自噬通量在小檗碱抑制奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡中的作用

为探究小檗碱对脂多糖诱导奶牛子宫内膜上皮细胞（BEECs）凋亡的调控机理,首先利用CCK8法确定添加药物的细胞毒性,然后将BEECs分为空白（C）组、脂多糖（LPS）组（1μg/mL）、小檗碱（BBR）组（BBR10μmol/L+LPS 1μg/mL）、氯喹（CQ）组（CQ 20μmol/L+BBR 10μmol/L+LPS 1μg/mL）,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用Western blot检测BAX、BCL2、LC3II、P62蛋白表达量。结果显示：LPS组BEECs凋亡率和BAX/BCL2较空白组升高（P<0.01）;BBR组细胞凋亡率和BAX/BCL2低于LPS组（P<0.01）;CQ组细胞凋亡率高于其他3组（P<0.01）,而BAX/BCL2与空白组差异不显著。LPS组BEECs表达P62高于空白组（P<0.01）;BBR组与LPS组相比LC3II升高（P<0.05）、P62降低（P<0.01）;CQ组LC3II高于其他3组（P<0.01）,CQ组P62与空白组、BBR组差异显著而与LPS组差异不显著。说明LPS降低BEECs自噬通...     

猪、犬旋毛虫成虫免疫原性试验

通过提取猪、犬旋毛虫成虫抗原，制备成虫油佐剂免疫原，在小鼠体内进行同源特异性免疫试验和交叉免疫试验。试验得到猪旋毛虫成虫抗原同源免疫减虫率为５５．８０％，其对犬旋毛虫的交叉免疫减虫率是３５．１１％；犬旋毛虫成虫抗原同源免疫的减虫率为３９．００％，其对猪旋毛虫的交叉免疫减虫率是２４．９６％。试验结果揭示，猪、犬旋毛虫成虫具有一定的免疫原性，其交叉免疫减虫率低于同源特异性免疫。猪旋毛虫成虫抗原对犬旋毛虫的交叉免疫与犬旋毛虫自身的同源特异性免疫差异不显著。     

热休克对小鼠胚胎成纤维细胞CaM mRNA和HSF活性的影响

试验分别以38、40和42℃对原代培养的小鼠胚胎成纤维细胞进行热休克处理,采用半定量PCR方法和凝胶迁移阻滞(EMSA)对CaM mRNA和HSF活性进行检测,并与对照组(37℃)比较,以确定热休克对小鼠胚胎成纤维细胞CaM mRNA和HSF活性的影响。结果表明,38℃热休克处理组小鼠胚胎成纤维细胞的CaMmRNA表达...     

CaM对小鼠胎儿成纤维细胞Hsp70表达的影响

[目的]证实小鼠胎儿成纤维细胞中钙调蛋白 (calmodulin,CaM) 基因参与热应激诱导型热休克蛋白70(Hsp70)的基因表达并明确其作用条件.[方法]取12.5 d孕鼠胚胎制备成纤维细胞(MEF),上述细胞随机分为对照组和热应激组:对照组在37℃条件下培养,热应激组包括I组(39℃、0.5 h),Ⅱ组(39℃,1 h),Ⅲ组(39℃,1.5 h),Ⅳ组(41℃、0.5 h),V组(41℃、1 h),Ⅵ组(41℃、1.5 h);每组3个重复.将选择的热应激组和对照组细胞分别加入不同浓度(25、50及100 mm=ol·L<'-1>)钙调蛋白拮抗剂W7,运用RT-PCR检测Hsp70、CaM mRNA表达量.[结果] 39℃和41℃热应激组Hsp70 mRNA表达量显著高于常温对照组(P<0.05):39℃应激1h的Hsp70 mRNA表达量极显著高于其它各组(P<0.01);39"C应激0.5 h和1 h CaM mRNA表达量极显著高于其它各组(P<0.01);41℃热应激组的CaM mRNA表达量与常温对照组比较差异不显著(P>0.05).在培养液中加100 mmol·L<'-1> W7、分别于37℃和39℃处理1 h后,其成纤维细胞的Hsp70 mRNA表达量极显著低于相应对照组 (P<0.01).[结论]中度热应激条件下,Hsp70和CaM基因表达量呈正相关,且39℃应激1 h可以显著诱导Hsp70和CaM基因表达;CaM通过某种途径参与了Hsp70基因表达.     

副猪嗜血杆菌黏附基因的表达和免疫原性鉴定

为获得副猪嗜血杆菌(HPS)黏附素基因的表达产物并对其进行免疫原性鉴定,本研究采用PCR技术扩增了HPS黏附素基因序列,将扩增产物与表达载体pET-32a(+)连接,得到表达重组质粒。通过EcoRⅤ和HindⅢ双酶切鉴定和测序确认正确后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。经SDS-PAGE电泳分析,获得了59.5ku的表达产物,与预期大小的黏附素蛋白分子量一致。经western blot检测,表达产物与HPS阳性血清反应,证明表达产物具有一定的免疫活性。提示本研究所表达的蛋白将有助于HPS的血清学诊断和疫苗的研发。     

水貂细菌性疾病的病原学调查

为调查山东省水貂常发细菌病的病原学资料,分别对患病水貂进行了病理剖检、细菌的纯培养和生化鉴定。经分离鉴定确定致病菌的种类为变形杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、克雷伯氏菌、耶尔森氏菌、葡萄球菌和绿脓杆菌,并对水貂细菌病的发病原因和规律进行了探讨。     

奶牛子宫组织内肥大细胞分布规律的研究

肥大细胞（MC）是一种包含嗜碱性颗粒的多功能细胞，广泛存在于人和动物体内。MC能分泌多种介质，参与多种生理反应，与动物某些变态反应性疾病、寄生虫感染、某些非特异性炎症和肿瘤性疾病有密切关系。要揭示MC在奶牛生殖中的各种作用，就必须首先揭示其在子宫内不同部位的分布规律，这是研究子宫内MC的基础性工作。为此，特设计并实施了本试验。     

小尾寒羊复旧期子宫细胞凋亡的研究

应用透射电镜和原位末端标记染色法,分别对10只小尾寒羊子宫复旧期(产后1~31 d)子宫组织的细胞凋亡情况进行了观察。结果发现小尾寒羊子宫复旧期的子宫组织细胞一直存在着明显的细胞凋亡现象,与对照组差异显著;其中在产后19 d凋亡细胞最多,结果表明:细胞凋亡是实现小尾寒羊子宫复旧的主要途径之一。     

不同旋毛虫隔离种在猪体内的分布

本文研究了黑龙江省猪旋毛虫和国际标准株旋毛形线虫（Trichinella spiralis)在猪体内的分布情况，结果表明，猪旋毛虫和T.spiralis在猪体内寄生寄生密度较大的部位是：膈肌、舌肌、咬肌、腓肠肌、肩胛肌、肋间肌、颈肌、前腿肌，臀肌和背最长肌寄生密度较小。     

猪、犬旋毛虫成虫免疫原性试验

旋毛虫病是一种危害严重的人兽共患寄生虫病 ,各国学者对旋毛虫免疫学进行了大量的研究。现已证实旋毛虫在黑龙江省有两个隔离种 :猪旋毛虫和犬旋毛虫。然而它们的免疫学研究报道较少 ,隔离种之间的交叉免疫方面的研究尚属空白 ,所以开展此项研究对免疫学、分类学的深入研究具有重要意义。1　材料和方法1.1　材料1.1.1　旋毛虫虫种　猪旋毛虫 ,来自黑龙江省海伦县猪体内 ,在小鼠中继 3 5代 ,国际认证为旋毛形线虫 (Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａｓｐｉ ｒａｌｉｓ) ,编号ＩＳＳ5 3 3 ;犬旋毛虫来自黑龙江省五常县犬体内 ,在小鼠中继 3 5代 ,国际认…