黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展

在综述国内黄芪中黄芪甲苷含量测定方法基础上,分析黄芪中的黄芪甲苷含量测定方法研究进展,包括HPLC-ELSD法、HPLC/ESI-MS联用法、HPLC-UV法、UPLC-MS法、HPLC-DAD-ELSD法等,旨在为进一步开展黄芪相关研究提供理论借鉴。     

黄芪皂苷的提取和纯化工艺研究

[摘要]： 目的：研究黄芪皂苷的最佳提取和纯化工艺。方法：采用正交设计法,以浸膏得率和黄芪皂苷含量为检测指标优选提取工艺;采用单因素考察法对黄芪皂苷纯化工艺中各影响参数进行优选。结果：黄芪皂苷最佳提取工艺为：黄芪药材加入10倍量的水、煎煮2次、每次1.5小时;黄芪皂苷最佳纯化工艺为：黄芪提取液上AB-8大孔吸附树脂,用3个柱体积的40%的酒精除杂,再用5个柱体积的80%的酒精进行纯化。结论：所建立的提取纯化工艺简单,所得到的皂苷含量高,适合工业化生产。     

黄芪多糖及皂甙提取工艺研究

黄芪多糖和皂甙是药用皂芪的两个主要有效成分。该文探讨了黄芪多糖(ASP)和皂甙(AS)的提取工艺,研究了从黄芪中同时得到多糖和皂甙的提取工艺。采用先醇提后水提的方法,确定了合适的醇提次数和浓度。另外,还研究了超滤法与树脂吸附法相结合的工艺,可以同时得到高含量的多糖和皂甙产品     

水氮耦合对蒙古黄芪干物质积累及产量的影响

以一年生蒙古黄芪为供试材料,采用裂区设计,以灌水量(W1,3 200 m~3·hm~(-2)、W2,3 600 m~3·hm~(-2)、W3,4 000 m~3·hm~(-2))做主区,施氮量(N0:0 kg·hm~(-2),N1:50 kg·hm~(-2),N2:100 kg·hm~(-2),N3:150 kg·hm~(-2))为副区,测定黄芪的干物质积累特征、产量及甲苷含量。结果表明:灌水量和施氮量的互作效应对黄芪生育期干物质最大增长速率及其出现的天数、产量和黄芪甲苷含量具有显著影响(p0.05)。在相同灌水条件下,W1N2处理的干物质最大增长速率较W1N0、W1N1和W1N3处理分别提高16.08%、9.96%和7.75%,W1N2处理的干物质最大增长速率出现天数较W1N0、W1N1和W1N3处理分别缩短6.07、8.14 d和8.15 d。W1N2处理的产量较W1N0 (对照)、W1N1和W1N3分别提高186.32%、11.99%和33.11%,W1N2处理的黄芪甲苷含量较W1N0、W1N1和W1N3处理分别提高167.03%、50.93%和24.94%。在相同施氮条件下,W1N2处理的干物质最大增长速率较W2N2和W3N2处理分别提高8.41%和12.65%,W1N2处理的干物质最大增长速率出现天数较W2N2和W3N2处理分别缩短5.36 d和6.90 d, W1N2处理的黄芪甲苷含量较W2N2和W3N2处理分别提高17.11%和74.82%。说明生育期减量20%灌水(3 200 m~3·hm~(-2))与中施氮量耦合(100 kg·hm~(-2))的最优栽培模式能够显著提高黄芪的干物质积累量、积累速率和产量,有效改善黄芪的品质,在绿洲灌区黄芪生产实践中具有推广价值。     

芪参口服液的定性鉴别

为建立芪参口服液的质量标准,采用薄层色谱法对口服液中的黄芪、白术和甘草进行鉴别,采用高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)对党参进行鉴别。结果显示,薄层色谱中各样品特征性斑点显色清晰,阴性对照无干扰;样品溶液中检测出党参炔苷的特征性色谱峰,而在阴性样品溶液中没有出现。说明所建立的薄层色谱法和高效液相色谱-紫外检测法的专属性强,可用于该口服液的定性鉴别。     

种植密度及氮肥对绿洲区蒙古黄芪有效成分和产量的影响

为探讨不同氮肥用量和种植密度的综合效应对蒙古黄芪光合特性、有效成分和产量的调控机理,以蒙古黄芪为研究对象,于2019—2020年在绿洲区开展大田试验,采用裂区设计,种植密度(180 000、240 000、300 000株·hm^-2,分别记作D1、D2、D3)做主区,施氮量(0、40、80、120 kg N·hm^-2,分别记作N0、N1、N2、N3)做裂区,测定蒙古黄芪生育期内的净光合速率、叶绿素含量、干物质积累特征、有效成分及产量等指标。结果表明,氮肥用量与种植密度的互作效应对黄芪净光合速率、叶绿素含量、干物质积累最大增长速率、产量和黄芪甲苷含量均具有显著影响(P<0.05)。在相同施氮水平下,与N2D1和N2D3处理相比,N2D2处理的净光合速率、叶绿素含量、干物质积累最大增长速率、产量、黄芪甲苷含量分别提高59.31%和38.88%、41.22%和15.18%、40.68%和7.22%、15.15%和10.52%、0.027和0.019个百分点。在相同种植密度下,与N0D2、N1D2、N3D2处理相比,N2D2处理的净光合速率、叶绿素含量、干物质积累最大增长速率、产量、黄芪甲苷含量分别提高75.18%、31.76%、17.79%,70.13%、22.28%、8.32%,39.36%、29.66%%、22.61%,144.66%、23.41%、20.47%,0.079、0.053、0.047个百分点。综上所述,氮肥施用量80 kg·hm^-2(N2)结合种植密度240 000株·hm^-2(D2)是最优栽培模式,能够显著提高蒙古黄芪光合特性、产量和黄芪甲苷含量。本研究结果为蒙古黄芪合理施肥与密植提供了技术参考,在黄芪生产实践中具有重要推广价值。     

藿芪灌注液中淫羊藿苷和黄芪甲苷稳定性试验研究

为了研究藿芪灌注液的稳定性,采用HPLC法测定藿芪灌注液中淫羊藿苷与黄芪甲苷含量,使用Wonda Sil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-水28∶72,柱温40℃,检测波长270 nm,进样量10μL,流速1.0 m L/min测定淫羊藿苷的含量;使用ZORBAX SB-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),漂移管温度为90℃,载气流速为2.5 L/min,流动相:甲醇-水65∶35,柱温:40℃,流速:1 m L/min,用蒸发光散射检测器检测测定黄芪甲苷的含量。藿芪灌注液于高温60℃放置10 d,高湿度90%±5%放置10 d,经强光照射4500±500LX放置10 d,加速试验在温度40℃±2℃、相对湿度75%±5%的条件下放置6个月,长期试验在温度25℃±2℃、相对湿度60%±10%的条件下放置12个月,考察藿芪灌注液在不同条件存放后的性状、鉴别、p H、淫羊藿苷含量、黄芪甲苷含量以及无菌检查等项目的变化。结果表明,藿芪灌注液性质稳定,在不同条件存放后所有指标均未有明显变化,符合质量标准要求。     

芪板青颗粒质量控制研究

为建立芪板青颗粒中绿原酸、咖啡酸和黄芪甲苷含量测定的方法。测定绿原酸和咖啡酸采用Agilent Eclipse XDB-C18 250 mm×4.6 mm 5μm色谱柱,流动相为0.05%磷酸溶液-乙腈(92∶8,V∶V),进样量10μL,柱温30℃,流速为1.0 m L/min,在190 nm～400 nm范围进行扫描,记录327 nm色谱图;测定黄芪甲苷采用Waters symmetry C18 5μm 4.6 mm×250 mm色谱柱,进样量10μL,漂移管温度35℃,雾化器温度35℃,气流速度1.2 L/min,流动相为水-乙腈(65∶35,V∶V),柱温30℃,流速1.0 m L/min。绿原酸在3.611～72.23μg/m L范围内线性关系良好,r为0.99999,平均加样回收率97.1%;咖啡酸在3.060～61.20μg/m L范围内线性关系良好,r为0.99999,平均加样回收率96.2%;黄芪甲苷在1.0～10μg范围线性关系良好,r为0.9997,平均加样回收率为98.0%。该方法定性、定量准确,适用于芪板青颗粒含量测定。     

陇西不同类型地区蒙古黄芪甲甙含量的变化研究

按照海拔、地形和地貌条件的不同 ,各选取 666.67m2 试验样地 ,统一按照 2 0cm× 2 0cm( 2 5 .0 5万株 /hm2 )株行距设计 ,栽种同一育苗基地同龄种苗 ,统一田间管理技术进行栽培试验 ,收获期统一测定黄芪甲甙含量。研究结果表明 ,不同地区黄芪甲甙含量变化较大 ,差异高达 2 .4倍 ;山地非灌溉地区黄芪甲甙含量最低 ,次为坡地 ,川地灌溉地区最高。因此 ,陇西地区黄芪人工栽培基地应当主要选择在川地及坡地地区种植 (海拔 2 10 0m以下地区 )。     

黄芪甲苷对微血管自律性舒缩活动及大鼠心肌微血管内皮细胞NO、ET-1的影响

为探讨黄芪甲苷(Ast)对人合谷穴区皮内微血管自律性舒缩活动振幅及大鼠心肌微血管内皮细胞(RMMECs)NO、ET-1分泌量的影响,利用激光多普勒血流测定仪结合离子导入仪检测微血管自律性舒缩活动的振幅;利用ELISA方法分别检测5、10、25μg·mL^-1Ast孵育3、6、9、12 h对RMMECs分泌NO和ET-1的影响;利用Real-Time PCR检测10μg·mL^-1Ast作用RMMECs后ET-1和NO基因转录量的变化。结果显示,人合谷穴区皮下导入Ast后,微血管舒缩振幅提高。与对照组比较,低、中、高浓度的Ast均能促进RMMECs分泌NO、ET-1,以及NO/ET-1的比值升高。10μg·mL^-1 Ast与RMMECs作用3 h时,NO/ET-1值最高,NO、ET-1基因转录水平升高,与分泌水平的结果一致。25μg·mL^-1 Ast与RMMECs作用3 h时,其NO/ET-1值略低于10μg·mL^-1 Ast组,但其比率可相对稳定地维持在较高水平。结果表明,中药成分Ast能提高微血管舒缩振幅,其机制可能是通过调节RMMECs释放NO和ET-1在循环系统中的动态平衡。