鸡血清胰高血糖素、胰岛素、瘦素和生长激素释放肽浓度的检测方法研究

蛋鸡和肉鸡的采食量、体重迥异[1],是研究动物采食行为理想的模式动物之一.鸡血液中胰高血糖素(GL)、胰岛素(INS)、瘦素(LEP)和生长激素释放肽(GHR)等激素的水平可以部分反映鸡所处的生理状态,是采食调节的主要末梢信号[2].放射免疫法是利用抗体抗原反应,精确定量微量蛋白质和多肽的方法之一[3],但是,鸡专用的市售放射免疫试剂盒很少,上述指标的检测比较困难.鸡GL、INS、LEP和GHR分别由151、107、163和116个氨基酸组成,与人类对应的激素相比,氨基酸序列的同源性分别为53％、64.49％、79.04％和36.97％.本研究选用市售人抗放射免疫试剂盒,建立鸡血液中GL、INS、LEP和GHR等指标浓度的测定方法,以期为今后开展鸡采食行为学研究提供方法.     

饲粮中添加植物甾醇、枯草芽孢杆菌及复合酶制剂对育肥猪生长性能和肉品质的影响

为研究不同剂量的植物甾醇、枯草芽孢杆菌及复合酶制剂对育肥猪生长性能和肉品质的影响,试验分批选取了600头体重60 kg左右的杜×长×大三元杂交商品猪,随机分成4组,每组150头猪。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,试验Ⅰ组饲喂基础日粮+植物甾醇(75 g/t)+枯草芽孢杆菌(20 g/t)+复合酶制剂(100 g/t),试验Ⅱ组饲喂基础日粮+植物甾醇(150 g/t)+枯草芽孢杆菌(40 g/t)+复合酶制剂(200 g/t),试验Ⅲ组饲喂基础日粮+植物甾醇(300 g/t)+枯草芽孢杆菌(80 g/t)+复合酶制剂(400 g/t),试验周期为50 d。试验结果表明:饲料中添加了植物甾醇、复合酶制剂和枯草芽孢杆菌可显著提高育肥猪的平均日采食量,平均日增重,降低料肉比(P0.05)。试验Ⅱ组与试验Ⅰ组相比差异显著,其末重,平均日采食量,平均日增重分别比试验Ⅰ组提高4.87%、3.81%、10.78%,料肉比降低6.8%。试验Ⅱ组与试验Ⅲ组对比差异不显著。在肉品质方面,试验组在背膘和肉色方面与对照组相比差异显著(P0.05),可明显改善肉色。     

喹诺酮类药物多组分HPLC分离法研究

本文确定了以Atlantis dC18 (150 mm×46mm,5μm)色谱柱(Waters公司),0.05 mol/L磷酸溶液(pH2.40)和乙腈为流动相,流速1.2 mL/min,柱温30℃,激发波长280 nm、发射波长480 nm的液相色谱条件,用高效液相-荧光检测法同时测定9种喹诺酮类药物,取得良好的分离效果.建立了喹诺酮类药物多组分分离检测技术,为饲料中喹诺酮类药物测定方法研究提供参考.     

高效液相色谱法测定组织中9种喹诺酮类药物

喹诺酮类药物是人工合成的具有4-喹诺酮环基本结构的广谱杀菌性抗菌药物。由于其耐药性的出现,通过长期、低水平的接触方式产生各种慢性、蓄积毒性,摄入过多,具有“三致”作用,并对人们的健康造成重大危害。因此,建立一种组织中喹诺酮类多组分检测技术至关重要。本文通过摸索,确定和优化高效液相色谱法的检测条件及猪、禽组织试样的提取、净化,最终确定了以Atlantis dC18（150mm×4．6mm 5μm）为色谱柱（Waters公司）,0．05mol／L磷酸溶液（pH值2．40）和乙腈组成梯度作为流动相,流速1．2mL／min,柱温30％,以激发波长280nm、发射波长480nm为检测波长的色谱条件,建立了以高效液相色谱一荧光检测法同时测定组织中9种喹诺酮类药物的最佳方法。该法简便、快速、准确、灵敏度高、重现性好。该方法浓度在0．05～4μg／mL时9种物质的相关系数r均在0．9999以上,平均回收率均在80％以上,RSD均在7．5％以内。     

浙江省养猪场疫病防治工作的问题及建议

近年来 ,随着规模猪场的迅猛发展 ,养猪场“预防为主、防重于治”的防疫意识有了较大的提高 ,极大多数规模猪场结合本场实际制订了具体的防疫制度和措施 ,并收到了一定的效果。笔者从杭州、萧山、嘉兴、诸暨等市、县的一些规模猪场疫病防治情况调查来看 ,仍存在不少问题 ,一定程度上制约了养猪生产的健康发展。1　存在问题1 .1　引种问题　部分规模猪场引种时只注重种猪的生产性能 ,忽视对供种猪场防疫设施等方面的考察和对拟引入种猪潜在疫病的实验室监测 ,结果往往引入潜伏带菌 (毒 )种猪。其次是种猪引入后没有树立隔离饲养观念 ,导致引…     

丁酸梭菌对产肠毒素大肠杆菌刺激猪肠道上皮细胞炎症反应的抑制效果

本试验旨在通过丁酸梭菌(CB)、产肠毒素大肠杆菌(ETEC)和猪肠道上皮细胞(IPEC-J2细胞)共培养细胞模型,探讨CB对ETEC产黏附基因、产肠毒素基因以及ETEC刺激IPEC-J2细胞炎症相关因子表达的影响。试验设5组,分别为对照组、ETEC组、ETEC+CB 106组、ETEC+CB 107组、ETEC+CB 108组。ETEC组在IPEC-J2细胞培养液中加入1×108CFU/mL的ETEC,ETEC+CB 106组、ETEC+CB 107组、ETEC+CB 108组在IPEC-J2细胞培养液中加入1×108CFU/mL ETEC的同时分别加入1×106、1×107和1×108CFU/mL CB,对照组IPEC-J2细胞培养液中不添加ETEC和CB,37℃培养2 h后用显微镜观察细胞形态并收集细胞。采用实时定量PCR分析ETEC产黏附基因FaeG与肠毒素基因estA、estB及IPEC-J2细胞中促炎性因子白细胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-6、IL-8与抗炎性因子IL-10 mRNA的相对表达水平。结果显示:CB可有效抑制ETEC诱导的IPEC-J2细胞损伤脱落。与ETEC组对比,不同浓度CB干预后显著抑制了ETEC产黏附基因FaeG与肠毒素基因estA、estB的表达(P0.05),且CB浓度为1×108CFU/mL时效果最明显。与对照组相比,ETEC组IPEC-J2细胞中促炎性因子IL-1β、IL-2、IL-6和IL-8 mRNA的相对表达水平显著升高(P0.05),抗炎性因子IL-10 mRNA的相对表达水平显著降低(P0.05)。而添加不同浓度CB干预后,IPEC-J2细胞中IL-1β、IL-2、IL-6和IL-8 mRNA的相对表达水平较ETEC组显著降低(P0.05),IL-10 mRNA的相对表达水平则较ETEC组显著升高(P0.05),其中CB浓度为1×108CFU/mL时对IL-1β、IL-6和IL-8表达的抑制效果最强,浓度为1×107CFU/mL时对IL-2表达的抑制效果最强。以上结果表明,CB可降低ETEC黏附基因和产肠毒素基因表达,抑制ETEC诱导的猪肠道上皮细胞的炎症反应,降低ETEC对猪肠道上皮细胞的损伤作用。     

两种中药制剂对IPEC-1细胞因子表达的影响

为研究戈戈健和本草劲方对猪肠上皮细胞因子表达的影响,本实验分别以200μg/m L的戈戈健和500μg/m L的本草劲方溶液处理猪肠上皮细胞,培养后收集细胞,提取总RNA,反转录成c DNA,通过荧光定量PCR测定各种相关细胞因子m RNA表达水平。结果显示,戈戈健能显著上调IFN-β(P0.05)、IL-6(P0.05)、IL-8(P0.01)、TNF-α(P0.05)和TGF-β(P0.05)m RNA表达水平;本草劲方能显著上调IFN-α(P0.05)、IFN-β(P0.01)和TGF-β(P0.05)m RNA表达水平,显著下调IL-6(P0.05)和TNF-α(P0.01)m RNA表达水平。表明这两种中药制剂均能通过诱导I型干扰素产生而发挥抗病毒作用;戈戈健能通过促进抗炎因子IL-6、IL-8和TNF-α分泌来增强细胞免疫,同时上调抑炎因子TGF-β表达来防止过度炎症;本草劲方能抑制促炎因子IL-6和TNF-α的产生并促进抑炎因子TGF-β的分泌,从而增强细胞的抗炎能力。本研究为戈戈健和本草劲方用于预防和治疗猪场病毒病提供了理论依据。     

转变发展方式 完善服务体系——关于南方山区发展特色精品畜牧业有关问题的探讨

本文通过进村访户实地调研,系统分析了南方山区发展特色精品畜牧业的优势和制约因素,对如何破解制约山区畜牧业发展的瓶颈,加快推进南方山区特色精品畜牧业发展进行了一些探讨。     

高效液相色谱法测定复合预混合饲料中9种喹诺酮类药物

建立了以高效液相色谱-荧光检测法同时测定复合预混合饲料中9种喹诺酮类药物的最佳方法。该法简便、快速、准确、灵敏度高、重现性好。9种喹诺酮类药物在浓度0.05~4μg/mL范围内与峰面积呈线性相关,相关系数r>0.999 9,平均回收率均在80%以上,RSD均在7%以内。