国家节能中心加快推进竹缠绕复合材料的推广应用

2021年1月25日,国家节能中心召开竹缠绕产业发展研讨会。国家节能中心节能管理处有关同志与水利部、水利部科技推广中心及中国能源研究会能效与投资评估专业委员会相关专家进行了交流,就如何加快推进竹缠绕复合材料的推广应用,促进产业健康发展等进行了讨论。与会专家认为,要加快构建竹缠绕产业链,助力减少碳排放,实现碳中和,为全球绿色发展赋能。     

云南省牛流行性出血病血清学调查

为了解牛流行性出血病(epidemic hemorrhagic disease,EHD)在云南省的流行和分布情况,采用竞争ELISA方法,2019年对11个县市的1 199份牛血清进行流行性出血病病毒(epidemic hemorrhagic disease virus,EHDV)抗体检测,同时从各县市检测出的阳性血清中,随机选取18～50份通过微量血清中和试验进行血清型鉴定。结果显示:云南省11个县市均检测出EHDV抗体阳性样品,阳性率介于49.3%～91.3%,平均为81.8%;各地普遍存在3个及以上血清型,其中EHDV-7、-10、-6、-5血清型检出率较高,EHDV-8、-2血清型检出率较低,未检出EHDV-1型。结果表明,EHD在云南省流行广泛且较严重,流行血清型复杂。结果提示,需持续开展EHDV血清学监测,重视对该病的防控。此次血清学调查为我国西南地区EHD防控提供了数据参考。     

血清抗体监测在猪疫病防控中的应用

血清抗体检测是一种能帮助控制动物疫情的有力工具,现如今这种检测方法已经被大面积推广。本文主要分析了在猪疫病的防控中,血清抗体检测技术的合理应用以及具体分析。     

牛病毒性腹泻病毒E2蛋白纳米抗体筛选及反应原性检测

通过噬菌体展示技术筛选牛病毒性腹泻病毒(BVDV)重组E2蛋白特异性纳米抗体,验证纳米抗体反应原性。使用BVDV灭活疫苗免疫羊驼,分别在第0、21、49及70天采集全血,测得抗体效价后分离全血中淋巴细胞,提取总RNA,反转录后PCR扩增目的片段。目的片段和pCANTAB5E使用限制性内切酶酶切连接后转至TG1感受态细胞中,应用噬菌体展示技术构建VHH噬菌体展示文库。再经过3轮"吸附-洗脱-筛选"后得到与BVDV-E2结合的噬菌体,用ELISA鉴定其反应性。结果获得插入率为90.8%,库容为1.02×107 CFU/mL的文库。ELISA结果和序列分析显示,得到2条与E2蛋白具有良好反应性的纳米抗体且与VHH同源性较高的序列。研究结果为BVDV的防控和新型疫苗的研制奠定基础。     

疫苗免疫及抗体注射预防雏鹅小鹅瘟效果比较

为更好地控制小鹅瘟的发生,探究疫苗免疫及抗体注射对雏鹅小鹅瘟的预防效果。将200只1日龄试验鹅随机分成4组,其中A组为疫苗组,B组为卵黄抗体+疫苗组,C组为卵黄抗体组,D组为对照组。对试验鹅分别于1日龄、7日龄进行注射,并在首免后第7、14、21及28天检测小鹅瘟抗体。结果显示:在第7天,B组和C组的免疫抗体平均效价均高于A组;在第14天,B组抗体平均效价出现明显下降,均低于A组和C组。在第21～28天,A组和B组均保持较高的抗体水平,而C组抗体效价下降较快。结果提示,在没有母源抗体保护的情况下,对于雏鹅小鹅瘟多发高发的地区和场群,建议1日龄、7日龄均注射卵黄抗体加以预防;对于雏鹅发病日龄明显增加,超过20日龄仍有发病的地区和场群,建议1日龄、7日龄均免疫小鹅瘟疫苗加以防控。     

猪源唾液酸黏附素受体的表达及其纳米抗体筛选

为制备特异性结合猪源Sn受体的纳米抗体分子，采用人工合成猪肺泡巨噬细胞Sn受体胞外区(Sn4D)基因序列，将其克隆至pET-30a载体中，并在大肠杆菌中诱导表达Sn4D蛋白；经Ni柱纯化的Sn4D蛋白作为靶标分子，在T7噬菌体展示的纳米抗体文库中进行3轮亲和筛选；然后从筛选产物中挑选单抗克隆噬菌体进行亲和力、特异性鉴定。结果显示，成功构建了pET-30a-Sn4D重组表达载体，并诱导表达出约50 ku的目标蛋白，Western-blot显示该蛋白具有良好的反应活性；经过3轮亲和筛选，投入产出比逐渐升高，并从筛选产物中鉴定出6株特异性结合Sn4D的纳米抗体分子。该纳米抗体分子的获得为今后进一步开展抗病毒活性的研究奠定了良好基础。     

拟南芥乙烯应答基因HLS1的原核表达及多克隆抗体制备

【目的】制备乙烯应答基因HLS1多克隆抗体,在过表达植物中检测HLS1的积累,为深入研究HLS1响应乙烯信号通路的分子机制奠定基础。【方法】构建pET28a-HLS1c原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导获得重组蛋白HLS1c-His;镍柱亲和纯化重组蛋白后免疫家兔获得抗HLS1血清,利用抗原亲和纯化抗血清获得高纯度的HLS1多克隆抗体;用HLS1抗体和GFP抗体,检测原生质体瞬时转化体系中GFP-HLS1c融合蛋白的表达;用农杆菌蘸花法获得过表达GFP-HLS1g的转基因植物,用HLS1抗体和GFP抗体检测GFP-HLS1g融合蛋白的表达。【结果】成功构建了原核表达载体pET28a-HLS1c,并在大肠杆菌系统中诱导获得重组蛋白HLS1c-His,且多以包涵体形式存在。纯化的HLS1c-His多克隆抗体,能清晰检测到约80 ng原核表达的HLS1抗原。纯化的HLS1抗体不仅能检测到原生质体中瞬时表达的GFP-HLS1c融合蛋白,也能检测到过表达转基因植物株系中的GFP-HLS1g融合蛋白,并且与标签蛋白GFP对应抗体所检测到的特异性条带大小一致。【结论】成功制备了拟南芥HLS1蛋白多克隆抗体,为HLS1蛋白在植物发育中的功能研究奠定了基础。     

抗体检测技术在基层畜牧业生产中的指导作用

本文主要根据作者自身工作经验,从抗体检测技术原理,基层常用的抗原抗体反应实验,以及抗体检测技术在指导畜牧业生产中的重要作用等方面进行阐述,说明了抗体检测技术在制定免疫程序、疾病诊断、疫苗评估及免疫效果评价等领域发挥着积极的作用。