HPLC法同时测定大鼠血浆中3种CYP 450 探针药物的浓度

建立同时测定大鼠血浆中3种细胞色素P450（CYP450）亚型酶( CYP1A2、CYP2C9、CYP3A4)活性的Cocktail探针药物的高效液相色谱（HPLC）检测方法,为相关肝药酶代谢研究提供方法学参考。分别取非那西丁,咪达唑仑和甲苯磺丁脲三种探针药物,制成混合探针溶液,用一种提取溶剂系统对3种探针药物同时提取,并用高效液相色谱法（HPLC）同时测定该3种探针药物的血药浓度,并对其进行专属性,线性范围及检测限,精密度,回收率,稳定性的验证。色谱条件选用Diamonsil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）;流动相为甲醇-50 mM磷酸盐缓冲对（45:55;pH3.2）;检测波长：230 nm;流速1.0 mL/min;柱温35 ℃。结果：非那西丁,咪达唑仑,甲苯磺丁脲的线性范围分别为0.10～10.0 μg/mL(r=0.9993),0.05～5.0 μg/mL(r=0.9999),0.10～50.0 μg/mL(r=0.9991);方法回收率分别为79.28 %～87.91 %,76.43 %～85.36 %,82.79 %～90.61 %。该HPLC检测方法快捷,准确,灵敏度高,可以在同一次试验中,同时测定大鼠血浆中3种CYP450亚酶探针药物（非那西丁,甲苯磺丁脲,咪达唑仑）的浓度,各探针药物的吸收峰分离完全,无干扰,可用于开展某些受试药物对大鼠CYP450的3个主要亚型酶（CYP1A2,CYP2C9,CYP3A4）调控作用的相关研究。