高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-PCR检测方法的建立

根据GenBank上猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株的核苷酸序列与古典美洲株的核苷酸序列,设计一对高致病性PRRSV特异性引物,结合快速的RNA抽提试剂和一步法RT-PCR,建立高致病性PRRSV快速RT-PCR检测体系。通过测序和同类试剂盒检测效果比对,证实该体系检测结果准确,体系特异性和灵敏度试验结果显示,该体系对猪瘟病毒、普通PRRSV、禽流感病毒无扩增产物,至少能检测经10万倍稀释后的临床阳性样品。该方法可直接对可疑组织样品进行检测,操作简单、快速、价廉、受环境因素污染概率小,适合临床样品的检测。     

牛链球菌Ⅱ型的分离与鉴定

牛链球菌属D组链球菌,常被错误鉴定为肠球菌或唾液链球菌(Str.Salivarius).该菌常引起人脑膜炎、心内膜炎和败血症[1-2].目前,我国对该细菌的分离研究多见于人医领域.2006年和2007年,在湖南省醴陵、安化、辰溪等地的牛场中发生一种高热、流涎、呼吸困难等症状的传染性疾病,约20%发病,共死亡19头牛.笔者从3例病死牛内脏组织中分离出3株细菌形态、培养特性一致的革兰阳性球菌株,其生化鉴定结果表明,3株分离菌均为牛链球菌Ⅱ型亚型1菌.     

湖南省猪瘟流行情况分析

1材料与方法1.1病料来源病料来自全省各集约化猪场及农村专业养殖户送检的病死猪,以无菌采取脾、肝、淋巴、肺及血清,-20℃冰箱保存备用。1.2流行病学等情况调查按设计好的表格登记,对各发病猪场和养殖户进行详细调查、询问,对病死猪的临床症状、剖检变化仔细观察。1.3检验试剂     

应用聚乙二醇介导的单抗夹心ELISA监测湖南新城疫病毒强毒感染

采用新城疫病毒强毒快速检测法聚乙二醇介导的单抗夹心酶联免疫吸附测定（ELISA）对湖南省新城疫病毒（NDV）强毒感染进行了监测，共检测来自30个新城疫发病群和28个无明显新城疫病症群共58个禽群的泄殖腔棉试样品1719份，并对97份样口进行了病毒分离鉴定。结果表明，NDV强毒感染的禽种多，易与其他疫病混合感染，免疫鸡群在发生形式上呈非典型化趋势，养禽场普遍存在NDV强毒且临诊健康群有一定比例的强毒感染率，这些是目前ND难以控制和净化的主要原因。结果还表明，所采用的ELISA是监测NDV强毒感染并指导免疫的可靠的快速检测方法。     

2019年湖南省规模牛场4种疫病血清学调查

为了解湖南省规模牛场牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎、牛结核病、牛副结核病4种疫病的流行状况,采用ELISA方法,对全省未免疫以上4种疫病的规模牛场开展了血清学调查。结果显示：湖南省规模牛场的牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎、牛结核病、牛副结核病的场阳性率分别为51.35%、74.32%、13.64%、22.73%,个体阳性率分别为23.54%、45.45%、3.11%、4.67%。全省14个市州规模牛场均检出牛病毒性腹泻与牛传染性鼻气管炎病原抗体阳性,4个市州检出牛分枝杆菌抗体阳性,7个市州检出副结核分枝杆菌抗体阳性;不同规模牛场4种疫病的抗体阳性率存在一定差异,大规模场偏高;多重感染占比为45.45%。结果表明：牛病毒性腹泻和牛传染性鼻气管炎在湖南省规模牛场流行较为普遍、严重,部分地区还存在牛结核病、牛副结核病流行,而在大规模牛场4种疫病流行更为严重,各规模牛场4种疫病病原的多重感染情况也较为普遍。因此,湖南省规模牛场4种疫病防控形势严峻,需加强防控。本调查为湖南省此类疫病防控提供了数据参考。     

湖南省非洲猪瘟检测实验室能力建设现状调查

为了解湖南省非洲猪瘟检测实验室能力水平,采用问卷调查、能力比对、现场调查等方式,对实验室类型、数量、仪器设备、人员配置、检测能力比对、运行情况、生物安全措施等开展全面调查。问卷及现场调查显示:湖南省具备非洲猪瘟检测能力实验室179个,其中系统内兽医实验室仅37个,检测力量薄弱,难以满足当前非洲猪瘟防控需要;屠宰企业实验室120个,但实验室条件简陋、人员配置不合理,检测结果难以有效保障;实验室仪器设备与检测试剂来源多样,缺少统一判定标准,结果准确率低;实验室质量管理体系及生物安全管理体系不完善,监管不规范。能力比对显示:参与完成能力比对的实验室150个,检测结果全部符合的实验室78个,实验室检测质量堪忧;屠宰企业实验室存在大量假阴性结果,疫病传播风险大。这提示湖南省虽拥有一批非洲猪瘟检测实验室,但整体检测水平不高,检测能力和实验室生物安全水平亟待加强。     

2017年湖南省部分猪场临床病例分析

为了解湖南省当前猪病的总体流行情况,对2017年湖南省13个市州72个规模化猪场和15个散养户送检的87例临床病例,进行了实验室诊断和流行病学分析。结果显示：该省猪群疫病多以散发形式出现,以高热、腹泻和呼吸道症状多见,气温偏低或偏高季节发病率较高,保育猪发病率高于其他生产阶段猪群,尤其是存栏量小的猪群;共检出11种病原,其中猪圆环病毒2型（PCV2）和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HPPRRSV）检出率最高,且多以混合感染形式存在。结果表明,湖南省猪群中病毒感染较为广泛,PCV2和HPPRRSV是主要感染病原,在气温偏低和高温季节,要特别注意加强猪病防控。     

规模猪场母猪繁殖障碍综合征的病因调查

作者采用9套试剂盒，检测了7种能引起猪繁殖障碍综合征的传染病，对来自有繁殖障碍症状的305场次进行猪瘟(HC)抗原检测，并对包括这305场次在内的978个猪场(次)病例的6346份血清样品及52698份田间血清样品进行HC、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、伪狂犬病(PR)、日本乙型脑炎(JE)、细小病毒感染(DPV)、猪衣原体病(Chla)、布鲁氏菌病(Bruc)等7种传染病的抗体检测。结果表明，在有繁殖障碍症状的猪场，HC抗原检出率高达61．97％，并且在不使用疫苗的情况下，PR3RS、PR、JE、Chla和PPV的抗体阳性场分别为49．42％、34．29％、12．72％、31．71％、和48．08％。HC和：PR交叉感染率达23．81％；HC和：PRRS交叉感染率为9．52％，PR和PRRS交叉感染率高达59．65％；另外JE、PPV也同HC、PR、PRRS存在部分交叉感染。不使用疫苗的田间血清样品的PRRS、PR的抗体阳性率也高。HC与PRRS．PR、Chla、JE和PPV中的一种或几种混合感染可能是引起繁殖障碍造成严重损失的主要原因。加强综合防制，优化免疫程序、把握引种关、加强生物安全措施是防制猪繁殖障碍综合征的关键。     

猪场猪传染性萎缩性鼻炎净化技术——病原分离及其特性研究

从临床上有明显咳嗽、流涕、鼻染和鼻甲骨变形的２０～６０日龄仔猪的鼻拭子分离到１２株细菌,经形态观察、培养特性、生化试验和动物感染试验,证明分离菌为支气管败血波氏杆菌（Ｂｒｏｄｅｔｅｌｌａ ｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐｔｉｃａ）。该菌周身鞭毛、能运动,为革兰氏阴性小杆菌;在鲜血琼脂平板上产生β－溶血,在马铃薯浸液培养基上生长良好：形成黄棕色略带绿色的菌落,在改民丁琼脂上形成表面光滑、隆起、针尖魇菌落 ;不利