宠物克隆及应用前景

世界上第一只体细胞克隆猫CC于2002年由美国科学家克隆成功。从此开辟了宠物克隆市场，并最终形成了克隆宠物的国际性行业。韩国是世界上唯一成功克隆狗的国家，于2005年利用体细胞核转移技术克隆出世界上第一只克隆狗“斯奴比”，并于2009年开发出用脂肪组织的干细胞克隆狗的新技术。克隆宠物的成功，使宠物主看到了逝去的爱狗、爱猫。也使商家看到了巨大的潜在商业价值。宠物克隆在美国已经被商品化，很多人对于克隆宠物伦理道德问题的关注超过对商业价值的关注。克隆，成为20世纪最重大也是最有争议的科技突破之一。     

深圳市生态监测站点高等动物多样性与植物多样性的关系研究

采用植被生态学及高等动物生态调查方法,研究了深圳市大鹏新区七娘山东北部、坪山新区田心山的赤坳山地、福田区莲花山东部与东南部、南山区小南山西北部及东部和宝安区羊台山应人石山地等5个生态监测站点的植物群落结构特征、多样性与高等动物多样性的关系。结果表明:在研究期间,观测到这5个站点的野生高等脊椎动物种类分布为七娘山东北部有33种、莲花山有23种、田心山8种、小南山17种及羊台山10种;发现鸟类的多样性与树种密切相关,而且与各区域的植物多样性有关,即植物多样性高的区域,其高等动物的数量也多;表明不仅是植被的高度指标高的区域,其高等动物的种类数会高,而且高等动物的多样性水平与植物群落的科、属、种的综合丰富度及种类的丰富度指数存在正的相关关系,与植物种类的辛普森指数也存在正的相关关系;而与植被盖度指标的关系不明显。该结果可对了解深圳乃至中国范围内的城市及城郊区域生物多样性的保护及高等动物的分布、动态变化及与植物的关系状况,以及进一步的研究提供理论参考。     

基层动物卫生监督工作探析

畜产品质量安全是农产品质量安全的重要内容,而动物卫生监督工作是畜产品质量安全的重要保障,它不仅关系到畜牧产业的安危,也直接关系到人民群众身体健康和公共卫生安全.受各种因素和条件的制约,基层动物卫生监督工作仍然显得十分薄弱,与新形势要求差距较大.重视和加强动物卫生监督工作显得尤为迫切.     

人类PGAM基因的电子克隆及生物信息学分析

采用生物信息学的方法,从UniGene簇Hs.632918中选择1条人磷酸甘油酸变位酶（Phosphoglycerate mu-tase,PGAM）的表达序列标签（Expressed sequence tag,EST）AY007118.1作为种子序列进行电子步移,得到一长为2 750 bp的cDNA序列.对其进行开放阅读框（Open reading frame,ORF）分析,发现该cDNA序列具有完整的ORF框架,ORF长度765 bp,共编码254个氨基酸.cDNA 5’端具有Kozak序列、TATA盒和CAAT框,3’端具有加尾信号和Poly A尾巴.对该序列进行限制性酶切位点、CpG岛、基因定位分析,结果发现了81个酶切位点,一个长度为627 bp、GC含量为55%、Y值为0.695的CpG岛,最后将该基因定位于第12号染色体的长臂上.同时对PGAM蛋白的二级结构和特殊结构进行了初步预测.结果显示,PGAM蛋白中存在α螺旋、β-折叠片和无规卷曲结构,没有跨膜结构的片段,无信号肽,蛋白定位于细胞质或细胞核.     

猪骨桥蛋白基因的组织差异表达

为了研究猪骨桥蛋白基因(Osteopontin,OPN)组织特异性的表达规律,采用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)分析方法,以β-actin基因为内参,对猪OPN基因在心、肝、脾、肺、肾、大脑、小脑、垂体、下丘脑和子宫内膜等10种组织中的mRNA表达水平进行了检测.结果表明,OPN基因在子宫内膜的表达量为最高,其次是在小脑,在心、肝、脾和肺也有不同程度的表达,而在肾、下丘脑和垂体的表达量很少,从而提示OPN基因在子宫内膜中可发挥重要作用.     

猪肌肉组织中ApoE基因5′调控区甲基化的研究

【目的】研究猪肌肉组织中猪载脂蛋白E(Apolipoprotein E,ApoE)基因5′调控区的DNA甲基化状况。【方法】以180日龄长白母猪为试验动物,采集其肌肉组织,提取其DNA,经亚硫酸氢盐修饰后用作PCR反应模板;通过生物信息学预测猪ApoE5′调控区潜在的CpG岛,根据预测结果选用甲基化特异性引物对CpG岛进行PCR扩增,对回收、纯化的PCR产物进行克隆和测序,并与GenBank中的ApoE5′调控区序列进行比对,分析CpG岛的甲基化水平。【结果】生物信息学预测发现,猪ApoE基因5′调控区有2个CpG岛,第1个CpG岛有10个CpG位点,第2个CpG岛有12个CpG位点;PCR扩增获得长度分别为233bp的CpG岛1和288bp的CpG岛2序列,这2个CpG岛均存在着9个甲基化CpG位点。【结论】猪ApoE基因5′调控区是CpG位点的富集区域,2个CpG岛存在不同程度的甲基化。     

长大二元杂交猪胎儿成纤维细胞的生物学特性

【目的】研究长大二元杂交猪胎儿成纤维细胞的生物学特性。【方法】采用室温消化法从妊娠30d的长大二元杂母猪胚胎中分离胎儿成纤维细胞,利用MTT法检测第5、10、15、25、35、45、60、70代胎儿成纤维细胞的增殖能力,通过倒置显微镜观察不同代数的细胞形态,流式细胞仪分析细胞周期变化,DAPI染色观察细胞核染色质的形态以及衰老相关β-葡糖苷酶活性的染色测定等方法来判断细胞的衰老程度。【结果】①采用消化液室温消化法成功分离到猪胎儿成纤维细胞,细胞具有典型的成纤维细胞形态。②猪胎儿成纤维细胞于生长初期1～6d呈对数增长,此后进入平台期。【结论】随着细胞代数的增加,细胞的增殖能力虽有所下降,但仍然呈稳定的增长状态,各代次猪胎儿成纤维细胞生长良好。     

猪胎儿成纤维细胞SOD1基因差异表达研究

 在研究模式生物衰老机制的过程中,发现衰老受某些特定基因的调控。为研究细胞内铜锌超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD,SOD1) 在不同代数的猪胎儿成纤维细胞的差异表达,本试验收集正常传代生长的5,10,15,20,25,30,35,40,45,50,55,60,65,70代的猪胎儿成纤维细胞,分别提取细胞总RNA;采用RT-PCR技术,检测不同代数猪胎儿成纤维细胞SOD1的表达。结果表明猪SOD1在第5代猪胎儿成纤维细胞中表达水平最高,随着细胞代数的增加,表达量逐渐下降,到第70代表达量为最低。结果将为进一步揭示细胞衰老的分子机制提供有价值的参考,同时为丰富猪的分子生物学提供新素材。     

对平利县动物卫生监督工作的探索与思考

畜产品质量安全是农产品质量安全的重要内容。动物卫生监督工作是畜产品质量安全的重要保障,不仅关系到畜牧产业的安危,也直接关系到人民群众身体健康和公共卫生安全。当前发生的一系列畜产品质量安全事件,都与动物卫生监督工作有着必然的内在联系。尤其是新修订的《动物防疫法》颁     

链球菌2型对恩诺沙星耐药机制及耐药株毒力变化研究进展

猪链球菌病(Swine Streptococcosis,SS)是由多种溶血性链球菌引起的急性发热性人兽共患传染病,是近年来严重危害我国养猪业发展的新发细菌性传染病。猪链球菌耐药问题非常突出。本文对链球菌2型对恩诺沙星耐药机制及耐药株毒力变化研究进展进行综述,重点介绍猪链球菌2型逐渐演变为耐药菌时,其毒力因子和致病性之间的关系。最大限度地降低细菌耐药性与延长抗菌药物的疗效周期是人类所面临的长期挑战。