猪肝和猪尿中沙丁胺醇和克伦特罗残留的酶联免疫吸附检测法研究

采用混合酸酐法将沙丁胺醇与牛血清白蛋白偶联，并免疫家兔制备抗沙丁胺醇抗血清。以间接ELISA法测定血清效价，测得抗血清最佳工作浓度为1：6400，该抗沙丁胺醇抗血清对克伦特罗有110％的交叉反应性。建立了能够同时检测SAL和CL的间接竞争ELISA方法，该方法对沙丁胺醇的检测范围为0．48ng／mL～8．0μg／mL，对克伦特罗的检测范围为0．43ng／mL～7．3μg／mL，对沙丁胺醇的检测灵敏度为o．48ng／mL，对克伦特罗的检测灵敏度为0．43ng／mL。在猪肝和猪尿中添加1～50ng／g(ng／mL)的沙丁胺醇，添加回收率为72．2％～84．8％，变异系数为4．2％～28．3％，在猪肝脏和猪尿中添加1～50ng／g(ng／mL)的克伦特罗，添加回收率为84．3％～103．4％，变异系数为O．3％～35．5％。  

用酶联免疫吸附试验筛检出口猪尿样中β促效剂

采用英国进口的β促效剂ＥＬＩＳＡ试剂盒对４２４个（次）出口猪场进行猪尿样β促效剂检查，结果查出阳性场１７个（次），检测尿样１３０４份，其中含量在５ｎｇ／ｍｌ以上的阳性尿样２９份，阳性率为２．２％，在对阳性场采取停止出口和经常性监测等综合措施后，有效地揭了出口猪场中非法使用β促效剂类药物的现象。该试剂盒使用方便，出结果快，重复性好，检测谱广。调查和检测发现，凡尿中含量高于５ｎｇ／ｍｌ的都与曾服用β促  

化学发光免疫分析法检测猪尿中莱克多巴胺残留

本试验运用化学发光免疫分析法（chemiluminescence immunoassay，CLIA）检测猪尿中莱克多巴胺（Ractopamine，RAC）的残留。检测限为0.01 ng/mL，检测范围为0.036～32.2 ng/mL。添加浓度分别为0.1、1、10 ng/mL，平均回收率为73.2%，批内平均变异系数为9.7%，批间平均变异系数为11.3%。而本研究所建立的化学发光免疫检测方法(CLISA)可以达到检测RAC残留的要求。  

高效液相色谱-串联质谱法检测猪尿中四种β-受体激动剂残留的研究

建立了猪尿中克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和西马特罗残留检测的高效液相色谱-串联质谱方法(HPLC-MS/MS).液相色谱条件为色谱柱为XBridge C18柱(150 mm×2.1 mm,5 μm);流动相为0.1%甲酸甲醇溶液 0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱;柱温为30 ℃;流速为0.2 mL/min;进样量为20 μL.质谱条件为电喷雾离子源(ESI ),多反应监测(MRM)方式进行采集;同位素内标法定量.结果表明,四种β-受体激动剂在1～50 ng/mL浓度范围内呈现良好的线性关系,相关指数R2均大于0.998;方法检测限为0.3 ng/mL,定量限为0.5 ng/mL;从0.5、1和2 ng/mL 3个添加浓度检测结果可以看出,方法平均回收率为86.6%～110%,批内RSD为1.1%～8.4%,批间RSD为2.0%～6.2%.  

猪尿中克伦特罗检测方法--酶联免疫吸附测定法

农业部于2001年11月1日发布农牧发[2001]38号文，发布10种动物源食品中兽药残留检测方法。方法之十：猪尿中克伦特罗检测方法——酶联免疫吸附测定法。全文如下：猪尿中克伦特罗检测方法——酶联免疫吸附测定法1范围本标准规定了猪尿中克伦特罗检验的制样和酶联免疫吸附测定方法。本标准适用于猪尿中克伦特罗的残留常规快速筛选检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是…  

酶联免疫吸附法检测猪尿中的莱克多巴胺

莱克多巴胺（Ractopamine，RAC）属于β2-兴奋剂的一种，它作为饲料添加剂使用，能显著促进动物生长，增加饲料转化率和瘦肉率，已经被美国及其他一些国家批准作为猪的饲料添加剂。但包括RAC在内的β2-兴奋剂在我国及欧盟都被禁止在食品动物的饲养过程中使用。  

超高效液相色谱-串联质谱法检测猪尿中20种β-受体激动剂残留

建立了猪尿中吡布特罗、西马特罗、特步他林等20种β-受体激动剂残留检测的超高效液相色谱一串联质谱方法。猪尿样品经酶解后，调节pH值至碱性，用叔丁醇和叔丁基甲醚（6＋4，V／V）萃取，MCX柱净化，以0．1％甲酸乙腈溶液和0．1％甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱。同位素内标法和外标法定量。20种β-受体激动剂在系列浓度范围内呈现良好线性关系，相关系数1．2均大于0．99；20种药物在猪尿中的检测限为0．25μg/L，定量限为0．5μg／L。从0．5、1和5μg／L三个添加浓度检测结果可以看出，20种药物的回收率为75．7％～110．7％，批内批间相对杯准偏差均小于20％。该方法具有简便快捷、灵敏度高、定性准确等特点。  

应用酶联免疫吸附法(ELISA)结合胶体金试纸法快速筛选猪尿中的盐酸克伦特罗残留

猪尿中盐酸克伦特罗（Clenbuterol．简称CL）的残留检测，目前的检测方法．主要有高效液相色谱法（HPLC）．气相色谱-质谱法（GC/MS）．毛细管区带电泳法（CE）和酶联免疫吸附法（ELISA）等。其中GC／MS法是农业部规定的动物组织中CL确证检测方法（NY/T468-2001）．ELISA法是农业部规定的猪尿中CL筛选检测方法。GC/MS法具有灵敏、准确、特异的优点，但存在仪器贵重、操作烦琐、费用昂贵、耗费时间等问题．限制其在基层日常工作中的应用。  

固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法快速测定猪尿中的赛庚啶

建立了猪尿中赛庚啶的固相萃取-超高效液相色谱串联质谱的测定方法。猪尿样品经酸化,混合型阳离子交换固相柱萃取后,以超高效液相色谱串联质谱测定,外标法定量。本方法的测定线性范围为0.2～5.0μg/L,在0.2、0.4、2.0μg/L低、中、高三个浓度的回收率为80%～120%,批内、批间精密度小于20%。本方法简便、快速、灵敏,经实际样品分析,适用于猪尿中赛庚啶的定量测定和确证。  

气相色谱－质谱法测定猪尿中地西泮

建立了猪尿中地西泮的气相色谱-质谱（GC／MS）检测方法。样品经C18固相萃取柱净化后进行气相色谱-质谱测定。结果表明，方法定量限为0．5μg/L，线性范围为10～500μg/L。在三个添加浓度2、4、6μg/L水平上，地西泮的平均回收率为70％～120％，批内相对标准偏差〈20％、批间相对标准偏差〈12％。