2株PEDV贵州分离株M基因的克隆及相似性分析

为了解贵州省猪流行性腹泻病毒(PEDV)分离株M基因的变异及分子进化情况,试验采用RT-PCR扩增、目的基因克隆与测序及生物信息学软件对贵州省分离的PEDV-GZAS株和PEDVGZHZ株M基因进行序列分析。结果表明:经RT-PCR扩增,得到的片段大小为695 bp;测序结果证实,贵州分离株M基因核苷酸序列大小为695 bp;贵州分离株PEDV-GZAS株与PEDV-GZHZ株之间同源性为84.2%;PEDV-GZHZ株与瑞士疫苗株(AF353511)之间的同源性为97.7%,与中国贵州(KF150217)、泰国(FJ158546)和美国(KF272920)分离株同源性最高为99.4%;贵州分离株PEDVGZAS株与瑞士疫苗株(AF353511)之间的同源性为97.5%,与中国贵州(KF150217)、泰国(FJ158546)和美国(KF272920)分离株同源性最高为99.3%;此次分离的2株分离株都与中国河南(EU287429)分离株同源性最低为83.1%。PEDV贵州分离株PEDV-GZAS株M基因与泰国(FJ158546)分离株遗传进化关系最近,与中国河北(JF508465)分离株亲缘关系较近;PEDV-GZHZ株与PEDV-GZAS株及参考毒株之间遗传进化关系较远。     

预防猪流行性腹泻返饲技术的研究进展

猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起以腹泻为主要临床症状的高接触性肠道传染病。该病以发病速度快、高传染性、高发病率和高死亡率为主要流行特征,全世界很多国家都有流行,中国、东南亚国家、日本、韩国、美国、墨西哥、加拿大流行特别严重。虽有商品性的流行性腹泻灭活疫苗或弱毒疫苗,但由于疫苗质量、流行毒株变异快、受免疫程序影响等诸多因素导致PED防控效果并不理想,严重影响了养猪行业的发展。目前,PED暴发后,猪场普遍采取对母猪人工返饲进行应急处理,用发病仔猪的病料(病原体)返饲母猪,仔猪可以通过哺乳获得母源性抗体,返饲成功案例国内外多有报导,效果明显;但是我国大多数的猪场技术人员对于人工返饲技术不掌握,难以实现科学、安全的返饲防控。文内就PED的母猪返饲技术原理、人工母猪返饲操作及返饲的利弊进行综述,为探索仔猪PED的有效防控措施提供参考。     

贵州省某牛场牛病毒性腹泻-黏膜病的诊治

正2017年1月上旬,贵州省某牛场发现6~7月龄小牛口鼻有大量黏液流出,四肢无力,水样腹泻,呈酱油色,发病后曾用青霉素、安乃近、双黄连及磺胺类等药物进行治疗,但未见好转。于是送检小牛(200 kg左右)1头到贵州大学生物技术中心实验室进行确诊。根据发病牛的临床症状、病理剖检和实验室诊断结果,确诊发病小牛为牛病毒性腹泻-黏膜病病毒感染。现将诊治情况报道如下。     

猪伪狂犬病病毒贵州部分流行株的gE基因变异

为了解近年来贵州省猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)流行株的分子流行特征和遗传变异情况,收集了贵州不同地区的4株PRV分离株,即Guizhou-DY株、GZ-Z1株、GZ-TH株和GZ-TD株,对其gE基因进行遗传变异分析。结果显示:Guizhou-DY株和GZ-Z1株与2012年以前国内外的传统分离株的核苷酸和氨基酸同源性较高,分别为98.3%~99.4%及96.7%~98.4%,而近期分离的GZ-TD株和GZ-TH株与2012年以来国内不同省份分离的PRV变异株的核苷酸及氨基酸序列的同源性较高,分别为98.7%~99.9%及98.1%~99.5%。Guizhou-DY株和GZZ1株的gE氨基酸第48位和第496位均没有天冬氨酸(D)的插入,但近期分离的GZ-TD株和GZ-TH株的gE氨基酸第48位和第496位均有D的插入,与2012年以来发现的PRV新毒株氨基酸变异位点相同。Guizhou-DY株和GZ-Z1株与传统PRV分离毒株的亲缘关系较近,而GZ-TD株和GZ-TH株与2012年之后的PRV变异毒株的亲缘关系较近。结果表明:猪伪狂犬病病毒贵州流行毒株的gE基因存在一定程度的变异。     

猪瘟分子生物学检测技术的研究进展

猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,给养猪业造成了严重的经济损失,严重制约着我国养猪产业的发展。文章主要针对猪瘟病毒的反转录-聚合酶链式反应技术、反转录巢式PCR技术、多重反转录-聚合酶链式反应技术、反转录实时荧光定量PCR技术及环介导等温核酸扩增技术等5种分子生物学检测技术的国内外最新研究进展进行综述,以期提高对猪瘟病毒早期感染和隐性带毒猪的检出率,淘汰野毒感染猪群,为猪瘟的净化和防控提供重要诊断参考依据。     

猪圆环病毒病2型诊断技术的研究进展

猪圆环病毒(PCV)是迄今为止发现的一种最小的脊椎动物病毒,可引起断奶仔猪进行性消瘦、淋巴组织等组织病变的一种多系统衰竭综合征的重要传染病,临床上主要与断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎肾病综合征(PDNS)、仔猪先天性震颤(CT)、坏死性间质性肺炎(PNP)及母猪繁殖障碍等疾病有关。根据病毒致病性的差异,以及核苷酸序列和抗原性的不同,将猪圆环病毒分成无致病性的猪圆环病毒1型(PCV1)和具有致病性的猪圆环病毒2型(PCV2)。本文从病原学诊断、血清学诊断和分子生物学诊断等方面综述了当前国内外PCV2常用的实验室诊断方法的研究进展,可为临床上猪圆环病毒病的确诊提供参考。     

猪伪狂犬病毒感染病例的荧光定量PCR检测

毕节某猪场出现妊娠母猪流产、产死胎及部分仔猪发病的情况,为确诊病原,对流产胎儿的组织进行了实验室检测。流产胎儿的组织经猪伪狂犬病毒野毒株实时荧光PCR检测,结果显示,胎儿组织为猪伪狂犬病毒(PRV)阳性;根据临床症状及伪狂犬病毒野毒株实时荧光PCR检测确诊该猪场存在猪伪狂犬病毒野毒感染。     

猪传染性胃肠炎诊断技术的研究进展

猪传染性胃肠炎(TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起猪只的一种高度接触性胃肠道传染病,临床症状主要表现为腹泻、呕吐和脱水,该病为影响养猪业健康发展的重要疫病之一,世界动物卫生组织将其列为法定报告的B类动物疫病。近年来,国内外许多研究者在对猪传染性胃肠炎的诊断与检测方法上进行了大量的研究,并建立了相关的实验室诊断检测技术,这些检测技术主要包括病理诊断、病毒的分离鉴定、电镜检测、血清学诊断和分子生物学诊断方法等。本文对猪传染性胃肠炎主要的诊断技术进行了综述,以期为该病在临床的快速诊断及防控提供参考。     

浅谈毕节市羊只蜱虫的防治

毕节地区是贵州省的畜牧大区,生态畜牧业是农业板块中的亮点,但至今还未见对毕节市羊蜱虫的防治技术尚未见报道。为此,笔者参阅有关文献,对毕节市羊蜱虫防治进行了归纳,为毕节市蜱虫综合防治奠定理论基础。     

贵州省某规模化羊场羊只支原体感染的诊治

贵州省某羊场所饲养羊只于2016年7月下旬发病,发病羊临床症状为精神沉郁、采食减少、不愿走动,并且出现了死亡。通过临床典型症状观察、病理剖检和支原体PCR检测,最后确诊发病羊为支原体感染,给出了防治建议,采取措施后病情得到了缓解。