PCV2通过NF-κB/NLRP3信号通路调控体外培养PAMs分泌IL-1β

为探讨猪圆环病毒2型（porcine circovirus 2,PCV2）诱导猪肺泡巨噬细胞（porcine alveolar macrophages,PAMs）产生白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）的分子机制,试验选取2头PCV2和PRRSV抗原、抗体均为阴性的6周龄普通仔猪,无菌分离PAMs,以体外培养的PAMs为研究对象,采用ELISA方法检测PAMs培养上清液中IL-1β的生成,采用实时荧光定量PCR方法检测PAMs中NLRP3和凋亡相关点样蛋白（apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC）的mRNA表达水平,分别用小干扰RNA（siRNA）方法和核因子-kappa B（NF-κB）抑制试验分析NLRP3和NF-κB对PCV2诱导PAMs产生IL-1β的调控作用。结果显示,PCV2感染PAMs后能够显著或极显著增加IL-1β、NLRP3（1 h除外）和ASC（1、3 h除外）的生成（P<0.05;P<0.01）。siRNA能使58.3%的NLRP3基因沉默,且NLRP3沉默后PCV2诱导PAMs产生IL-1β的水平显著下降（P<0.05）。NF-κB被抑制后PCV2诱导PAMs产生IL-1β的水平也明显下降。结果表明,PCV2通过NF-κB/NLRP3信号通路调控体外培养PAMs分泌IL-1β。