体外耐氟喹诺酮类鸡毒霉形体gyrA基因的突变特征分析

按常规方法提取了鸡毒霉形体参考株S6-10、疫苗株F14-8及在氟喹诺酮类药物压力下筛选出来的耐药株的基因组DNA，扩增了各菌株DNA旋转酶gyrA基因片段，并进行了克隆、测序，利用DNAsis软件对测序结果进行分析。结果表明，S6-10和F14-8在恩诺沙星或环丙沙星压力下均筛选出不同程度的耐药茵，而且恩诺沙星致鸡毒霉形体发生耐药性突变的几率高于环丙沙星，S6-10株耐药突变频率高于F14-8；S6-10筛选出来的耐药菌株发生突变的位置在DNA旋转酶GyrA亚基的第83位(相对于大肠埃希氏茵GyrA亚基中的位置，以下同)和第87位上，取代模式分别为Ser→Ile、Glu→Gln，另外1株高水平耐药株(Se10，MIC≥128)在第103位也发生了氨基酸取代(Ile→Val)；F14-8筛选出来的耐药菌株只在DNA旋转酶GyrA亚基的第87位发生了突变(Glu→Gly／Gln)。     

大肠杆菌K_(88ac)与LT(A~-B~ )抗原基因质粒在猪霍乱沙门氏菌弱毒株中的表达

应用细菌质粒转化技术,将大肠杆菌K_(?)与LT(A~-B~ )抗原基因重组质粒转入猪霍乱沙门氏菌弱毒菌苗株中.对获得的其中8个转化子进行鉴定的结果表明,转化的细菌仍保持沙门氏菌的形态、生化及抗原特性,同时可稳定地表达K(?)和LT-B两种抗原.用微量间接血凝试验、抗甘露糖豚鼠红细胞凝集试验(MRHA)、ELISA等对转化菌表达的K(?)抗原进行了测定,用间接免疫溶血试验对其表达的LT-B抗原进行了测定.结果,这两种抗原在转化的细菌中均可高效表达.电镜下观察,转化的细菌在其表面形成菌毛样结构.这种转化细菌表现出猪霍乱沙门氏菌与产肠毒素性大肠杆菌的两种抗原特性,为这种双价工程菌苗的研制提供了有价值的候选菌株.本研究结果还表明,猪霍乱沙门氏菌弱毒菌苗株可作为基因转化的有效受体菌.     

强毒小肠结肠耶氏菌生物素标记基因探针的研究

在构建的小肠结肠耶氏菌毒性质粒DNA基因文库pYB1～8与pYP1～6的基础上,筛选出了pYB7和pYP6克隆株.用限制性内切酶Bam HI消化pYB7,Pst消化pYP6,可分离出3.8kb和6.4kb的插入性DNA片段.以这两个基因片段为目的基因,用生物素化dUTP和光敏生物素标记,获得了生物素标记的基因探针.该探针能检出10pg以上的强毒小肠结肠耶氏菌DNA,不与无毒小肠结肠耶氏菌及大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等18种对照菌反应,具有高度的特异性和敏感性.pYB7与pYP6探针对不同血清型及来源的小肠结肠耶氏菌检测,其结果与自凝性试验、依钙试验等结果相符;对小肠结肠耶氏菌强毒株与无毒株检定的准确率为100%.     

马的嗜肺军团杆菌实验感染

作者试图用嗜肺军团杆菌感染马,以测定其病原性和评价马作为本菌的带菌者的作用。以前的研究表明,马群中普遍存在抗嗜肺军团杆菌抗体,在检查过的600份血清中,存在此抗体者超过30％。通过静脉注射和气溶胶接种法给马实验感染嗜肺军团杆菌philadelphja 1株     

麝鼠多发性脓肿及其病原分离

1982～1983年在长春地区养殖的麝鼠中,流行一种呈慢性多发性脓肿的疾病。经细菌学检查,确认是由肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)所引起;药敏试验结果,该菌对氯霉素最敏感,其次是痢特灵、卡那霉素、庆大霉素和金霉素等。     

大肠杆菌耐药基因定位及耐药质粒消除

对采集的9株野生型大肠杆菌在药敏试验的基础上,进行了耐药基因定位。结果表明,4个菌株的氨苄青霉素耐药基因位于质粒上,不同畜群来源菌株之间耐氨苄青霉素质粒存在差异。用中草药艾叶的乙醇提取物和蒸馏提取物对大肠杆菌庆大霉素耐药性及耐药质粒进行了消除试验,结果艾叶乙醇提取物的消除率最高可达69.4%。     

骨髓瘤细胞(NS—1株)培养液对红细胞免疫粘附的影响

许多研究表明,恶性肿瘤患者红细胞免疫功能下降,其主要原因可能是红细胞免疫粘附作用受到抑制;并且已有研究证实,肿瘤患者血清及癌细胞培养液均对红细胞免疫粘附具有抑制作用.为进一步探讨恶性肿瘤引起红细胞免疫功能下降的原因,我们就小鼠骨髓瘤细胞NS—1株培养液对小鼠红细胞免疫粘附作用的影响进行了研究,现报告如下.     

荧光素酶基因在转化烟草中的表达

来源于萤火虫的荧光素酶结构基因与花椰菜花叶病毒35SRNA启动子以及胭脂碱合成酶DNA3’末端结构相拼接,构成一融合基因.通过叶盘感染法将该融合基因引入烟草叶盘,把选择诱导培养基上形成的愈伤组织转到选择分化培养基后能很快分化出芽点,继而长成完整的再生植株.对再生植株提取物发光试验表明,外源基因已整合到烟草细胞的核基因组上,并能在烟草中表达.带有这种融合基因的重组质粒pBC341具有KpnI、SstI等单一的酶切位点,因而也可作为常规的基因载体.