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[目的]克隆大鼠卵巢特异性启动子(OSP-1)片段,并在细胞水平检测该启动子调控标记基因的组织特异性表达。[方法]参考已知大鼠OSP-1序列设计特异性引物,PcR扩增大鼠OSP-1启动子片段并与已公布的大鼠OSP—1序列进行比较。将OSP-1启动子定向克隆到去除CMV的pEGFP—N1载体,构建真核表达载体pOSP—1—EGFP.N1;重组质粒在脂质体LipofectamineTM2000介导下,分别转染水牛的颗粒细胞、乳腺上皮细胞和胎儿成纤维细胞,并于转染后12,24和48h在荧光显微镜下观察EGFP表达情况。【结果lOSP—l启动子扩增片段长480bp,与已公布的大鼠OSP-1序列的相似性达96%;应用启动子预测软件对所得序列分析表明,该扩增片段含有类似于TA—TAbox和CAATbox的核心启动顺式元件,并含有多个C/EBPbeta转录因子的结合位点;在颗粒细胞转染后12h可观测到绿色荧光表达,转染后24h荧光细胞增多,细胞形态均呈圆形、体积较大,48h荧光细胞数量骤减,且死细胞增多;在乳腺上皮细胞和胎儿成纤维细胞均未检测到EGFP基因表达。[结论]大鼠OSP-1启动子控制下的EGFP基因可在水牛颗粒细胞中特异表达,为构建水牛卵巢特并性表达转基因载体奠定了基础。 相似文献
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采用淋巴细胞杂交瘤技术,研制出的抗衣原体单克隆抗体(McAb),应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,对本地区所采的1361份牛血清,698份羊血清进行检测,结果:牛血清阳性检出率为9.18%,羊为22.06%。选择牛羊血清各50份用已建立的检测衣原体抗体ELISA方法与传统的间接血凝试验(IHA)进行比较,其敏感性高。牛血清ELISA阳性检出率为32%,IHA为24%,ELISA比IHA试验高出8个百分点。羊血清ELISA阳性检出率为26%,IHA为22%,前者比IHA高出4个百分点。 相似文献
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近几年业 ,宁夏银川郊区、平罗、吴忠等地的羊群羔羊发生一种以急性纤维素性肺炎为主要特征的疾病 ,经诊断为羔羊肺炎链球菌感染 ,现报告如下。1 流行病学调查宁夏银川郊区、平罗、吴忠等地三羊场共养母羊 31 5只 ,2 0 0 1年产羔 2 6 0只左右 ,由于各种原因死亡 6 9只 ,其中 2 9只死前均表现典型肺炎症状及纤维素性肺炎病变 ,占死亡羔羊总数的 4 2 %。发病羔羊均为 7~ 50日龄 ,其中以 1 0~ 30日龄羔羊最多 ,成年羊不发病。发病羔羊多数体质瘦弱 ,母羊多为小尾寒羊 ,产多胎 ,母乳不充足。羔羊发病死亡多集中在产羔中、后期 ,此时气温回升 … 相似文献
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鹿肠毒血症是由魏氏梭菌引起的一种急性肠毒血症。该病是由于魏氏梭菌在肠道内大量繁殖,产生毒素所引起的。魏氏梭菌根据毒素———抗毒素中和试验分为A、B、C、D、E五型。每型产生一种主要毒素,一种或数种次要毒素。肠毒血症是由D型魏氏梭菌引起的一种疾病。1流行情况宁夏中卫某鹿场原有32只麻鹿和梅花鹿。2001年6月,从外地某鹿场调入45只麻鹿和梅花鹿,8月中旬,又从该鹿场调入79只两种鹿,使该鹿场鹿数达156只。从6月份鹿场调入鹿后不久,鹿群中不同年龄的鹿相继发病。最急性无任何症状突然发病,多在4~5h后倒毙,病程稍长的表现精神沉郁,… 相似文献