醋柴胡多糖VBCP-3的结构和抗炎作用研究

分离纯化醋柴胡多糖,分析其结构并探讨其对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症反应的影响。用水提醇沉法提取醋柴胡粗多糖;Sevage法脱蛋白,再通过DEAE-Sepharose fast flow柱层析纯化得到醋柴胡精多糖,紫外扫描法和高效凝胶渗透色谱法测定精多糖的纯度及分子量,红外光谱法确定糖链上的官能团类型,GC-MS法测定单糖组成,MTT法测定精多糖对巨噬细胞RAW264.7存活率的影响,Griess试剂法测定精多糖对LPS诱导小鼠巨噬细胞的NO分泌量的影响。由此得到醋柴胡精多糖VBCP-3,VBCP-3为吡喃糖,不含蛋白质和核酸,分子质量为436.221 ku,其单糖组成为鼠李糖∶阿拉伯糖∶半乳糖∶葡萄糖=1.3∶24.9∶3.2∶1.00。VBCP-3对巨噬细胞RAW264.7无显著毒性。与模型组比较,VBCP-3能显著抑制NO的释放量(P0.01)。醋柴胡多糖VBCP-3是一种单糖组成丰富的杂多糖,具有一定的抗炎活性。     

母猪乳房炎的病因、临床特征与防治措施

母猪生长过程当中时常遭受一些疾病困扰,尤其是乳房炎发生比较频繁,是母猪养殖过程当中常见的一种疾病类型,该病的发生主要是多种致病因素影响母猪乳腺而导致的一种炎性疾病。尤其是处于哺乳阶段的母猪发病较多,有些母猪品种背腰凹软、腹部拖地,导致乳头容易和地面接触,形成擦伤,继而引发感染而导致乳房炎的发生,母猪发生乳房炎之后泌乳量明显下降,同时拒绝哺乳,更甚者出现无乳情况,致使全窝仔猪难以正常发育,生长不良,甚至发生死亡。同时如果母猪乳房炎得不到及时科学合理的治疗,伴随病情的不断加重,极易导致脓毒血症发生,而引发母猪死亡,给猪养殖户带来巨大的经济损失,严重阻碍猪养殖业的健康发展,所以为了控制和减少母猪乳房炎的发生。必须要充分重视母猪乳房炎的防治工作。下文当中结合实践主要对引发母猪乳房炎的病因进行分析阐述,探讨母猪乳房炎临床特征,并提出有效的防治措施,希望能为生猪养殖户提供一些参考借鉴。     

“金花散茶”及“金花菌粉”对被动吸烟小鼠肺组织JAK2/STAT3炎性及磷酸化蛋白表达的影响

为探究“金花散茶”及其“金花菌粉”对被动吸烟(Cigarette smoking environment,CSE)小鼠肺组织受损的预防及修复机制,建立C57BL/6小鼠CSE模型,以600 mg∙kg^-1剂量的金花散茶茶汤(Eurotium cristatum tea extract,ECTE)及金花菌粉浸提液(Eurotium cristatum powder extract,ECPE)进行灌喂处理。与CSE模型组相比,小鼠灌喂ECPE和ECTE后,肺组织病理学切片显示其可保护小鼠肺组织形态结构完整;酶联免疫分析显示,灌喂ECPE和ECTE可显著抑制小鼠血清IL-6、IL-8、IL-1β、IFN-γ和TNF-α表达量上调;Western blot结果表明,灌喂ECPE和ECTE对小鼠肺组织p-JAK2、p-STAT3、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3高表达起到抑制作用。以上研究结果表明,灌喂ECPE、ECTE对CSE肺受损小鼠具有明显保护作用,总体趋势为ECPE组优于ECTE组、预防组优于治疗组。     

广西某奶牛场乳房炎病原菌的流行调查

【目的】探索奶牛乳房炎的流行情况,分析病原菌的分布、变化及其规律,进一步阐明其引发病因,为本病的防治提供参考。【方法】通过临床诊断、加州乳房炎测试法(CMT)、革兰氏染色、菌液PCR、基因测序等方法,对某奶牛场奶牛乳房炎的发病率、及病原菌种类况以药物治疗情进行分析。【结果】临床型奶牛乳房炎的年平均发病率为8.3%,其隐性乳房炎乳占总乳区的40%。奶牛场长期使用头孢噻呋钠,林可霉素,庆大霉素,青霉素,链霉素等抗生素进行治疗,治疗效果不明显。乳房炎中分离得到的假丝酵母菌和毕赤酵母菌分别占真菌中的73.1%和25%,其中热带念珠菌占38.5%;大肠杆菌和链球菌分别占细菌中的22.7%和9.1%。【结论】该奶牛场的奶牛乳房炎的年发病率及隐性乳房炎乳较高,真菌比细菌感染率要显著,这可能与长期使用抗生素治疗、气候和牛场环境等因素密切有关。     

奶牛乳汁外泌体中乳房炎抗性相关microRNA的筛选与功能分析

奶牛乳汁外泌体中的microRNA(miRNA)在乳腺癌、炎症和其他乳腺疾病发生时起着关键的调控作用,为了解及分析乳汁外泌体中可能存在的参与奶牛乳房炎抗性的miRNA,以健康牛及乳房炎奶牛乳腺组织差异表达miRNA为背景,结合目前已知的奶牛乳汁外泌体miRNA,利用Targetscan、miRDB、miRanda、Vesiclepedia、DAVID等生物信息学分析系统及数据库系统,筛选奶牛乳汁外泌体中可能参与奶牛乳房炎抗性的miRNA,并对其序列保守性、候选靶基因及靶基因参与的调控功能通路等进行预测与分析。结果表明,健康奶牛与乳房炎奶牛乳腺组织中存在显著表达差异的miRNA 29个;Vesiclepedia数据库和NCBI检索文献共获得奶牛乳汁外泌体中的miRNA 66个,其中miR-223、miR-125b、miR-378b在两数据中共存,并在人与奶牛及其他哺乳动物之间高度保守。候选靶基因的KEGG功能通路分析显示,MAPK,p53、PI3K-Akt及miRNA的癌症作用、内质网蛋白加工、溶酶体和细胞凋亡等通路均被显著富集。表明外泌体中存在的3个miRNA对奶牛乳房炎发生时的炎症反应及免疫应答均可起重要调控作用,但其具体分子机制仍有待进一步验证。研究结果可为奶牛乳房炎分子辅助选择标记的筛选以及跨物种机体免疫调控的影响因素及作用机制研究提供参考。     

蜂胶对细菌脂多糖刺激下奶牛乳腺上皮细胞炎症相关基因mRNA转录水平和紧密连接蛋白的影响

本试验旨在研究中国蜂胶乙醇提取物（ethanol extract of Chinese propolis，EECP）对细菌脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激下体外培养奶牛乳腺上皮细胞炎症相关基因mRNA转录水平和紧密连接渗透性的影响。EECP中总酚酸和总黄酮含量测定采用福林酚法和硝酸铝法，并建立LPS诱导奶牛乳腺上皮细胞（bovine mammary epithelial cells，MAC-T）炎症模型，采用CCK-8法测定EECP对MAC-T相对增殖率的影响，利用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）评估EECP对LPS诱导的MAC-T细胞炎症相关因子（IL-6、IL-8、TNF-α和IL-1β）相对mRNA转录水平；以及对紧密连接蛋白（occludin、ZO-1）相对mRNA转录水平进行检测，并进一步利用免疫荧光技术对紧密连接膜蛋白进行定位，确定EECP对LPS诱导MAC-T细胞炎症紧密连接渗透性的影响。结果显示：EECP中总酚酸含量为106.35 mg没食子酸当量（GAE）·g^-1、总黄酮含量为320.85 mg芦丁当量（RE）·g^-1；CCK-8结果显示EECP的安全浓度为0~15 μg·mL^-1，并可有效提高LPS刺激下MAC-T的活力；LPS刺激显著增加了细胞炎症相关因子IL-6、IL-8、TNF-α和IL-1β mRNA的转录量（P<0.001）；但2.5~15.0 μg·mL^-1 EECP预处理显著降低了IL-6、IL-8、TNF-α和IL-1β mRNA的转录量；与此类似，LPS刺激显著抑制了紧密连接蛋白基因（occludin、ZO-1）mRNA的转录量（P<0.01），而EECP预处理后紧密连接蛋白基因（occludin和ZO-1）mRNA的转录量显著增加（P<0.05）；免疫荧光染色试验也证实EECP能通过上调紧密连接蛋白（occludin、ZO-1）的表达，缓解LPS诱导的乳腺上皮细胞屏障功能紊乱。该结果证实，EECP对细菌脂多糖诱导奶牛乳腺上皮细胞炎症具有良好的保护作用，这为利用中国蜂胶预防奶牛乳腺炎提供了试验基础。     

奶牛乳房炎的研究

受到环境因素、病原体感染、奶牛自身防御能力等因素的影响,奶牛乳房炎的发病几率大幅增加,患有乳房炎的奶牛不但影响牛奶的品质、降低产奶量,严重的还会导致奶牛丧失生产能力,给广大奶牛养殖户造成巨大的经济损失.目前,针对奶牛乳房炎的预防与治疗已经成为全世界关注的重点课题.     

头孢洛宁乳房注入剂对奶牛干乳期乳房炎的防治效果

选择山东省潍坊市某奶牛场临近干乳期的80头奶牛,选取受试药物头孢洛宁乳房注入剂(干乳期)和对照药物利福昔明乳房注入剂(干乳期)进行奶牛干乳期乳房炎预防与治疗的研究。试验奶牛乳区感染率为37.50%(120/320),优势病原菌为金黄色葡萄球菌和链球菌(无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌),以单纯感染为主。Ⅰ(高剂量)、Ⅱ(中剂量)、Ⅲ(低剂量)试验组和对照组乳区细菌学治愈率分别为89.74%、87.23%、73.53%和85.29%,相互间差异不显著(P0.05)。试验组和对照组新感染乳区数分别只有1、2、4、2个。综合判定,每个乳区注入250 mg头孢洛宁乳房注入剂(干乳期)能够较好防治干乳期乳房炎。     

霍山石斛多糖的半仿生提取工艺优化与抗炎活性评价

[目的]优化霍山石斛多糖的半仿生提取工艺,并评价所提多糖的抗炎活性。[方法]以多糖得率为指标,采用单因素试验和正交试验方法对提取工艺进行优化,以LPS诱导的RAW264.7细胞为体外炎症模型,评价多糖的抗炎活性。[结果]半仿生提取法最佳工艺条件为:料液比1∶30、提取温度80℃、模拟胃液提取时间1.5 h、模拟肠液提取时间2.5 h,在此条件下多糖的得率为(60.9±1.2)mg/g,较传统水提法的多糖得率提高16.55%。细胞试验表明,霍山石斛多糖能抑制RAW264.7细胞NO及IL-1β的分泌,降低i NOS和IL-1βm RNA的表达。[结论]优化后的提取工艺合理可行,提取率高,所提多糖的抗炎活性优于传统方法制备的多糖。