禽流感(H5、H9亚型)二价油乳剂灭活疫苗试验研究

本品系用A型禽流感病毒A／Ostrich／Denmark／72420／96(LPAI-H5N2)株及A／Chicken／Shanghai／1／98(H9N2)株分别接种易感鸡胚、收获感染胚液、超滤浓缩后经甲醛溶液灭活，加油佐剂混合乳化制成的油乳剂灭活疫苗。疫苗用4周龄SPF鸡作安全试验，每只鸡肌肉注射2ml，结果表明试验鸡均无全身症状和局部病变，证明疫苗安全性良好。取疫苗一羽份免疫4周龄SPF鸡作效力检验，免疫鸡全部获得保护，对照鸡全部感染或死亡。经不同免疫剂量测定，证明一羽份疫苗中至少含有8个免疫剂量。免疫干扰试验证明两种抗原具有免疫协同作用。  

鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、禽流感四联浓缩油乳剂灭活疫苗的研制

利用PALL滤器分别对鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征和禽流感4种病毒进行10倍浓缩,然后按照一定比例将抗原浓缩液与油佐剂配比,制备了四联油乳剂灭活疫苗。通过了实验室检查,田间试验表明:开产前种鸡免疫后第4周,新城疫和禽流感的HI抗体滴度在10.2log2以上、传染性支气管炎和减蛋综合征均大于9.5log2,且抗体高峰维持时间长;SPF鸡免疫后4周进行攻毒保护试验,结果免疫攻毒组保护率100%,对照组攻毒发病率100%。试验结果表明:采用抗原浓缩技术制备的四联苗抗体水平高,维持时间长,能够有效地保护鸡群。  

鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、传染性脑脊髓炎四联灭活疫苗IB部分效力试验研究

采用《进口兽药质量标准》中传染性支气管炎灭活疫苗效力检验方法，对ND-IB-EDS76-AE四联灭活疫苗IB部分进行了效力检验。先用IBH120活疫苗作基础免疫，免疫后3～4周采血，然后用四联苗加强免疫，四联苗免疫后3～4周采血，将二次血清分别作IBHI试验。结果显示，IBH120活疫苗免后3～4周，其IBHI效价为3．6～4．610g2（1：12—1：24），用四联苗加强免疫3～4周后，IBHI达6．2—8．610g2（1：74～1：388），四联苗免后的IBm抗体滴度比免前提高了4．9～26倍，均大于3倍的标准。试验证明，该方法用于四联苗内IB部分效力检验是可行的。  

冢兔兔瘟HI抗体水平对猪瘟括疫苗效力检验结果的影响

按照《兽用生物制品规程》方法，应用具有不同兔瘟HI抗体水平的家兔进行猪瘟活疫苗的效力检验：实验结果表明，家兔的兔瘟HI抗体水平对其接种猪瘟活疫苗后诱发的体温反应无干扰作用。  

重大禽病浓缩疫苗的研制

利用PALL滤器将灭活后的新城疫、禽流感、传染性支气管炎、产蛋下降综合征等病毒分别进行10倍浓缩，经检验合格后，分别按照一定比例将抗原浓缩液与灭菌的医用白油配比，经胶体磨制备成三联或四联油乳剂灭活疫苗，均通过了实验室的各项指标检测。经过在隔离器进行实验室安全和效力检验，以及田间试验证明，该疫苗安全有效，抗体水平高，维持时间长，能够保护鸡群抵抗新城疫、禽流感、传染性支气管炎等强毒的攻击。  

豚鼠试验前PPV HI抗体的检测

猪细小病毒（PPV）是引起母猪繁殖障碍的主要病因之一，疫苗的免疫是有效的预防措施，但PPV疫苗效力检验需要PPVHI抗体阴性猪，不仅实验成本很高，而且PPVHI抗体阴性猪不容易找，豚鼠对PPV很敏感，已被证实可以作为猪细小病毒病疫苗效力检验的实验动物。近期本公司购买了2批豚鼠，准备用于相关试验，但试验前的豚鼠血清检测，PPVHI抗体均为阳性，不能用于PPV的实验。现将试验结果报告如下。  

鸡新城疫和传染性法氏囊病二联灭活疫苗的制备及检验

采用NDV La Sota株毒种接种鸡胚制备NDV抗原液,IBDV BJQ902细胞适应毒接种鸡胚成纤维细胞制备IBDV抗原液,用甲醛溶液灭活后,按一定比例混合,加入油佐剂乳化制成ND-IBD二联灭活疫苗。共制备了3批疫苗,对其进行各项检验。结果表明,疫苗无菌;外观为乳白色均匀乳剂,剂型为W/O/W型,黏度为1.0 s~1.2 s,粒度均匀,99%以上为1μm,个别为2μm~3μm,3 500 r/min离心15 min,管底出水在0.5 mm以下;疫苗安全性检验,接种24日龄~28日龄SPF鸡后,观察14 d,均无任何局部及全身不良反应;疫苗ND部分效检,免疫接种3周后ND HI抗体平均滴度为3.0~3.6 log2,攻毒后保护率分别为9/10、9/10和10/10,IBD部分效检免疫接种后4周,中和抗体滴度分别20 171、24 578及26 616,攻毒保护率均为100%(10/10)。结果证实3批疫苗均符合要求。  

猪链球菌2型疫苗效力检验的动物模型研究进展

猪链球菌病是一种重要的人兽共患病,近年该病在亚洲重新暴发。CpG寡脱氧核苷酸等佐剂以及逆向疫苗学方法、标签式突变法等一系列方法的相继出现,有利于猪链球菌特别是猪链球菌2型疫苗的研究,但因缺乏理想的动物模型来评价疫苗效力,给该病的防治增加了难度。2007年-2010年,针对猪链球菌2型对小鼠、斑马鱼、猪等模型动物的致病性,以及这些动物易感性等方面做了大量研究。论文对近年来与猪链球菌2型疫苗效力检验动物模型有关的研究进行了综述。  

通过膜分离法纯化猪瘟疫苗的效果分析

目前,用于预防畜禽传染病的疫苗都是没有纯化的。疫苗中含有大量的制苗材料来源的蛋白质及抗生素,无疑是接种动物的各种不良反应的过敏原,严重干扰疫苗蛋白抗原的免疫应答,大大减少中和抗体的产生,导致一些畜禽个体免疫失败[1]。本试验采用膜分离技术对猪瘟病毒的纯化浓缩,显著提高了免疫效果。  

我国猪瘟疫苗效力检验的替代方法研究与应用进展

我国兽药典中现行的猪瘟疫苗效力检验方法存在试验成本较高、周期较长、操作较繁琐、重复性较差、敏感性较低等缺点,随着分子生物学与免疫学技术的日臻发展与应用,猪瘟疫苗效力检验的新兴替代检验方法不断发展和完善.论文就我国近年来针对猪瘟疫苗毒种、半成品、成品效力检验的新兴分子生物学和免疫学检测方法的研究与应用进展做一简要综述,旨在为提升我国猪瘟疫苗效力检验水平提供合理的科学依据.