带、亚热带地区一种最具毁灭性的番茄病毒病。与其他病毒病相比,该病具有暴发突然、发病凶猛、扩展迅速、为害性强、治疗难度大的特点,发病后没有好的药剂可以防治,已成为许多地区番茄生产的主要制约因素。     

连云港地区番茄黄化曲叶病毒病的发生原因与防治措施

介绍了番茄黄化曲叶病毒的发生特点,分析了其发生原因,并提出了防治措施,以期指导设施番茄的栽培。     

番茄黄化曲叶病毒和条斑病毒的综合防治

1番茄黄化曲叶病毒病黄化曲叶病毒病是番茄的一种毁灭性病害,在我国呈大面积蔓延之势,造成了巨大危害。1.1症状识别:受害叶褪绿萎蔫。番茄植株感染病毒后,初期主要表现为植株生长迟缓或停滞,节间变短,植株明显矮化,叶片变小、变厚以及黄化、卷曲,无法正常开花结果;后期表现坐果少,果实变小,膨大速度慢,成熟期的果实不能正常转色。若在开花前感病,造成的损失可达100%。     

绿地牌防虫网防虫效果

绿地牌防虫网是利用聚乙烯为原料经拉丝织造而成的一种形似窗纱的新型覆盖材料,它具有耐拉强度大、抗紫外线、抗热、防腐蚀、不易老化等优点,对防治大棚蔬菜病虫效果较好。一、试验目的2011年由烟粉虱传播的番茄黄化曲叶病毒病,给莎车县设施番茄造成毁灭性危害,如任由之扩散蔓延,将严重影响我县农业快速发展。为了探索防虫     

“番茄黄化曲叶病毒病”技术光盘简介

番茄黄化曲叶病毒病是由"超级害虫"烟粉虱引起的番茄第一大毁灭性病害,分布广、防治困难、损失惨重。本片通过现场拍摄、农民和专家采访、田间操作等系统直观地介绍了该病的发生危害特点、症状特征、传播途径、     

“番茄黄化曲叶病毒病”技术光盘简介

番茄黄化曲叶病毒病是由超级害虫烟粉虱引起的番茄第一大毁灭性病害,分布广、防治困难、损失惨重。本片通过现场拍摄、农民和专家采访、田间操作等系统直观地介绍了该病的发生危害特点、症状特征、传播途径、流行规律等,重点介绍了运用抗病品种、培育无病虫壮苗、无病栽培、病残无害处理和烟粉虱防控等多种实