miR-709靶向调控IGF1基因的表达

在动物生长调控过程中,IGF1是发挥关键作用的垂体-IGF1-靶器官生长轴上最重要的因子之一。IGF1的表达与动物出生前后的生长均密切相关。miRNAs是1类非编码单链RNA,通过碱基互补配对的方式与靶基因的3′UTR区部分或完全互补,降解靶基因的转录产物或者抑制转录产物的翻译,从而起到转录后调控靶基因表达的作用。本研究以在大鼠垂体中高表达的miR-709为研究对象,通过生物信息学分析、双荧光素酶报告系统鉴定确定IGF1为其直接靶基因,然后进一步采用qRT-PCR及Western blot技术检测miR-709对IGF1表达量的影响。结果显示,miR-709显著抑制IGF1在RNA及蛋白质水平的表达量,表明miR-709可通过直接靶向IGF1基因抑制其表达。本研究将为miR-709调控动物生长研究领域提供数据。     

5年生人工种植人参超微粉对自发性高血压大鼠的降压作用及机制研究

目的观察5年生人工种植人参超微粉对自发性高血压大鼠(SHR)的降压作用,并初步探讨其作用机制。方法将50只SHR随机分为对照组、阳性药卡托普利组及人参超微粉0.5、1.0、2.0 g/kg组,每组10只。采用尾动脉测压法测量SHR给药前及给药后30、60、90天的动脉血压,测定超声心动图及血清血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、内皮素(ET)、去甲肾上腺素(NE)、一氧化氮(NO)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)等指标,初步探讨其降压机制。结果人参超微粉0.5、1.0 g/kg于给药30、60、90天均可使SHR的平均动脉压明显降低(P0.05或P0.01),使Ang Ⅱ、ET、NE、MDA及TNF-α含量明显降低,SOD活性明显增加(P0.05或P0.01),对超声心动图、血清NO及IL-6含量无明显影响(P0.05)。结论人参超微粉长期服用可产生降压作用,其机制可能与抑制交感神经与肾素-血管紧张素系统,改善内皮功能紊乱以及抗自由基氧化损伤等作用有关。     

宽叶独行菜提取物对大鼠胃肠动力及SP和Ghrelin的影响

为研究宽叶独行菜(Lepidium latifolium L.)提取物对胃肠动力障碍大鼠的影响,并初步探讨其作用机制,选取24只SPF级SD大鼠,体重180～200 g,随机分成空白组、模型组和受试药物组,每组8只,雌雄各半,各组大鼠灌胃给予相应的药物,受试药物组每只大鼠灌胃2 mL宽叶独行菜提取物溶液(0.36 g/mL),空白组和模型组每只大鼠灌胃等体积去离子水。每天1次,连续灌胃6 d后禁食不禁水24 h,第7天正常给药1 h后,模型组和受试药物组大鼠腹腔注射硫酸阿托品2 mg/kg,空白组大鼠腹腔注射等体积的生理盐水。20 min后,所有大鼠均灌胃0.4 mL 2%蓝色葡聚糖-2000溶液,30 min后腹腔注射4 mL/kg的10%水合氯醛溶液麻醉大鼠,取材测定胃排空率和小肠推进率,ELISA法测定胃和十二指肠匀浆中P物质(SP)和饥饿素(Ghrelin)浓度。结果表明,与空白组比较,模型组大鼠胃排空率和小肠推进率极显著降低(P0.01),胃、十二指肠中SP浓度和胃中Ghrelin浓度无明显变化(P0.05),十二指肠中Ghrelin浓度极显著降低(P0.01)。与模型组比较,受试药物组大鼠胃排空率和小肠推进率均极显著升高(P0.01),胃中SP浓度显著升高(P0.05);胃中Ghrelin浓度和十二指肠中SP、Ghrelin浓度均极显著升高(P0.01)。表明宽叶独行菜提取物能改善硫酸阿托品致胃肠动力障碍大鼠的胃肠动力,提高其胃和十二指肠中SP和Ghrelin浓度可能是其发挥促胃肠动力作用的机制之一。     

马齿苋多糖对断奶大鼠肠道菌群影响的研究

本研究旨在探究马齿苋多糖(POP)对断奶大鼠肠道菌群结构变化的影响。30只断奶SD大鼠[(21±1)日龄]随机分为3组,每组10只。试验动物均饲喂相同的基础饲粮,POP低剂量组(LD组)和POP高剂量组(HD组)分别补充100和200 mg/kg BW剂量的POP (溶于2mL生理盐水),对照组(Con组)补充2 mL生理盐水,每日1次,连续28 d。试验结束后,对大鼠粪便菌群16S rRNA的V3～V4区进行扩增后,Illumina MiSeq高通量测序和QIIME分析α多样性和β多样性,RDP和NCBI-16S数据库进行物种注释。结果表明:3组共有4 725个相同的操作分类单位(OTUs),Con组有140个特征OTUs,LD组有367个特征OTUs,HD组有174个特征OTUs。各组动物肠道菌群有相似的α多样性,组间β多样性有显著差异(P0.05)。与Con组相比,HD组的双歧杆菌属、LD组的乳酸杆菌目相对丰度显著增加(P0.05)。Con组大鼠的未分类紫单胞菌属、阿洛-普雷沃氏菌属为优势菌群,且核苷酸代谢、维生素代谢、碳水化合物的生物合成与代谢和脂质代谢能力减弱。综上所述,POP可改变断奶大鼠肠道菌群的结构,扶植益生菌如乳酸杆菌目、双歧杆菌属的定植及影响机体代谢功能,是一种潜在的幼龄动物膳食添加剂。     

双氢睾酮诱导大鼠心肌细胞肥大模型的建立

应用胰蛋白酶分次消化法分离乳鼠心肌细胞,以差速贴壁法纯化心肌细胞,α-sarconme-actin抗体免疫细胞化学染色鉴定心肌细胞。心肌细胞在无血清无酚红培养基中培养48h后,用双氢睾酮(DHT)诱导心肌细胞肥大,建立心肌细胞肥大模型。24h后检测心肌细胞肥大的指标心肌细胞表面积;BCA法测定心肌细胞蛋白含量;半定量RTPCR两步法检测心肌细胞肥大的特征性基因—心房利钠因子(atrial natriuretic factor,ANF,β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy chain,β-MHC)mRNA的表达。结果显示免疫细胞化学染色显示培养的心肌细胞纯度达到90%以上,心肌细胞分离良好。与对照组相比,10-8 mol/L的DHT能显著的增加心肌细胞表面积、蛋白质含量、ANP和β-MHC基因表达的增加(P0.01),心肌细胞肥大模型建立成功。     

Effects of Intragastric Lycopene on Oxidative Stress of Blood after Exercise SD Rats

The experiment was conducted to study the effects of intragastric lycopene on oxidative stress blood after exercise SD rats.Thirty two SD rats with similar weight(233.40 g±6.21 g) and good health for SPF were randomized into one control groups and three trial groups with 8 rats per group.The control group was gastric fed with edible oil,the trial Ⅰ,Ⅱ and Ⅲ groups were gastric fed with edible oil intragastric with 10,20,40 mg/(kg·BW) lycopene,respectively.The pre-experiment period lasted for 10 d,and the experiment period lasted for 42 d.Swimming train six days a week and train six weeks,then that blood were collection for determination of oxidative stress after swimming train 11 hours SD rats.The results showed that lycopene concentration of plasma was increased at first and decreased subsequently,after 4 h lycopene concentration of plasma in SD rat was peak.With the increase of intragastric lycopene doses,glutathione peroxidase,total antioxidant enzyme activity and total antioxidant capacity of plasma showed a trend of rising; malondialdehyde content of plasma showed a trend of decrease with the increase of supplemental lycopene dose after exercise SD rats.Therefore,the antioxidant capacity of blood after exercise SD rats and doses of intragastric lycopene were dose dependent,antioxidant capacity of blood after exercise SD rats showed a trend of rise with the increase of lycopene dose.     

SD大鼠Krt71基因序列的分子克隆

参考大鼠Krt71基因序列,用PCR方法对SD大鼠Krt71基因DNA和cDNA序列进行克隆,获得SD大鼠Krt71基因的8 206bp的DNA序列(GenBank登录号:KF311105)和1 575bp的cDNA序列(GenBank登录号:KF303589),编码524个氨基酸。SD大鼠与国外报道的BN大鼠、小家鼠、家猫、家绵羊、家牛、苏门答腊猩猩和人等7个物种的Krt71基因cDNA序列的同源性分别为99.9%,95.2%,88.5%,87.5%,88.0%,88.1%,88.1%;其编码蛋白的氨基酸序列同源性分别为100.0%,98.9%,92.5%,91.5%,91.3%,91.5%,92.1%。这一结果表明Krt71基因在进化过程中具有较高的保守性,但不同物种之间也具有功能上的特异性。通过比较SD大鼠Krt71基因与GenBank数据库中发布的Krt71基因的序列,本试验发现了6个SNP位点,这些位点位于该基因的内含子序列,没有改变氨基酸的性质,这一研究结果为Krt71基因的SNPs数据库提供了新的内容。