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1.
直接ELISA检测沙门氏菌方法的建立及其应用研究   总被引:34,自引:0,他引:34  
从已获得的4株沙门氏菌属特异杂交瘤单克隆抗体中,筛选出CB8和De7两株单抗相合成酶标检测试剂,并建立了检测沙门氏菌的直接ELISA方法,它能检出沙门氏菌属99%的菌株,而不与其他肠道杆菌反应(包括大肠杆菌,阴沟杆菌,产气杆菌,志贺氏菌,枸椽酸杆菌,克雷伯氏菌,变形杆菌和沙雷氏菌)。应用本方法检测粪样,鱼粉,奶样,其敏感性和特异性分别高达100%和97.6%,仅出现2.4%的假阳性率,该法不受各要  相似文献
2.
以禽流感题H5和H9亚型病毒分别免疫Balh/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0的骨髓瘤细胞融合,用血凝抑制试验(HI)检测细胞培养上清,结果获得了6株特异性单克隆抗体,其中抗禽流感题亚型病毒血凝素特异性单克隆抗体细胞株3株,分别命名为4B6、4A3、3H1;抗H9亚型病毒血凝素单克隆抗体细胞株3株,命名为6E6、6B6和5B4。这些单克隆抗体小鼠腹水HI效价为2^13-15,细胞培养上清抗体HI效价为2^7-8。研究结果表明,所有这些单克隆抗体仅与试验的相应题或ID亚型病毒株发生特异性反应,而不能与鸡新城疫病毒、鹅新城疫病毒、鹅腺病毒和鸡产蛋下降综禽征病毒(EDS76)等反应。实验室检测结果证明,应用这些单克隆抗体能在24h内迅速检测出相应的禽流感病毒。所有这些单克隆抗体将在禽流感的预警预报工作中发挥重要作用。  相似文献
3.
磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的研制   总被引:20,自引:2,他引:18  
本研究将磺胺二甲嘧啶与人血清白蛋白、卵清白蛋白联接 ,分别作为免疫原、包被原 ,建立 EL ISA筛选方法 ,并利用杂交瘤技术 ,制备了分泌抗磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的细胞株。经鉴定的单克隆抗体的蛋白亚型为 Ig G1 ;染色体数为 88~94条 ;分子量为 170 .2 KDa;亲和常数为 2 .5× 10 1 0 M- 1 ;与其他 6种磺胺药 (SDM、SDEP、SMM、SMZ、SD、SQ)无交叉反应  相似文献
4.
间接荧光抗体法快速诊断海兰褐蛋鸡J亚群禽白血病的研究   总被引:19,自引:2,他引:17  
某地区海兰褐蛋鸡发生肿瘤性传染病,经临床症状和病理学检查,在肝、脾、肾、卵巢、输卵管、肺、骨髓、腺胃、肠道等可见胞浆内充满球形嗜酸性颗粒的骨髓瘤细胞,呈灶状或弥漫性的分布。该变化是禽骨髓细胞瘤病病理学的特征性变化,具有证病意义。经用特异性抗J亚群白血病病毒囊膜蛋白gp85的单克隆抗体的免疫组化方法,在病料组织切片上检出病毒抗原,从而确诊为蛋鸡J亚群禽白血病。本研究是尝试用间接荧光抗体法来快速诊断该病。采用特异性抗J亚群禽白血病病毒囊膜蛋白gp85单克隆对组织触片作间接荧光抗体试验,检测J亚群禽白血病病毒抗原。在骨髓、食管、肌肉、输卵管、肾都出现了范围广而且很明亮的荧光;肝、肺、脾的荥光较为明亮;心脏的荧光较弱,但清晰可见。表明在病料组织中存在特异性病毒抗原。  相似文献
5.
用ALV-J gp85单克隆抗体证明蛋鸡存在J亚群禽白血病   总被引:19,自引:1,他引:18  
采用免疫组化法,对病理学初步诊断为蛋用型鸡J亚群白血病的自然发病鸡的肿瘤、骨髓、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、心脏、胰脏、输卵管、卵巢、腺胃、骨骼肌、大脑、坐骨神经,用特异性抗J亚群禽白血病病毒(ALV—J)囊膜糖蛋白gp85的单克隆抗体进行检测,待检的组织切片中均检出阳性抗原,免疫组化的研究结果与病理学诊断结果相一致。在国内外首次发现并报道蛋用型鸡J亚群禽白血病的自然病例。  相似文献
6.
抗禽流感病毒H5亚型血凝素特异性单克隆抗体的研制   总被引:18,自引:0,他引:18  
以禽流感H5亚型病毒免疫Ballb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用血凝抑制试验检测细胞培养上清,结果获得3株阳性细胞株,分别命名为4B6、4A3、3H1。经2次亚克隆后,100%杂交瘤细胞保持了分泌抗禽流感病毒H5亚型抗体的能力。实验证明,所有这3株单克隆抗体仅与试验的H5病毒株反应,而不能与禽流感H9亚型病毒、鸡新城疫病毒、鹅新城疫病毒和鹅腺病毒等反应。间接免疫荧光试验检测结果表明这3株单克隆细胞的培养上清均能与感染H5亚型病毒的成纤维细胞呈现亮绿色荧光。  相似文献
7.
新城疫单抗ELISA试剂盒的研制及其初步应用   总被引:18,自引:3,他引:15  
8.
盐酸克伦特罗单抗快速检测试剂盒的研制   总被引:16,自引:0,他引:16  
以竞争性酶免疫分析原理为基础 ,应用特异性克伦特罗 (Clenbuterol,CL )单克隆抗体研制成功了β-肾上腺素受体激动剂克伦特罗的快速检测 EL ISA试剂盒 (CL- Kit)。 CL- Kit线性检测范围为 0 .5~ 12 8μg/ L,各标准品的吸光值变异系数为 2 .3%~ 3.6 %。标准曲线呈典型的 S型 ,相关系数 R2 =0 .996 ,符合 4参数 L ogit曲线拟合。检测结果表明 :CL 单抗对 CL 的半数抑制量 IC50 为 7.94 μg/ L,对沙丁胺醇 (Sb)的 IC50 为 10 0 0 μg/ L,肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素和来克多巴胺的 IC50 均≥ 6 4 0 0 μg/ L;CL- Kit与 Sb的交叉反应性为 0 .79% ,与异丙肾上腺素的交叉反应性为 0 .12 % ,与肾上腺素、去甲肾上腺素、来克多巴胺、各类抗生素及多种维生素均无交叉反应性。试剂盒测定回收率在 91%~ 10 5 % ,批内变异系数小于 2 0 % ,批间变异系数小于 10 %。试剂盒在保存期内稳定  相似文献
9.
抗氯霉素单克隆抗体的制备及鉴定   总被引:16,自引:3,他引:13  
用人工合成的氯霉素-人血清白蛋白(CAP-HSA)作抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术建立了1株分泌抗CAP单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞1F9.经检测,其分泌的抗体亚类为IgG1,杂交瘤染色体数目84~96条,间接ELISA检测细胞培养上清效价为1256,诱生小鼠腹水的抗体效价可达16×105.该细胞连续培养生物学性状稳定,竞争间接酶联免疫吸附试验(ciELISA)显示,其与供试抗生素交叉反应小,表明该单抗具有较大的应用价值.  相似文献
10.
猪瘟单克隆抗体诊断试剂的研究   总被引:16,自引:0,他引:16  
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