兔源强毒力金黄色葡萄球菌荧光定量PCR检测方法的建立

为了建立一种快速、特异性强且敏感性高的兔源强毒力金黄色葡萄球菌检测方法,本试验根据金黄色葡萄球菌pvl基因的保守序列设计了特异性的引物和探针,通过反应条件的优化,建立了检测兔源强毒力金黄色葡萄球菌的荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法耗时短,仅需约50 min就能完成检测,较已报道的双重PCR方法和环介导等温扩增方法均省时;该方法特异性强,对兔源低毒力金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌、肺炎克雷伯菌、魏氏梭菌、大肠杆菌和阴性对照(灭菌ddH₂O)均无交叉反应;该方法敏感性高,最低检测限为10拷贝/μL,分别是已报道的双重PCR方法和环介导等温扩增方法的1 000倍和10倍。此外,该方法重复性好,批内和批间重复性试验的变异系数均小于2%。应用该方法检测126份已知结果的临床样品,检测结果与已知结果、已报道的双重PCR方法和环介导等温扩增方法的检测结果完全一致。该方法的建立不仅丰富了兔源强毒力金黄色葡萄球菌的检测方法,也为该菌的快速检测提供了更有力的技术支持。     

关于大力恢复和发展湖南省冬绿肥生产的建议

为了大力促进我省冬绿肥生产的迅速恢复和发展,湖南省农学会于1990年8月11日召开了有关专家座谈会,现将专家讨论意见综合如下。 一、湖南冬绿肥生产的现状与问题 冬季绿肥是我省农业生产的重要有机肥源,种植绿肥对于肥田改土、培肥地力,保持良好的生态环境,促进农业高产稳产和持续增产有着十分重要的作用。60年代和70年代我省农村广大干群对冬绿肥的生产十分重     

猪免疫后发病原因的分析

猪免疫后,经过一定时间,体内产生了抗体,机体获得了免疫力,就可以防止猪传染病的发生。但是,由于某些原因的存在,使得猪在免疫后仍会患病。现将分析原因如下。     

加强农村基层防检队伍建设刻不容缓──朝阳五（市）县十乡镇的调查报告

加强农村基层防检队伍建设刻不容缓朝阳五（市）县十乡镇的调查报告于国江赵莲忠程秀珍牛志李景山林松华李爱芹＊朝阳市双塔区动物检疫站农村是肉食品主要原料产地，也是传染病易发处，是防、检疫的重点。但现实生活中农村基层防检队伍属于薄弱环节，从１０个乡镇、９个...     

兔源F型多杀性巴氏杆菌荧光定量PCR检测方法的建立

为建立特异性强且敏感性高的兔源F型多杀性巴氏杆菌(Pm)快速检测方法，本实验根据F型Pm fcbD基因的保守序列设计特异性引物和探针，经反应条件优化，建立了检测兔源F型Pm的荧光定量PCR方法。利用该方法检测兔源F型Pm、兔源A和D型Pm、支气管败血波氏杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、魏氏梭菌和金黄色葡萄球菌等临床常见兔源病原菌，结果显示，该方法仅对兔源F型Pm检测为阳性，其余病原菌均为阴性，特异性强。利用该方法分别检测10倍倍比稀释(1×10⁸拷贝/μL～1×10⁰拷贝/μL)的兔源F型Pm基因组DNA，进行敏感性试验，结果显示该方法的检测限为10拷贝/μL，敏感性分别是已报导的双重PCR方法和环介导等温扩增方法的100倍和10倍，敏感性高。利用该方法对不同稀释度的质粒标准品进行批内和批间重复性试验，结果显示，批内和批间变异系数均小于3%，重复性好。利用该方法检测64份已知结果的临床样品，结果显示该方法的检测结果与已报导的双重PCR方法和环介导等温扩增方法检测结果的符合率均为100%，准确性高。本研究首次以fcbD为靶基因建立兔源F型Pm的荧...