猫白介素-18基因的克隆、序列分析及其表达

用猫白介素18(interleukin,IL-18)基因特异性引物对刀豆蛋白(ConA)刺激后猫外周血单核细胞(PBMCf)总RNA进行了RT-PCR扩增,并将扩增产物纯化后克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定。结果该基因全长579bp,编码192个氨基酸(GenBank登录号:DQ100372)。在推导的猫IL-18氨基酸序列中,无信号肽序列和潜在的N-联糖基化位点,但存在4个Cys残基。与不同物种IL-18相比,猫IL-18与犬、羊、牛和猪IL-18核苷酸序列有较高的同源性,分别为89.8%、88.6%、88.4%和88.1%,但与小鼠和鸡IL-18有明显的种属差异。将目的基因片段进一步亚克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pET28a中构建了重组质粒pETIL-18,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG诱导。结果重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到分子量为27.5kD的重组目的蛋白。经凝胶薄层扫描,目的蛋白表达量可占菌体蛋白的13.6%。     

A型流感病毒跨种传播和致病性相关蛋白研究进展

A型流感病毒是重要的人和动物病原体,每年都会在人群中引发季节性流感流行,偶尔还会引发全球流感大流行,对公共卫生安全构成严重威胁.研究发现,A型流感病毒的跨种传播与该病毒的多个蛋白有关,其中血凝素是该病毒宿主范围的主要限制因素,但聚合酶蛋白和非结构蛋白1(NS1)的作用也不容忽视.A型流感病毒通过不断地适应各类宿主和长期...     

小熊猫源犬瘟热病毒全基因序列的克隆及序列分析

本研究对军事兽医研究所病毒二室分离驯化后的小熊猫源犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)基因组进行全序列测定,并对其基因组特征及H基因遗传稳定性进行比较分析。根据GenBank公布的犬瘟热病毒全长基因组序列设计合成17对特异性引物,以小熊猫源犬瘟热病毒总RNA为模板,RT-PCR进行分段扩增,并克隆到pEASY-Blunt Simple载体中,经测序、拼接获得全长cDNA序列。结果显示,小熊猫源犬瘟热病毒全基因序列与GenBank登录号分别为AF014953、AY445077、AY542312、AY466011、AY386316、AF164967、EU716337、EU726268、AY443350、AB474397、GU138403和AY649446的12个不同毒株全基因序列的同源性分别为86.6%、92.4%、92.5%、92.5%、94.3%、96.3%、95.9%、87.1%、94.5%、92.3%、87.4%和94.6%,与标准强毒株A75/17株(AF164967)的亲缘关系最近,全基因同源性达96.3%,但与疫苗株Onderstepoort(AF014953)亲缘关系相对较远,同源性为86.6%。小熊猫源犬瘟热病毒H基因与其他不同地区具有代表性的30株CDV进化树分析显示,小熊猫源犬瘟热病毒属于Asia Ⅰ型,H蛋白中309－311位氨基酸残基所形成的潜在糖基化位点,为疫苗株没有而野毒株所共有的,并且可能与病毒的免疫原性有关。因此,致弱的小熊猫源CDV在预防免疫的针对性上可能强于已有的疫苗株。     

抗犬瘟热病毒荧光标记单抗的制备和初步鉴定(英文)

[Objective] The aim of the present study was to develop a direct immunofluorescence method for the diagnosis of canine distemper (CD) with FITC-conjugated monoclonal antibodies (FITC-McAb). [Method] The McAb against CDV, designated as CE3, was purified with protein G and labeled with FITC through agitation method. After purification and identification, the optimal working concentration of FITC-labeled CE3 was determined. Then 61 clinical samples of suspected canine distemper were detected by direct immunofluorescence assay. [Result] The absorption test, blocking test and specificity test showed that the labeled antibody had high specificity and sensitivity, but didn't have cross reaction with canine parvovirus (CPV), canine parainfluenza virus (CPIV), canine adenovirus (CAV) and rabies virus (RV). The optimal working concentration was 1∶80. The positive rate of clinical suspected samples was 48%. [Conclusion] The direct immunofluorescence assay developed in this study was rapid, specific and convenient, and had great significance for the early diagnosis of canine distemper.     

抗犬瘟热病毒荧光标记单抗的制备和初步鉴定

1材料与方法 1．1材料 1．1．1病毒与细胞。犬瘟热病毒（CDV）、狂犬病毒（RV）、犬细小病毒（CPV）、犬副流感病毒（CPIV）、犬腺病毒（CAV），非洲绿猴肾细胞（Vero）、犬肾细胞（MDCK）、猫肾细胞（F81），犬瘟热病毒单克隆抗体CE3由军事医学科学院军事兽医研究所犬病研究中心提供。     

甘薯悬浮细胞系的建立及对抗草甘膦基因的遗传转化

选取8个四川主栽甘薯品种为材料,剥离茎尖诱导胚性愈伤组织,建立胚性细胞悬浮培养系。以烟草叶片和川薯20悬浮细胞为受体材料,利用农杆菌浸染方法转化抗除草剂基因EPSPS。结果表明,经PCR检测及草甘膦喷施试验后,获得了抗草甘膦阳性甘薯植株13株、阳性烟草植株25株,此实验为以EPSPS基因作为遗传转化的标记基因提供了帮助。     

四川榨菜

榨菜是十字花科芸苔属芥菜中以肉质茎为产品的一个变种.四川榨菜是四川省的名优土特产,其中涪陵榨菜素以脆、嫩、鲜、香的传统风味而著称,又是中国食品工艺宝库的优秀遗产.涪陵榨菜与法国甜酸甘蓝、欧洲酸黄瓜同誉为世界三大著名成菜,又有涪陵榨菜与欧洲酸菜、日本酱菜并称世界三大名腌菜之说. 四川榨菜始见于1898年涪陵县荔枝乡邱家湾.邓炳成在邱家大院用青菜头,仿腌制大头菜的方法加以改进,腌制成了榨菜,时称"涪陵榨菜”.到光绪末年逐步形成商品运销武汉、上海等地.1914年已规模性生产,逐年发展到长江沿岸四川各地.涪陵榨菜年生产约占全国产量的1/3以上,销往国内29个省市自治区,出口日本、港澳地区和东南亚一带,并进入欧洲和拉美市场.20世纪30年代以后其生产技艺传人浙江杭嘉湖平原的海宁、余姚、萧山、桐乡、黄岩、温岭、温州、宁波等地.     

西藏野生可食性植物资源

西藏自治区位于我国的西南边陲,面积120多万平方公里.境内的喜马拉雅山、冈底斯山、念青唐古拉山、昆仑山及唐古拉山,自南至北,东西横亘;由西向东的雅鲁藏布江流域经本区的南部;著名的澜沧江、怒江、金沙江则由北向南蜿蜒于东南.正因为西藏高原复杂而独特的自然条件,形成了丰富多样的植物资源种属,初步统计,目前可知的西藏野生可食性植物资源39科73属103种(含变种).     

决明的栽培

决明(Cassia tora L.)又名草决明、假花生、圆草决.豆科,一年生亚灌木状草本.长江以南普遍分布,生于山坡、旷野及河滩沙地.决明在<神农本草经>中被列为上品.陶弘景日:"叶如茳芒,子形马蹄,呼为马蹄决明,……用之当捣碎".李时珍日:"此马蹄决明也,以明目之功而名".     

孜然芹

孜然芹(Cuminum cyminum L)别名孜然,原产埃及、埃塞俄比亚.我国新疆有栽培,并列入该自治区传统的土特产;甘肃省1988年由新疆引种试种成功;内蒙古自治区亦有生产. 1生物学特性 孜然芹系伞形科孜然芹属1年生草本,高20～40cm,全株(除果实外)光滑无毛.具叶柄或近无柄,有狭披针形的鞘;叶片3出2回羽状全裂,末回裂片狭线形.