一株锦鲤疱疹病毒的分离与鉴定

本实验对患病鲤鱼进行病毒分离及鉴定,将表现典型锦锂疱疹病毒(KHV)病症状的鲤鱼肾细胞与单层框镜鲤鱼鳍细胞(KFC)共培养,5d～6d后出现典型的KHV细胞病变,即细胞体积增大并出现空泡化;在电镜下观察到典型的KHV病毒粒子;并应用PCR方法扩增获得KHV ORF25基因的849bp基因片段,连接至pMD18-T载体中,经酶切鉴定后序列分析表明,与GenBank登录的3株KHV同源性均为99.9%,命名为KHV-cj.基因进化比较显示,与KHV-J株关系较近.将病毒培养物(10-6.75TCID50)腹腔注射接种实验鱼可使其100%发病,并且症状和病理变化与自然感染KHV的鱼一致,死亡率为75%.表明本研究在国内首次分离到KHV.  

鸭“白点病”（暂定名）病原学研究

对3个“白点病”（暂定名）发病严重的鸭场的病死鸭进行细菌学检查均为阴性，但均分离到病毒。对其中1株病毒进行了鉴定。负染及超薄切征电镜观察，可见呈球形或卵圆形、直径80-230nm、有囊膜的病毒。经理化特性、生物学特性及核酸类型测定，确定该病毒为疱疹病毒科成员。血清中和试验表明，该病毒与鸭瘟病毒、鸭疱疹病毒Ⅱ型无血清学相关性，故暂定名为鸭疱疹病毒Ⅲ型。人工感染试验复制出与自然感染病死鸭相同的病变，初步证明该病毒为鸭“白点病”病原。  

氟苯尼考长效制剂对鸡大肠杆菌病的疗效试验

用试管二倍稀释法测定了氟苯尼考与丁胺卡那霉素对大肠杆菌质控菌株ATCC25922,菌株K88、HD1047和临床分离的36株大肠杆菌的体外抗菌活性,进行了鸡大肠杆菌病的临床疗效试验.结果质控菌株和K88、HD1047株对氟苯尼考均敏感,36株临床分离菌株对氟苯尼考的敏感率为96.2%.在临床疗效试验中,氟苯尼考长效口服液和注射剂组的死亡率低于感染对照组和丁胺卡那霉素对照组(P《0.01),治愈率及有效率高于感染对照组和丁胺卡那霉素对照组(P《0.01),表明氟苯尼考长效制剂对鸡大肠杆菌病的治疗有很好的疗效并有较好的应用前景.  

Invasion and spread of single glycoprotein deleted mutants of Aujeszky's disease virus (ADV) in the trigeminal nervous pathway of pigs after intranasal inoculation

The purpose of the study was to evaluate the role which non-essential envelope glycoproteins play in the neuroinvasion and neural spread of ADV. The invasion and spread in the trigeminal nervous pathway with the Ka strain of ADV and its single deletion mutants Ka gI⁻, Ka gp63⁻ and Ka gIII⁻ were examined after intranasal inoculation in neonatal pigs by virus isolation and immunocytochemistry. Evaluation was performed in the nasal mucosa, trigeminal ganglion (1st neuronal level), pons-medulla (2nd neuronal level) and thalamus-cerebellum (3rd neuronal level). The Ka gIII⁻ mutant invaded up to the 3rd neuronal level of the trigeminal pathway and spread in a similar way to the parental Ka strain. The Ka gp63⁻ mutant invaded up to the 3rd neuronal level but the spread of this mutant was impaired at all the neuronal levels. The Ka gI⁻ mutant was least neuroinvasive and reached only up to the 2nd neuronal level. The results showed that glycoproteins gI and gp63 play a role in the invasion and spread of ADV in the nervous system. However, the gI glycoprotein appears to be the most important for neuroinvasion and neural spread of ADV in pigs. Therefore, gI deleted vaccines may be considered to be safer with respect to the neuroinvasion than vaccines carrying single deletions of other non-essential envelope glycoproteins.  

鸭瘟病毒的分子生物学研究进展

鸭瘟病毒属疱疹病毒科、α-疱疹病毒亚科。其核酸结构为线状双股 DNA,衣壳为二十面体对称 ,有囊膜。鸭瘟病毒的 DNA具典型的疱疹病毒 DNA的特征 ,大小约为 1 50 kb,两端为末端重复序列 ,中间有内部重复序列。囊膜蛋白为疱疹病毒的主要保护性抗原 ,它在介导病毒进入细胞 ,以及病毒的成熟与释放中均起重要的作用。疱疹病毒的囊膜蛋白主要有糖蛋白 B( Glycoprotein B,g B)、g C、g D、g E、g I等。其他蛋白如 Ul3 6、Ul3 7等在病毒的成熟与释放中也起重要的作用。国内外已有多人建立起鸭瘟的PCR检测方法 ,而其基因工程疫苗的研究报道较少。但参考其他疱疹病毒特别是伪狂犬病的基因工程疫苗的研究 ,可以推测鸭瘟的基因工程疫苗研究也大有可为。  

Pharmacological, Therapeutic and Toxicological Properties of Furazolidone: Some Recent Research

Some of the recent publications on the pharmacological, therapeutic and toxicological properties of the antimicrobial agent furazolidone (FZ) are briefly reviewed. In animals, most of the recently published papers focus on (1) the methodology of measuring the residues of the drug and its metabolites in edible tissues; (2) the carcinogenicity and genotoxicity of FZ; (3) the cellular and molecular basis of FZ-induced cardiomyopthy, and the action of different cardioprotectant drugs thereon; and (4) hormonal effects. In humans, the use of FZ as an anti-ulcer drug and in controlling infectious diseases, especially opportunistic infections in AIDS patients, is described.  

共表达与牛疱疹病毒1型VP22融合的猪繁殖与呼吸综合征病毒E及M蛋白的重组伪狂犬病毒的构建及其免疫原性观察

为了研制猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）基因工程疫苗，以伪狂犬病毒（PRV）gE基因缺失标志疫苗株TK^-／gE^-／LacZ^＋为病毒载体，通过同源重组，构建了共表达与牛疱疹病毒1型VP22（BHV-1 VP22）融合的PRRSV E及M蛋白的重组伪狂犬病毒（rPRV）TK^-／gE^-／VP22E^＋／VP22M^＋。经PCR、Southern blot、Western blot证实rPRV构建正确，并能表达与BHV-1 VP22融合的PRRSV E及M蛋白。rPRV在IBRS-2、PK-15细胞中的增殖滴度与PRV亲本株相比无显著差异，表明外源基因的插入不影响rPRV增殖。用该rPRV免疫BALB／c小鼠,检测免疫小鼠抗PRRSV中和抗体及脾淋巴细胞增殖反应，并与未融合VP22的单表达PRRSV E蛋白及共表达E及M蛋白的rPRV TK^-／gE^-／E^＋与TK^-／gE^-／E^＋／M^＋进行比较。结果显示TK^-／gE^-／VP22E^＋／VP22M^＋可诱导小鼠产生更好的体液与细胞免疫反应，BHV-1 VP22发挥了佐剂效应。本研究为研制安全、有效的猪繁殖与呼吸综合征-伪狂犬病二价基因工程疫苗奠定了基础。  

锦鲤疱疹病毒荧光定量PCR检测方法的建立

根据锦鲤疱疹病毒（KHv）胸苷激酶（TK）基因的保守序列设计一对引物和相应的TaqMan探针，建立荧光定量PCR方法，用于锦鲤疱疹病毒快速、灵敏、可定量的检测手段。构建并制备实时荧光定量PCR的标准品，对反应体系进行优化，并做特异性，敏感性和重复性试验。结果表明，成功构建荧光定量PCR标准品，建立荧光定量标准曲线，标准曲线的相关系数为0．992，所建立的荧光定量PCR方法特异性强、敏感性高，重复性好。  

反刍兽胃肠弛缓动物模型的建立及治疗实验

利用瘤胃、盲肠造瘘羊，投给０．４５ｍｏｌ／Ｌ醋酸１Ｌ或０．７５ｍｏｌ／Ｌ碳酸钠溶液１Ｌ，成功地复制了胃肠弛缓模型，胃肠弛缓至少持续４ｈ。投服碳酸盐缓冲合剂（ＣＢＭ）或醋酸盐缓冲合剂（ＡＢＭ），能迅速纠正实验性胃肠弛缓羊瘤胃内容物的ｐＨ值，恢复瘤胃电、肠电的活动性，解除胃肠弛缓。健康羊投服ＣＢＭ或ＡＢＭ，瘤胃内环境参数呈一时性异常，持续时间不超过１ｈ，且可自行缓解。由此表明，瘤胃内环境特别是酸碱度的相对恒定，对维持瘤胃乃至肠道的运动性至关重要，瘤胃内容物酸度或碱度增高，会降低胃肠的运动性，引发胃肠弛缓；投服ＣＢＭ或ＡＢＭ能迅速纠正酸过多性或碱过多性胃肠弛缓。