一株小反刍兽疫病毒的分离鉴定与生长曲线测定

将含高滴度小反刍兽疫病毒的新鲜病料研磨后接种VERO DS细胞系进行病毒分离,出现细胞病变后连续传代,取3代以上培养物,进行RT-PCR和间接免疫荧光试验及生长曲线测定。生长曲线测定分别以0.01和0.1 MOI接种VERO DS细胞,每隔12h测定病毒滴度,连续培养168h,绘制病毒生长曲线,分析生长特性。结果显示,病料接种细胞72h后,出现细胞病变,经RT-PCR和间接免疫荧光试验鉴定为小反刍兽疫病毒?;生长特性研究显示,0.01和0.1 MOI两种病毒接种量,病毒滴度最高均为106 TCID50左右,但峰值出现时间和下降速度存在差异,0.01 MOI接种量出现峰值晚,但是维持高滴度时间较长。本文成功分离一株小反刍兽疫病毒,并对两种接毒量的生长特性差异进行了初步分析,为探索该病毒培养方法和收毒时间提供了借鉴。     

我国小反刍兽疫疫情现状与防控策略

小反刍兽疫作为重要的跨境动物疫病之一,已经传入我国并广泛流行。对我国养羊业、民生和经济发展造成沉重的打击。为有效防控该病,从小反刍兽疫的病原学、宿主范围,传播特点、传播因素和综合防控的策略等方面进行了概述,重点从制度保障和防控要素方面进行分析,旨在为我国小反刍兽疫的防控提供理论支持。     

白皮大蒜中大蒜素的提取

大蒜素是由蒜氨酸在内源蒜酶的催化作用下反应生成的,具有多种重要生理功能。以白皮大蒜为原料,采用有机溶剂提取法提取白皮大蒜中的大蒜素并且采用分光光度法测定大蒜提取液中的大蒜素含量,通过单因素试验分别分析了乙醇体积分数、提取温度、提取时间以及料液比对白皮大蒜中大蒜素提取率的影响。结果表明,最佳提取条件为乙醇的体积分数60%、提取温度50℃、提取时间2 h、料液比为1∶4(g/m L)。在上述的最优条件下大蒜素的提取率可达0.62 mg/g。该结论可以为大蒜素工业化生产提供一定的根据。     

饲料中动物源性成分的检测技术研究进展

痒病和牛海绵状脑病（疯牛病）都属于传染性海绵状脑病，其病原是蛋白质侵染颗粒——朊毒体（Prion）。痒病是羊的一种比较古老的疾病，而疯牛病是最早在英国出现的一种新病，1987年Weels等正式报道，然后迅速传播到欧洲多个国家和地区，给英国和欧洲的养牛业造成了巨大损失，并影响到相关产业。     

方秆蕨中多糖含量的测定

[目的]确定方秆蕨多糖的最佳提取工艺,测定方秆蕨中的多糖含量。[方法]采用水提醇沉法提取方秆蕨多糖,研究料液比、提取时间、提取温度对多糖提取率的影响。采用苯酚-硫酸法,以葡萄糖为标准品,蒸馏水为空白对照,于490 nm波长处分别测定对照品和供试品溶液的吸光度,按标准曲线计算方秆蕨中的多糖含量。[结果]方秆蕨多糖的最佳提取条件为料液比1∶40(g/ml)、温度80℃、时间2.5 h。[结论]方秆蕨多糖的含量为2.5%。     

普洱生茶和熟茶茶多酚的提取及抗氧化活性研究

[目的]为普洱生茶和熟茶中茶多酚的开发利用提供理论依据。[方法]采用有机溶剂萃取法、离子沉淀法和吸附分离法分别从普洱生茶和熟茶中提取茶多酚,测定提取物对2,2-二苯代苦味酰基自由基(DPPH.)的清除作用。[结果]普洱生茶的茶多酚提取率都高于熟茶,普洱生茶茶多酚对DPPH.的清除率高于熟茶。[结论]普洱生茶的抗氧化活性高于熟茶。     

非洲猪瘟病原学及单克隆抗体制备技术研究进展

非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起猪的高度接触性、传染性、出血性以及高死亡率的传染病。20世纪中期以来,已在非洲、欧洲和美洲等数十个国家流行,并在近几年内蔓延至欧亚两洲接壤处的格鲁吉亚、亚美尼亚、阿塞拜疆以及俄罗斯境内,其一旦侵入我国,将会给我国养猪业带来极大的危害。非洲猪瘟病原学研究以及制备相应的单克隆抗体对非洲猪瘟病毒快速诊断技术研究和疫苗研制有着重大的现实意义。主要从病原学和单克隆抗体制备方面对非洲猪瘟的研究进展进行了综述。     

心水病病原体高度保守基因合成与原核表达

通过软件DNAStar分析,设计合成心水病病原体抗原性、保守性比较高的一段基因,长度为564bp,将它插入pUC57载体,再转入pET-32a质粒中进行原核表达并纯化表达产物。结果表明,合成的基因在大肠杆菌中得到高效表达并能简易地提纯,纯化的表达产物有望用于心水病免疫学检测;此合成外来基因还可以作为心水病病原PCR检测的阳性对照。这些工作为我国建立心水病防控技术储备奠定了一些基础,也为防控高度危险性外来传染病提供一种安全和可行的研究新思路。     

单抗介导牛海绵状脑病免疫组化检测方法的建立及其应用

 中国鲁西黄牛重组PrPc成熟蛋白免疫PrPc基因敲除小鼠，利用淋巴细胞杂交瘤技术，经免疫组织化学试验筛选出单抗4C11可特异识别牛海绵状脑病标准阳性牛脑样品上PrPSc核心片段。以单抗4C11为核心试剂，建立了单抗介导牛海绵状脑病免疫组织化学检测方法，并已颁布成为中华人民共和国国家标准GB/T19180-2003（牛海绵状脑病诊断技术）。已应用于中国牛海绵状脑病的持续监测，至2002年底共检测了全国各地3344份牛脑样品，结果全为阴性，且每批次所设的阳性对照样品检测结果均呈阳性，与Roche公司单抗6H4检测结果的符合率为100％。     

海洋微生物溶菌酶的抑菌作用及抑菌机理初步研究

以一些革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌和真菌对海洋微生物溶菌酶的敏感性进行研究。结果表明，海洋微生物溶菌酶对受试菌株均有不同程度的抑制或杀灭作用，尤其对临床分离的致病菌及养殖致病菌效果显著。海洋微生物溶菌酶对试验菌株的生长繁殖和代谢均有影响，抑制作用主要发生在指数期初期。通过透射电镜观察发现，海洋微生物溶菌酶对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的作用效果不同，推测其作用机理与二者细胞壁结构不同有关。