响应曲面法建立超临界CO2萃取结晶穿心莲内酯工艺模型

以穿心莲内酯含量为30%的穿心莲浸膏为试验原料，采用响应曲面分析法(Response Surface Methodology，RSM)建立了超临界CO₂萃取结晶穿心莲内酯结晶率的二次多项数学模型，验证了数学模型的有效性，并探讨了萃取结晶压力、温度、时间对结晶率的作用规律。根据该模型进行了工艺参数的优选，以结晶率为指标，试验所得穿心莲内酯超临界CO₂萃取结晶优化工艺条件为：压力20.88 MPa，温度50.27℃，时间97.02 min，该条件下结晶率高达74.77%。     

穿心莲内酯衍生物对粘虫3种保护酶活力的影响

【目的】比较4种穿心莲内酯衍生物（A2、A4b、A4d、A4e）与羟基马桑毒素（Tutin）对粘虫生理代谢影响的差异,为探索新型植物源杀虫剂提供依据。【方法】粘虫3龄幼虫采用Tutin和A2、A4b、A4d、A4e经活体和离体2种方法处理后制备粗酶液,用比色法测定试虫超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和过氧化物酶（POD）3种保护酶的活力,通过酶比活力对比分析活体处理不同时间酶活力的变化及2种处理方法酶活力水平的一致性。【结果】活体试验结果表明,Tutin、A2、A4b、A4d、A4e对粘虫体内POD、CAT活力有抑制作用,而对SOD活力有促进作用;在5种化合物中,整体而言,A4b和A4e对3种保护酶的影响较大。离体测定结果表明,粘虫体内POD、CAT和SOD活力的变化趋势与活体测定结果相似。【结论】A2、A4b、A4d、A4e和Tutin通过对粘虫幼虫3种保护酶活性的干扰,削弱了其对氧自由基和H₂O₂的解毒代谢功能,表明4种穿心莲内酯衍生物可以作为新型植物源杀虫剂。采用活体与离体2种方法对粘虫比活力的测定结果一致。     

夹带剂对超临界CO2萃取结晶穿心莲内酯的影响

以穿心莲内酯粗品和高纯品(纯度分别为30%和95%)为原料，采用超临界CO₂萃取结晶法，考察了乙醇、丙酮、异丙醇与乙酸乙酯四种夹带剂对超临界CO₂萃取结晶穿心莲内酯的结晶率、纯度、晶型和形貌等的作用规律。结果：因乙酸乙酯分离纯化综合效果较好，且既能与前处理工序中选择的浸提溶剂相统一，减少采用多种溶剂存在的污染，又能保持晶体优良晶型和结晶品质，所以优先选择了乙酸乙酯为夹带剂。     

穿心莲内酯超临界CO2重结晶工艺初探

采用单因素实验法探讨超临界CO₂重结晶压力、温度、时间对穿心莲内酯的纯度和结晶率的影响，并借助扫描电镜进行晶体形貌考察，利用高效液相色谱仪进行纯度检测。结果表明，采用超临界CO₂重结晶技术得到的穿心莲内酯晶体形貌更加细小，并呈絮状分布在结晶板上；选择较佳纯化工艺参数为重结晶压力14 MPa，温度55℃，时间60 min，CO₂流量20 L/min时，得到的穿心莲内酯纯度达90%以上，结晶率超过45%。     

HPLC测定穿白痢康丸中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量

采用液相色谱法测定穿白痢康丸中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的含量.以甲醇-水（52∶48）为流动相;lnertsil@ODS-SP（250 mm×4.6 mm,5μm）为固定相;检测波长240 nm.穿心莲内酯在0.06-1.2 μg,脱水穿心莲内酯在0.04-0.80 μg范围内具有良好的线性关系;穿心莲内酯的平均加样回收率为98.6％,RSD为0.47％,脱水穿心莲内酯的平均加样回收率为99.3％,RSD为0.77％.该法简便、快速、准确可靠,可用于穿白痢康丸中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量测定.     

穿心莲内酯干混悬剂对人工感染大肠杆菌致肉鸡腹泻的药效评价

本试验旨在评价穿心莲内酯干混悬剂对大肠杆菌感染致肉鸡腹泻的治疗效果,为其临床应用提供试验依据。选取12日龄健康试验鸡300只,随机分为5个组,每组4个重复,每个重复15只。包括空白对照组、大肠杆菌ETECO101攻毒组、大肠杆菌攻毒加100和200 mg·L^-1穿心莲内酯干混悬剂及60 mg·L^-1粘菌素组。肉鸡15日龄通过腹腔注射0.2 mL含5×10⁸ cfu·mL^-1 ETECO101的生理盐水感染细菌,空白对照组腹腔注射0.2 mL生理盐水。细菌感染前3 d开始通过饮水给药,早、晚各给药1次,每次每个重复700 mL,连续给药至攻菌后第3天停止给药。每组随机选取1个重复,于攻菌后24 h和第5天分别选取6只鸡采血、剖检和取组织样,用于肝组织病理学观察、小肠微结构分析、免疫器官指数测定和血液生化指标分析。每组剩余3个重复（45只）试验至攻菌后第7天,计算存活率、粪便评分、平均日增重（ADG）和平均日采食量（ADFI）,以评价药物的药效。结果显示,相对于ETECO101组,药物含量为100和200 mg·L^-1的穿心莲内酯干混悬剂组肉鸡存活率分别提高13.3和17.8个百分点（P<0.05）,减轻大肠杆菌感染导致的腹泻,显著提高肉鸡ADG （P<0.01）和ADFI（P<0.01）;200 mg·L^-1穿心莲内酯干混悬剂组显著地增加了攻菌后24 h肉鸡脾脏和法氏囊指数（P<0.01）,降低了攻菌后第5天肉鸡血清中球蛋白（GLB）和白蛋白（ALB）含量（P<0.05）,有效地抑制肉鸡血清中丙二醛（MDA）含量的增加,提高肉鸡血清超氧化物歧化酶（SOD）活力（P<0.01）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力（P<0.01）。同时,200 mg·L^-1穿心莲内酯干混悬剂组可显著改善肉鸡空肠绒毛高度（P<0.05）,以及绒毛高度与隐窝深度的比值。综上所述,饮水中添加穿心莲内酯干混悬剂可减少大肠杆菌感染导致的鸡死亡,改善肉鸡生长性能、血清氧化应激状态和空肠肠道形态,提高法氏囊指数,对大肠杆菌感染而导致的肉鸡腹泻具有显著疗效。     

高效液相色谱法测定穿心莲注射液的含量

建立了穿心莲注射液中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量测定的高效液相色谱方法。采用watersXBridgeC18色谱柱（150mm×4．6mm,5μm）,甲醇：水（65：35）为流动相,流速为1．0mL／min．穿心莲内酯波长为225nm,脱水穿心莲内酯波长为254nm,柱温30℃。穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯均在0．01～0．2mg／mL浓度范围内线性关系良好。系统精密度分别为0．35％和0．30％．平均回收率分别为96．57％和97．98％。结果表明,该方法简单可行、重复性好,可用于穿心莲注射液中有效成分的含量测定。     

岭南黄鸡内服穿心莲超细粉后血中穿心莲内酯浓度的测定

以穿心莲内酯为指标性成分，应用RP-HPLC法，测定了岭南黄鸡内服穿心莲超细粉后血浆中穿心莲内酯的含量。结果，在测定的时间段（服药后第0～6h），穿心莲内酯在血浆中均有分布，给药后约1h达到峰值，峰浓度约为1．75μg／mL；给药后第6h的峰浓度约为0．09μg／mL。平均绝对回收率为85．24％～91．18％，定量限、检测限分别为0．04和0．02μg／mL。研究结果为建立禽类血浆中穿心莲内酯的测定方法，对动物服用穿心莲后有效成分的吸收情况进行评价提供了基础资料。     

国内外穿心莲研究态势分析

为了解穿心莲(Andrographis paniculata)的研究现状和学科发展，通过科学网(Web of Science，WoS)核心合集搜索2001—2020年发表的穿心莲SCI学术论文，结合文献计量学描述性和关联性指标，明确穿心莲近20年的科研态势。结果表明：（1）2019—2020年穿心莲的年发文量突破100篇，多数以穿心莲内酯的抑癌功能为核心展开。（2）虽然发文量最多的国家是印度、中国和马来西亚，但中国与美国和澳大利亚的合著关系最近。结合发文量、H指数与论文年均被引数，美国仅凭中国发文量1/5的产出就达到与中国持平的国际影响力，成果受到高度重视，中国穿心莲论文质量仍需提高。（3）印度科学工业研究理事会(CSIR)和新加坡国立大学是被引频次最高的穿心莲科研机构。台湾中华医科大学、中国科学院、上海中医药大学和中山医学大学是中国主要的穿心莲科研机构。（4）穿心莲发文量前3名作者均来自中国。（5）新加坡国立大学Wong W S F团队于2009年发表穿心莲至今为止影响因子最高(21.4)的学术论文，阐明穿心莲内酯缓解哮喘的分子机制。“天然抗生素”穿心莲内酯抑制新型冠状病毒蛋白活性的功能公开引起国际学者的高度重视，关于穿心莲药理药效和高产稳产等基础研究将更加深入。